ETBR過表達調節(jié)T細胞歸巢相關分子治療大鼠自身免疫性心肌炎及機制探討
發(fā)布時間:2021-07-11 11:34
目的:建立實驗性自身免疫性心肌炎大鼠模型。經(jīng)大鼠尾靜脈注射內皮素B受體(endothelin B receptor,ETBR)過表達慢病毒干預自身免疫性心肌炎,觀察ETBR過表達對自身免疫性心肌炎的影響。在此基礎上,探討ETBR過表達調控ICAM-1等T淋巴細胞歸巢相關分子治療自身免疫性心肌炎的相關機制。方法:制備ETBR基因過表達慢病毒。從購買的24只雄性Lewis大鼠中隨機選出6只正常大鼠(NC組),剩余18只大鼠在第0天(免疫注射當天)及第7天分別注射豬心肌肌球蛋白,建立實驗性自身免疫性心肌炎大鼠模型。初次注射心肌肌球蛋白的18只大鼠隨機分為3組:實驗性自身免疫性心肌炎組(EAM組),ETBR基因過表達慢病毒自身免疫性心肌炎組(ETBR-oe組)和空載慢病毒自身免疫性心肌炎對照組(GFP組)。ETBR-oe組大鼠在初次免疫當天,將1×108 TU慢病毒/只(200μL)注入大鼠尾靜脈內,GFP組大鼠注入相同劑量的空載慢病毒,NC組和EAM組注入相同劑量的生理鹽水。大鼠初次免疫后第21天,進行心臟超聲心動圖檢測評價心功能變化;當天處死大鼠取血和心臟標本;ELI...
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
大鼠心肌組織病理學檢查(HE染色,×200)
第3章實驗結果18表2第21天大鼠心肌組織炎癥評分情況(均數(shù)±標準差)組別NCEAMETBR-oeGFP炎癥評分03.28±0.46*1.56±0.41**3.17±0.49△注:NC:正常對照組;EAM:實驗性自身免疫性心肌炎組;ETBR-oe:ETBR基因過表達慢病毒組;GFP:空載慢病毒對照組。*:與正常對照組比較,P<0.05;**:與實驗性自身免疫性心肌炎組比較,P<0.05;△:與實驗性自身免疫性心肌炎組比較,P>0.05。3.4免疫組化法檢測蛋白分布情況免疫組化陽性染色結果顯示為在細胞膜、細胞漿及部分間質中可見棕黃色顆粒,藍色為細胞核,特定蛋白表達越多,棕黃色顆粒顏色越深。初次免疫后第21天,免疫組化示內皮素B受體主要表達于心肌細胞膜、細胞漿中。內皮素B受體蛋白表達在EAM組心肌組織中染色深度高于正常對照組,但ETBR-oe組又明顯高于EAM組,GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。細胞間黏附分子-1在EAM組的心肌組織中染色深度明顯高于正常對照組,相比于EAM組ETBR-oe組明顯降低,GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。連接黏附分子-C、E-選擇素在EAM組、ETBR-oe組、GFP組三組心肌炎大鼠心肌組織中的染色無明差異,但棕黃色顆粒顏色深度均高于正常對照組。圖2大鼠心肌組織免疫組化(IHC×400)
本文編號:3278017
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
大鼠心肌組織病理學檢查(HE染色,×200)
第3章實驗結果18表2第21天大鼠心肌組織炎癥評分情況(均數(shù)±標準差)組別NCEAMETBR-oeGFP炎癥評分03.28±0.46*1.56±0.41**3.17±0.49△注:NC:正常對照組;EAM:實驗性自身免疫性心肌炎組;ETBR-oe:ETBR基因過表達慢病毒組;GFP:空載慢病毒對照組。*:與正常對照組比較,P<0.05;**:與實驗性自身免疫性心肌炎組比較,P<0.05;△:與實驗性自身免疫性心肌炎組比較,P>0.05。3.4免疫組化法檢測蛋白分布情況免疫組化陽性染色結果顯示為在細胞膜、細胞漿及部分間質中可見棕黃色顆粒,藍色為細胞核,特定蛋白表達越多,棕黃色顆粒顏色越深。初次免疫后第21天,免疫組化示內皮素B受體主要表達于心肌細胞膜、細胞漿中。內皮素B受體蛋白表達在EAM組心肌組織中染色深度高于正常對照組,但ETBR-oe組又明顯高于EAM組,GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。細胞間黏附分子-1在EAM組的心肌組織中染色深度明顯高于正常對照組,相比于EAM組ETBR-oe組明顯降低,GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。連接黏附分子-C、E-選擇素在EAM組、ETBR-oe組、GFP組三組心肌炎大鼠心肌組織中的染色無明差異,但棕黃色顆粒顏色深度均高于正常對照組。圖2大鼠心肌組織免疫組化(IHC×400)
本文編號:3278017
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