目的通過(guò)建立血管緊張素II（Angiotensin II,Ang II）誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）氧化應(yīng)激模型,采用丹酚酸B（Salvianolic acid B,SalB）干預(yù)觀察治療效果,分析其抑制該氧化應(yīng)激反應(yīng)的過(guò)程,并探討SalB的藥理機(jī)制。方法1.采用MTT法篩選對(duì)HUVEC無(wú)毒性的SalB藥物干預(yù)濃度;后采用Ang II干預(yù)HUVEC建立氧化應(yīng)激反應(yīng)模型,用相對(duì)應(yīng)的熒光探針檢測(cè)活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）和細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化,TAB法檢測(cè)丙二醛（MDA）含量;2.Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-p38、p38、PI3K、p-AKT、AKT、p-NRF2、NRF2、NOX2、HO-1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果1.MTT檢測(cè)顯示,25μM、50μM、100μM的SalB干預(yù)HUVEC對(duì)細(xì)胞活力影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,表明所采用濃度對(duì)HUVEC無(wú)毒性。與Control組比較,HUVEC經(jīng)1μM Ang II誘導(dǎo)后,細(xì)胞內(nèi)ROS水平和MDA... 

【文章來(lái)源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
引言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        1.2 藥物與制備
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
        1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.5 實(shí)驗(yàn)使用試劑的配制方法
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 HUVEC傳代和換液
        2.2 HUVEC凍存
        2.3 HUVEC復(fù)蘇
        2.4 HUVEC實(shí)驗(yàn)分組
        2.5 HUVEC計(jì)數(shù)和接板
        2.6 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.7 活性氧（ROS）測(cè)定方法
        2.8 一氧化氮（NO）測(cè)定方法
        2.9 丙二醛（MDA）含量測(cè)定方法
        2.10 激光共聚焦實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子的變化
        2.11 蛋白免疫印跡法（Western Blot）
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC氧化應(yīng)激的作用
        1.1 丹酚酸B對(duì) HUVEC活力的影響
        1.2 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC內(nèi) ROS表達(dá)情況的影響
        1.3 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC上清液中MDA含量的影響
        1.4 丹酚酸對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC內(nèi) NOX2 蛋白活化的影響
        1.5 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC內(nèi) NO表達(dá)情況的影響
    2 丹酚酸B調(diào)控Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC相關(guān)信號(hào)通路活化
        2.1 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC鈣離子濃度變化的影響
        2.2 丹酚酸B對(duì) Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC的PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白活化的影響
        2.3 丹酚酸對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC的MAPK信號(hào)通路活化的影響
        2.4 丹酚酸對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的HUVEC的NRF2/ HO-1 信號(hào)通路活化的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3011440