背景:支氣管肺發(fā)育不良（Bronchopulmonary dysplasia,BPD）是新生兒尤其是早產(chǎn)兒最常見的慢性肺部疾病,其發(fā)病率和死亡率高,嚴重威脅嬰幼兒尤其是早產(chǎn)兒的生命。雖然圍產(chǎn)期和新生兒醫(yī)學在提高早產(chǎn)兒存活率方面取得重大進展,但在BPD治療方面進展緩慢。在傳統(tǒng)醫(yī)學領域中,臨床干預和治療手段的創(chuàng)新與探索仍不能從根本上改善嚴重BPD的預后。因此,迫切需要一種新型有效的干預與治療方式來解決這一難題。近年來,間充質(zhì)干細胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）移植為BPD的治療提供了新的治療策略。臍帶間充質(zhì)干細胞（Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs）作為一種具有高度自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,其低免疫原性和免疫調(diào)節(jié)特性,使其成為MSCs移植治療免疫相關疾病的理想來源。雖然早期的臨床研究顯示了MSCs的安全性,但臨床有效性受到爭議。因此,探究影響MSCs免疫調(diào)節(jié)活性的因素是發(fā)展其有效治療策略的關鍵。體外大量擴增是MSCs在臨床應用中必經(jīng)的一個過程,伴隨的復制性衰老可能是影響MSCs臨床應用有效性的重要... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

UC-MSCs表面標志抗原表達和分化能力檢測A:顯微鏡下的形態(tài)

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文34圖1.2驗證UC-MSCs中siRNA轉(zhuǎn)染效率A:RT-qPCR檢測UC-MSCs經(jīng)siRNA處理3天后Nrf2的mRNA表達，**P<0.01。B:WB檢測UC-MSCs經(jīng)siRNA處理3天后Nrf2的蛋白表達。C:相應灰度值分析，***P<0.001。Fig1.2VerifythetransfectionefficiencyofsiRNAinUC-MSCs.A:ThemRNAexpressionofNrf2inUC-MSCsafter3daysofsiRNAtreatmentdetectedbyRT-qPCR,**P<0.01.B:TheproteinexpressionofNrf2inUC-MSCsafter3daysofsiRNAtreatmentdetectedbywesternblot.C:Correspondinggrayvalueanalysis,***P<0.001.2.3敲低Nrf2對UC-MSCs移植新生大鼠BPD模型的治療作用的影響2.3.1新生大鼠生長狀態(tài)及生存率常氧組（NOR+PBS，NOR+NC，NOR+siNrf2）中的新生大鼠生長狀態(tài)良好，皮毛光澤，吃奶好，反應靈敏活躍。（BPD+PBS）模型組和（BPD+NC，BPD+siNrf2）治療組中新生大鼠體格生長緩慢，反應差，皮毛粗糙暗淡，皮下脂肪不如常氧組豐滿。高氧暴露的新生大鼠于7d齡開始表現(xiàn)出離氧不耐受，出現(xiàn)頭部震顫，呼吸急促，皮膚發(fā)紺，活動量減少等癥狀，恢復高氧后，頭顫、氣促及發(fā)紺癥狀逐漸減輕，但仍較常氧組反應差，活動減少，隨著高氧暴露時間延長，癥狀逐漸明顯。于7d齡移植治療術后開始計算生存率，常氧組與高氧組相比，高氧組有極少數(shù)新生大鼠死亡，但是各組間的生存率無統(tǒng)計學差異（圖1.3），提示UC-MSCs以及Nrf2無改善新生大鼠生存率的作用。高氧組較常氧組體重增長明顯減緩（***P<0.001）；與（BPD+PBS）模型組比較，（BPD+NC）治療組體重增長具有統(tǒng)計學意義（*P<0.05），（BPD+NC）與（BPD+siNrf2）治療組體重增長無顯著差異，提示給予UC-MSCs治療能夠改善高氧誘導的BPD新生大鼠體重增長遲緩，但敲低Nrf2對UC-MSCs改善體重的能力無明顯影響（圖1.4）。

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文35圖1.3不同處理對BPD新生大鼠生存率的影響ns表示無統(tǒng)計學意義Fig1.3Effectsofvarioustreatmentsonthesurvivalrateofneonatalratsnsmeansnosignificant.圖1.4不同處理對BPD新生大鼠體重增長的影響ns表示無統(tǒng)計學意義，*P<0.05，***P<0.001Fig1.4Effectsofdifferenttreatmentsonweightgainofneonatalratsnsmeansnosignificant,*P<0.05,***P<0.001.2.3.2肺泡灌洗液（BALF）細胞計數(shù)新生大鼠BALF中的細胞總數(shù)能在一定程度上反映肺組織炎癥細胞浸潤情況。（BPD+PBS）模型組較所有常氧組(NOR+PBS；NOR+NC；NOR+siNrf2）新生大鼠BALF中細胞總數(shù)明顯增加（***P<0.001），（BPD+NC）治療組較BPD模型組BALF中細胞總數(shù)減少（*P<0.05)，而（BPD+siNrf2）治療組較（BPD+NC）治

【參考文獻】：
期刊論文
[1]α-硫辛酸對糖尿病合并下肢動脈血管病變患者血管舒張功能及血清氧化應激因子的影響[J]. 馮光勇,黃偉.  新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報. 2016(12)
[2]間充質(zhì)干細胞免疫調(diào)節(jié)的可塑性[J]. 黃慶雷,魏曉飛.  中國科學:生命科學. 2016(07)
[3]Secretion of immunoregulatory cytokines by mesenchymal stem cells[J]. Dobroslav Kyurkchiev,Ivan Bochev,Ekaterina Ivanova-Todorova,Milena Mourdjeva,Tsvetelina Oreshkova,Kalina Belemezova,Stanimir Kyurkchiev.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[4]早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良的炎癥相關因素研究進展[J]. 王蘭秀,宋燕燕.  國際兒科學雜志. 2014 (02)
[5]Nrf2激活劑抗皮膚氧化損傷作用的研究進展[J]. 鄧蕙妍,朱慧蘭.  國際皮膚性病學雜志. 2012 (05)
[6]IDO、免疫耐受與過敏性哮喘[J]. 廖偉,趙聰敏.  中國醫(yī)藥指南. 2008(12)



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