目的:觀察金釵石斛生物堿（Dendrobium nobile Lindl alkaloids,DNLA）對APP/PS1模式小鼠學習記憶功能的影響,并探討其機制是否與芳香化酶及雌激素/ERK信號通路有關(guān)。方法:采用雌、雄鼠同時進行實驗。將7月齡APP/PS1模式小鼠隨機各分為3個組（10只/組）:APP/PS1組、APP/PS1+DNLA 10 mg/kg組、APP/PS1+DNLA 20 mg/kg組;同性別野生型（Wild-type,WT）對照組:共20只,雌雄各半（10只/組）。給藥組小鼠每日灌胃給藥1次,連續(xù)給藥4個月,對照組小鼠給予同等體積的溶媒（含1%吐溫80的雙蒸水）。給藥結(jié)束前,采用筑巢實驗檢測小鼠日�；顒蛹吧鐣䦂�(zhí)行能力;Y迷宮實驗檢測小鼠短暫的學習記憶能力;使用硫黃素-S染色觀察小鼠皮質(zhì)中老年斑的情況;Western blot測定雌性及雄性小鼠皮質(zhì)中芳香化酶（Aromatase）,雌激素受體相關(guān)蛋白（ER1、ER2、GPR30）的表達,ERK/pERK蛋白的表達;APP非淀粉樣途徑中ADAM10、APP、Aβ_1-42蛋白水平;采用ELISA對血清... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

DNLA對APP/PS1模式小鼠筑巢行為能力的影響

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文魏勝焦162.1.2Y迷宮實驗Y迷宮是小鼠一種自發(fā)交替行為，自發(fā)交替行為的正確率可以反映小鼠短暫的學習記憶能力。如圖2所示，雌性APP/PS1模式小鼠的自發(fā)探索交替行為正確率明顯低于同性別WT小鼠（P<0.05），給予DNLA后小鼠的自發(fā)探索交替行為正確率后明顯增加（P<0.05）；雄性APP/PS1模式小鼠的自發(fā)探索交替行為正確率明顯低于同性別WT小鼠（P<0.05），給予DNLA后，給藥20mg/kg組小鼠的自發(fā)探索交替行為正確率明顯增加（P<0.05）。Y迷宮結(jié)果提示，DNLA在雌性及雄性小鼠中均可改善APP/PS1小鼠的空間學習記憶能力。圖2DNLA對APP/PS1模式小鼠Y迷宮實驗的影響。（A）雌性小鼠Y迷宮自發(fā)探索交替行為；（B）雄性小鼠Y迷宮自發(fā)探索交替行為。（x±SEM，n=10），與正常對照組比較，*P<0.05；與APP/PS1組相比較，#P<0.05。Fig.2EffectofDNLAonYmazeinAPP/PS1mice.(A)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinfemale;(B)ThecorrectrateofYmazetestspontaneousalternationinmale.(x±SEM,n=10),*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.2DNLA對APP/PS1模式小鼠皮質(zhì)中Aβ沉積的影響Aβ在AD模式小鼠大腦皮質(zhì)和海馬中沉積形成的老年斑是AD的病理特征之一。為了探索DNLA對APP/PS1轉(zhuǎn)基因模式小鼠大腦內(nèi)老年斑的變化情況，本研究采用硫黃素-S染色法來觀察AD小鼠腦內(nèi)老年斑的變化。經(jīng)硫黃素-S熒光染色結(jié)果可知11月齡的野生型小鼠皮質(zhì)組織中未見老年斑的沉積，而同月齡同性別的APP/PS1對照組小鼠皮質(zhì)組織形成大量老年斑，且部分聚集成團，給予DNLA后，APP/PS1給藥組小鼠皮質(zhì)中老年斑數(shù)量明顯減少，且多為小體積，老年斑數(shù)量(P<0.05)明顯被DNLA抑制。

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文魏勝焦17圖3DNLA對APP/PS1模式小鼠皮質(zhì)老年斑的影響。（A）雌性各組小鼠皮質(zhì)硫黃素-S染色圖片（標尺=500μm）；（B）雄性各組小鼠皮質(zhì)硫黃素-S染色圖片（標尺=500μm）（C）雌性小鼠硫黃素-S染色數(shù)量統(tǒng)計圖；（D）雄性小鼠硫黃素-S染色數(shù)量統(tǒng)計圖。（x±SEM，n=3），與正常對照組比較，*P<0.05；與APP/PS1組相比較，#P<0.05。Fig.3EffectsofDNLAonsenileplaquesformationinthecortexofmice.ThecoronalfrozensectionsofbrainswerestainedwiththioflavineS.(A)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinfemale(scalebar=500μm);(B)ImagesofthioflavineS-stainedsenileplaquesinthecortexofAPP/PS1miceinmale(scalebar=500μm);(C)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinfemale;(D)StatisticsofthioflavineS-stainedamyloidplaquesnumberinthecortexofAPP/PS1miceinmale.(x±SEM,n=3);*P<0.05vsWT+Vehicle;#P<0.05vsAPP/PS1.2.3DNLA對APP/PS1模式小鼠ADAM10、APP、Aβ1-42蛋白的影響Aβ是腦內(nèi)的正常產(chǎn)物，生理量的Aβ具有抑制神經(jīng)元過度活化的作用，是保證神經(jīng)元正常和持續(xù)性功能所必需的。APP基因的突變會引起腦內(nèi)Aβ異常聚集，Aβ異常聚集形成的老年斑是AD主要的病理特征之一。我們采用Westernblot方法檢測了雌、雄性小鼠皮質(zhì)中ADAM10、APP及Aβ1-42蛋白。如圖4顯示：APP/PS1組較WT組雌、雄性小鼠中ADAM10蛋白水平表達明顯降低（P<0.05），APP及Aβ1-42蛋白水平表達明顯升高（P<0.05）。給予DNLA后升高了ADAM10蛋白水平表達（P<0.05），降低了APP、Aβ1-42蛋白水平表達（P<0.05）。結(jié)果提示DNLA可上調(diào)小鼠皮質(zhì)中ADAM10蛋白水平表達，并可以抑

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]淫羊藿苷通過改善腦糖代謝功能紊亂對APP/PS1/Tau三轉(zhuǎn)基因AD模式小鼠的神經(jīng)保護作用[D]. 張瑩.遵義醫(yī)科大學 2019
[2]金釵石斛總生物堿對SAMP8小鼠腦衰老的保護作用及機制研究[D]. 呂凌麗.遵義醫(yī)學院 2018
[3]金釵石斛總生物堿對APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠學習記憶影響及其相關(guān)因素研究[D]. 楊小惠.遵義醫(yī)學院 2017
[4]金釵石斛總生物堿對阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因模型Tg2576小鼠的影響[D]. 姚寅.遵義醫(yī)學院 2013



本文編號：3069486