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紅樹莓酵素凍干粉對(duì)Ⅰ型糖尿病小鼠腸道菌群及其代謝物影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-05 21:07
  紅樹莓(Rubus ideaus L.)屬薔薇科懸鉤子屬,富含黃酮、鞣花酸和花青素等活性物質(zhì),具有抗氧化、抗腫瘤等功效,具有很高的研究?jī)r(jià)值。本課題在紅樹莓果漿中添加馬克思克魯維酵母復(fù)合短乳桿菌進(jìn)行定向發(fā)酵,制得紅樹莓酵素。用不同劑量酵素凍干粉稀釋液連續(xù)灌胃給予Ⅰ型糖尿病小鼠28 d,通過(guò)16S rRNA測(cè)序、GC-MS代謝組學(xué)分析、肝臟和回腸組織切片分析,得到如下結(jié)果。1.利用響應(yīng)面法對(duì)紅樹莓酵素的釀造工藝進(jìn)行優(yōu)化,確定最佳釀造工藝為糖添加量170 g/L,馬克思克魯維酵母+短乳桿菌接種量0.24%+2.7%,瓶裝量60 mL。2.酵素凍干粉中富含有多種生物活性物質(zhì),其中:蛋白酶活力為(60.96±3.49)U/g,SOD酶活力為(472.50±2.57)U/g,多酚含量為(472.50±2.57)mg/g,活菌總數(shù)為lg(5.05±1.26)CFU/g。3.酵素具有降血糖效果,可以降低Ⅰ型糖尿病小鼠空腹血糖值,提高小鼠糖耐量,并恢復(fù)重塑Ⅰ型糖尿病小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)代謝物,修復(fù)肝臟損傷和恢復(fù)腸道上皮和黏膜細(xì)胞的作用。4.酵素凍干粉中含有多種生物活性成分和活菌,相比單一短乳桿菌凍干粉... 

【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
一、緒論
    1.1 腸道菌群的研究進(jìn)展
        1.1.1 腸道菌群
        1.1.2 腸道菌群的多樣性
        1.1.3 腸道菌群多樣性的影響因素
            1.1.3.1 宿主的基因型
            1.1.3.2 飲食結(jié)構(gòu)
            1.1.3.3 其他因素
        1.1.4 腸道菌群與Ⅰ型糖尿病之間關(guān)系的研究現(xiàn)狀
            1.1.4.1 Ⅰ型糖尿病的基本概念
            1.1.4.2 Ⅰ型糖尿病發(fā)病機(jī)制
            1.1.4.3 腸道菌群與Ⅰ型糖尿病的關(guān)系
    1.2 酵素與腸道菌群
        1.2.1 樹莓簡(jiǎn)介
        1.2.2 酵素概述
        1.2.3 酵素對(duì)腸道菌群影響的研究現(xiàn)狀
    1.3 本課題研究?jī)?nèi)容和意義
二、材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器試劑
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 檢測(cè)方法
            2.2.1.1 菌落總數(shù)測(cè)定
            2.2.1.2 超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定
            2.2.1.3 蛋白酶活力測(cè)定
            2.2.1.4 多酚含量測(cè)定
        2.2.2 酵素凍干粉制作工藝流程
        2.2.3 菌種活化
        2.2.4 紅樹莓果漿預(yù)處理
        2.2.5 單因素實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 響應(yīng)面法優(yōu)化紅樹莓酵素釀造工藝
        2.2.7 凍干保護(hù)劑的制備
        2.2.8 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.2.8.1 預(yù)實(shí)驗(yàn)確定灌胃劑量
            2.2.8.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模
            2.2.8.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
            2.2.8.4 糖耐量實(shí)驗(yàn)
            2.2.8.5 樣本采集
        2.2.9 小鼠腸道菌群分析
            2.2.9.1 小鼠盲腸內(nèi)容物中細(xì)菌總DNA提取
            2.2.9.2 PCR擴(kuò)增條件
            2.2.9.3 生物信息學(xué)分析
        2.2.10 小鼠代謝物分析
            2.2.10.1 樣品處理
            2.2.10.2 GC-MS分析
        2.2.11 組織切片
            2.2.11.1 小鼠肝臟、結(jié)腸組織病理切片
            2.2.11.2 HE染色
            2.2.11.3 圖像采集和分析
三、結(jié)果與分析
    3.1 結(jié)果分析
        3.1.1 單因素結(jié)果分析
            3.1.1.1 糖添加量對(duì)酵素活菌數(shù)的影響
            3.1.1.2 復(fù)合菌接種量對(duì)酵素活菌數(shù)的影響
            3.1.1.3 瓶裝量對(duì)酵素活菌數(shù)的影響
        3.1.2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
            3.1.2.1 響應(yīng)面回歸模型的建立與分析
            3.1.2.2 兩因素交互作用分析
            3.1.2.3 最佳工藝參數(shù)的確定
        3.1.3 酵素凍干粉生物活性測(cè)定
        3.1.4 血糖變化值
        3.1.5 糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1.6 酵素對(duì)Ⅰ型糖尿病小鼠腸道菌群的影響
            3.1.6.1 腸道菌群多樣性測(cè)序結(jié)果
            3.1.6.2 各處理組小鼠腸道菌群的組成分析
        3.1.7 酵素對(duì)Ⅰ型糖尿病小鼠代謝物的影響
        3.1.8 肝臟、回腸病理切片HE染色結(jié)果分析
四、結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于腸道菌群治療糖尿病的研究進(jìn)展[J]. 呂海永,全春花.  吉林醫(yī)學(xué). 2020(03)
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[3]液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)錫林浩特地區(qū)馬奶中泛酸含量的測(cè)定[J]. 王亞慧,侯海榮,陳明濤,孫春玲,郝苗苗.  農(nóng)產(chǎn)品加工. 2019(24)
[4]腸道菌群與兒童1型糖尿病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 李琳珊,蘇芊,霍珊,常波.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2019(12)
[5]豆甾醇的研究進(jìn)展概述[J]. 汪帥,孫宇,李春梅,盧群.  中國(guó)藥業(yè). 2019(23)
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[7]腸道微生物與1型糖尿病的相關(guān)性研究[J]. 林瑩,楊軍紅,石倩.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2019(04)
[8]濃香型白酒中優(yōu)勢(shì)乳酸菌和酵母菌間的相互關(guān)系[J]. 羅青春,鄭佳,趙東,喬宗偉,安明哲,張霞,楊康卓.  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2019(05)
[9]野生樹莓果實(shí)總酚含量及抗氧化能力分析[J]. 張志敏,朱祥,劉針杏.  農(nóng)產(chǎn)品加工. 2018(22)
[10]高通量測(cè)序技術(shù)研究魚腥草酵素對(duì)小鼠腸道菌群的影響[J]. 趙菲,劉孝余,宮芳婧,佟長(zhǎng)青,李偉.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(32)

碩士論文
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[2]蘋果酵素對(duì)Ⅱ型糖尿病小鼠模型作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 馬巧靈.大理大學(xué) 2016
[3]蘋果酵素對(duì)小鼠腸道微生態(tài)的恢復(fù)重建作用[D]. 郭樂.大理學(xué)院 2015
[4]紅樹莓果酒酵母優(yōu)選及中試放大工藝研究[D]. 王家利.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]天然微生物酵素發(fā)酵機(jī)理、代謝過(guò)程及生物活性研究[D]. 蔣增良.浙江理工大學(xué) 2013



本文編號(hào):3170586

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