大腸癌（colorectal cancer,CRC）是一種常見的消化道類惡性疾病,其發(fā)病率和致死率呈逐年上升趨勢,嚴(yán)重威脅人類健康。因此,研發(fā)有效防控CRC的功能分子及綠色藥物一直是科學(xué)家們的聚焦熱點。酸棗仁（Ziziphi Spinosae Semen,ZSS）是酸棗的干燥成熟種子,是使用悠久的藥食同源傳統(tǒng)中藥,其中的活性成分,如:皂苷、黃酮及三萜烯酸類等具有顯著的鎮(zhèn)靜、催眠及抗抑郁等藥理活性。目前關(guān)于酸棗仁多酚化合物的研究主要集中在鎮(zhèn)靜催眠方面,鮮見其抗腫瘤活性的報道。植物多酚因其含有豐富的活性基團(tuán),其抗腫瘤活性被廣泛報道,有潛力開發(fā)成為天然抗腫瘤藥物。因此,本課題以酸棗仁為原料,采用酸消化法從中提取獲得水溶性多酚類物質(zhì),命名為:ZSSP,并通過細(xì)胞水平和小鼠腫瘤模型評價了其抗CRC效應(yīng);同時通過色譜技術(shù)分離鑒定了ZSSP發(fā)揮抗CRC活性的主要成分,并初步探討了其抗CRC的分子機(jī)制。其研究結(jié)果如下:（1）ZSSP在細(xì)胞水平能夠發(fā)揮顯著的抗CRC活性。MTT實驗表明ZSSP對CRC細(xì)胞株HCT-116、HCT-8和HCT-8FU細(xì)胞的IC₅₀值分別為128.91... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

斯皮諾素及其衍生物[23]

第一章文獻(xiàn)綜述5絲氨酸生物合成途徑的合成以及甘氨酸的轉(zhuǎn)化（圖1.2）。研究揭示，正常情況下，當(dāng)膳食攝入蛋白質(zhì)或絲氨酸不足時，機(jī)體主要依靠內(nèi)源性甘氨酸的轉(zhuǎn)化來實現(xiàn)補(bǔ)償。圖1.2：L-絲氨酸的來源[35]Figure1.2:SourceofL-serine[35]在絕大多數(shù)腫瘤細(xì)胞中，絲氨酸生物合成途徑（Serinesynthesispathway,SSP）作為腫瘤細(xì)胞絲氨酸來源的主要方式[36]，其合成路徑主要包括三個步驟：細(xì)胞糖酵解過程中的中間產(chǎn)物3-磷酸甘油酸(3-phosphoglycerate，3-PG)通過三步酶促反應(yīng)生成絲氨酸[37]。L-絲氨酸還可以進(jìn)一步在絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶（serinehydroxymethyltransferase,SHMT，胞漿為SHMT1，線粒體為SHMT2）作用下脫甲基生成甘氨酸（glycine），同時提供一碳單位（圖1.2）。該信號通路可以為腫瘤細(xì)胞增殖所需的蛋白質(zhì)、核酸、脂肪酸和細(xì)胞膜等多種物質(zhì)提供生物前體，滿足腫瘤快速增殖的需要。3.2SSP在腫瘤代謝中扮演關(guān)鍵角色眾所周知，葡萄糖和谷氨酰胺是腫瘤細(xì)胞賴以生存的兩大重要能源物質(zhì)。葡萄糖的有氧糖酵解（warburg效應(yīng)）及谷氨酰胺代謝主要為腫瘤細(xì)胞快速增殖提供ATP和生物大分子物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物。近年來越來越多的證據(jù)顯示：絲氨酸是繼葡萄糖和谷氨酰胺之后的第三大癌細(xì)胞代謝相關(guān)物質(zhì)，SSP代謝在腫瘤代謝中發(fā)揮重要作用，且在腫瘤代謝中處于中心地位，可以調(diào)控糖酵解、三羧酸循環(huán)及谷氨酰胺代謝，而葡萄糖和谷氨酰胺又為SSP代謝提供主要原料[36]。研究顯示：腫瘤細(xì)胞主要依賴SSP途徑合成的絲氨酸轉(zhuǎn)化成甘氨酸[38,39]，甘氨酸可以驅(qū)動葉酸前體5,10-甲基四氫葉酸的合成，參與細(xì)胞內(nèi)嘌呤核苷酸等物質(zhì)的合成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制，維持其快速增殖，因此SSP可以通過調(diào)控腫瘤細(xì)胞周期中DNA復(fù)制期來影響其發(fā)生

酸棗仁多酚抗大腸癌效應(yīng)的活性成分鑒定及其分子機(jī)制6發(fā)展；此外SSP途徑生成的絲氨酸轉(zhuǎn)換為甘氨酸，合成GSH，而GSH是機(jī)體重要的抗氧化劑和自由基清除劑，可以清除ROS維持腫瘤的氧化還原穩(wěn)態(tài)[40,41]。綜上所述，SSP在腫瘤代謝中扮演著關(guān)鍵角色，并且與腫瘤細(xì)胞周期與氧化還原穩(wěn)態(tài)息息相關(guān)（圖1.3）。圖1.3：SSP在腫瘤細(xì)胞增殖中的關(guān)鍵作用[42]Figure1.3:KeyroleofSSPintumorcellproliferation[42]3.3阻斷SSP代謝可以抑制大腸癌細(xì)胞增殖SSP代謝途徑的異常激活最先發(fā)現(xiàn)于乳腺癌[43,44]、黑色素瘤[45]等腫瘤組織中；沉默SSP相關(guān)酶基因的表達(dá)，可顯著抑制這些腫瘤細(xì)胞的生長。最近多項研究顯示：SSP相關(guān)代謝酶在大腸癌中異常激活與其快速增殖密切相關(guān)。Yoon等的研究顯示：大腸癌病人腫瘤組織與正常人的大腸組織相比，SSP相關(guān)代謝酶，如PHGDH、PSAT1等的表達(dá)顯著升高[46]；Mahya等通過癌癥基因圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫分析顯示：與正常組織相比，在大腸癌腫瘤組織中，SSP通路中相關(guān)酶基因的表達(dá)均顯著升高，并且發(fā)現(xiàn)大腸癌細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽和核酸的合成與SSP來源的絲氨酸密切相關(guān)，而其它通路來源的絲氨酸沒有關(guān)系[47]；Ye等的研究發(fā)現(xiàn)，在人類大腸癌細(xì)胞及裸鼠腫瘤模型中，敲除或抑制SHMT2的表達(dá)，能夠破壞腫瘤細(xì)胞內(nèi)的氧化還原穩(wěn)態(tài)進(jìn)而抑制大腸癌細(xì)胞的生長[48]。Ma等2013年在《Cell》上的研究發(fā)現(xiàn)：PKCζ高表達(dá)能夠抑制SSP相關(guān)代謝酶PHGDH及PAST1的酶活性，抑制了SSP的合成，從而抑制了大腸癌腫瘤的生長[49]。近年來，國內(nèi)外科學(xué)家還發(fā)現(xiàn)，一些SSP關(guān)鍵代謝酶PHGDH的小分子抑制劑（如NCT-502，NCT-503）可以顯著抑制腫瘤的生長[36,50,51]。這些研究

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3344198