目的:通過制作新生大鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxic ischemic brain damage,HIBD）模型,觀察銀杏葉提取物注射液（Ginkgo biloba extract,EGB）治療HIBD過程中磷酸化Tau（phosphorylated Tau protein,p-Tau）蛋白表達(dá)情況,為EGB應(yīng)用于新生兒缺氧缺血性腦病（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE）的臨床治療提供新的理論依據(jù)。方法:將60只新生7日齡清潔級SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組20只、NS治療組（NS組）20只和EGB治療組（EGB組）20只,按治療時(shí)間點(diǎn)分為6h、12h、24h、48h、72h分為5個(gè)亞組,每個(gè)亞組各4只動(dòng)物。分組及術(shù)后均與母鼠同籠正常生活。假手術(shù)組切開頸部皮膚,分離右側(cè)頸總動(dòng)脈,不結(jié)扎。NS治療組以及EGB治療組均參照Rice法建立HIBD動(dòng)物模型,觀察造模前后新生大鼠的行為學(xué)改變,EGB組每日腹腔注射一次EGB0.01g/g,NS組每日腹腔注射一次生理鹽水0.01g/g。在各時(shí)間點(diǎn)斷頭取腦組織。分別對腦組織采用HE染色方法觀察腦神經(jīng)細(xì)胞病理損傷;采用免... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1兩組小鼠術(shù)后6小時(shí)腦組織病理改變（Z6

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文李羚瑋172結(jié)果2.1行為學(xué)觀察在實(shí)驗(yàn)前各組新生大鼠行為能力均屬于正常狀態(tài)。缺血術(shù)后新生鼠一般情況良好，活動(dòng)自由，休息半小時(shí)后進(jìn)行缺氧實(shí)驗(yàn)時(shí)則情況不同。新生大鼠在缺氧后，迅速出現(xiàn)呼吸變淺加快、煩躁不安癥狀，缺氧1小時(shí)左右后，逐漸出現(xiàn)減少活動(dòng)、頭顫、四肢抖動(dòng)、無法站立甚至抽搐等癥狀。2小時(shí)缺氧過程中均無新生大鼠死亡。HIBD術(shù)后新生大鼠可以緩慢爬行但不靈活，表現(xiàn)為點(diǎn)頭顫動(dòng)、不能翻身、四肢顫抖、懶于活動(dòng)等。在HIBD后48h上述基本完全消失。假手術(shù)組上述行為均無異常。2.2HE染色觀察各組新生鼠腦組織病理改變假手術(shù)組中腦組織神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，細(xì)胞排列規(guī)則有序，神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量豐富，可見致密組織結(jié)構(gòu)；未見明顯病理損傷改變，腦組織整體基本結(jié)構(gòu)正常。從所選5個(gè)時(shí)間點(diǎn)來看每個(gè)時(shí)間點(diǎn)無論是NS組或EGB組腦組織均出現(xiàn)不同程度的損傷情況：新生鼠腦組織可見腦細(xì)胞有不同程度的腫脹，細(xì)胞核排列紊亂，部分視野可見核固縮。NS組中6h組細(xì)胞核排列有少許紊亂，隨著時(shí)間的增長，細(xì)胞出現(xiàn)腫脹，12h組可見腦神經(jīng)細(xì)胞壞死，組織結(jié)構(gòu)疏松，可見較多空泡化結(jié)構(gòu)伴有小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤；該視野僅可見少量細(xì)胞神經(jīng)元，且神經(jīng)元固縮；腦血管充血，血管周圍伴炎癥細(xì)胞浸潤，72h組較12h組細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞腫脹程度減弱。EGB組中6h組細(xì)胞核排列有少許紊亂，12h組可見少量神經(jīng)元固縮，局部區(qū)域細(xì)胞數(shù)量稀少，組織結(jié)構(gòu)疏松，72h組較12h組細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞腫脹程度減弱，且可見小膠質(zhì)細(xì)胞。EGB組整體細(xì)胞排列較NS組整齊，細(xì)胞腫脹及核固縮程度較輕。（詳見圖1-5）圖1兩組小鼠術(shù)后6小時(shí)腦組織病理改變（HE×400）Z6.假手術(shù)組N6.NS組G6.EGB組Z6N6G6

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文李羚瑋18圖2兩組小鼠術(shù)后12小時(shí)腦組織病理改變（HE×400）Z12.假手術(shù)組N12.NS組G12.EGB組圖3兩組小鼠術(shù)后24小時(shí)腦組織病理改變（HE×400）Z24.假手術(shù)組N24.NS組G24.EGB組圖4兩組小鼠術(shù)后48小時(shí)腦組織病理改變（HE×400）Z48.假手術(shù)組N48.NS組G48.EGB組圖5兩組小鼠術(shù)后72小時(shí)腦組織病理改變（HE×400）Z72.假手術(shù)組N72.NS組G72.EGB組2.3免疫組化方法檢測新生鼠腦組織中p-Tau蛋白的陽性表達(dá)p-Tau蛋白在光學(xué)顯微鏡下，其陽性表達(dá)為染色均呈棕黃色或深棕色的顆粒沉積。采用免疫組化陽性細(xì)胞百分比分析方法，使用Image-ProPlus6.0軟件分析結(jié)果為：假手術(shù)組、NS組以及EGB組中p-Tau蛋白陽性細(xì)胞數(shù)動(dòng)態(tài)變化相似：6h組p-Tau蛋白陽性細(xì)胞數(shù)開始升高，12h組陽性細(xì)胞數(shù)最多，隨著時(shí)間的推移，陽性細(xì)胞數(shù)逐漸下Z12N12G12Z24N24G24Z48G48N48Z72N72G72

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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