[目的]探討膳食色氨酸對魚藤酮誘導(dǎo)帕金森（PD）大鼠運動癥狀的改善作用,并揭示其通過腸道菌群代謝從而激活A(yù)hR通路減輕神經(jīng)炎癥的抗PD作用機制。[方法]1.魚藤酮（2mg/kg/d）皮下注射28天,建立PD大鼠模型。然后隨機分為對照組（正常大鼠）,PD組,PD+色氨酸缺乏組（飼料中不含色氨酸）和PD+色氨酸組（飼料中含色氨酸）,應(yīng)用曠場實驗檢測PD大鼠運動功能,Westernblot檢測大鼠黑質(zhì)區(qū)NF-kβ核移位,ELISA檢測血清中促炎細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,觀察色氨酸的抗PD作用。2.在膳食色氨酸飲食的PD大鼠中,分別進行氨芐西林（6mg/20g/d）灌胃1周和萬古霉素（3mg/20g/d）灌胃1周進行處理,應(yīng)用曠場實驗檢測PD大鼠運動功能,Westernblot檢測大鼠黑質(zhì)區(qū)NF-kβ核移位,ELISA檢測血清中促炎細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平,觀察色氨酸的抗PD作用是否與腸道菌群相關(guān)。3.在膳食色氨酸組PD大鼠應(yīng)用芳香烴受體抑制劑CH223191處理,Western blotting檢測大鼠黑質(zhì)區(qū)AhR靶基因CYP1B1表達、NF-kβ核移... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

膳食色氨酸改善魚藤酮誘導(dǎo)的PD大鼠運動功能

第3章實驗結(jié)果3.1膳食色氨酸具有抗PD作用3.1.1建立PD大鼠模型為了建立PD大鼠模型，我們使用單次魚藤酮皮下注射的方式，建立大鼠PD模型。大鼠每天被注射魚藤酮溶液（2.0mg/kg/d），持續(xù)28天，誘導(dǎo)PD模型。我們進行礦場實驗評估大鼠運動能力，將平均速度作為評估大鼠運動能力的指標(biāo)，如圖1所示，與正常組大鼠相比，PD大鼠運動能力明顯減慢，說明PD大鼠模型的建立是成功的。圖1魚藤酮處理后大鼠運動能力減低注：Control：對照組，Rot：魚藤酮；*P<0.05,ControlVSRot3.1.2膳食色氨酸可改善PD模型大鼠運動功能為了研究膳食色氨酸是否具有抗帕金森病作用，我們進行曠場實驗評估大鼠運動能力，結(jié)果顯示色氨酸缺乏組，小鼠運動能力明顯減慢，而色氨酸飲食組小鼠運動能力明顯好于色氨酸缺乏組（圖2）。圖2膳食色氨酸改善魚藤酮誘導(dǎo)的PD大鼠運動功能注：Rot魚藤酮；Trpempty:色氨酸缺乏；Trpfeeding:色氨酸飲食；***P<0.001,Trpfeeding+RotVSTrpempty+Rot13

3.1.3膳食色氨酸降低PD大鼠NF-kβ核轉(zhuǎn)位神經(jīng)炎癥是PD重要發(fā)病機制之一，有研究表明色氨酸可調(diào)節(jié)中樞脫髓鞘疾病的神經(jīng)炎癥，其是否可抑制PD神經(jīng)炎癥呢？NF-kB是調(diào)控神經(jīng)細胞炎癥反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子，NF-kB轉(zhuǎn)位入核后，其P65蛋白亞基作為轉(zhuǎn)錄因子可以直接調(diào)節(jié)多種炎癥因子的表達。本實驗分別提取黑質(zhì)中的核蛋白和總蛋白，Westernblot檢測發(fā)現(xiàn)，在色氨酸缺乏組PD大鼠黑質(zhì)中，NF-kB核蛋白含量升高，提示核轉(zhuǎn)位增加，而在色氨酸組PD大鼠黑質(zhì)中，NF-kB核蛋白含量較色氨酸缺乏組大鼠低，提示核移位減少。（圖3）圖3膳食色氨酸可降低PD大鼠NF-kβ核轉(zhuǎn)位注：Control:正常大鼠組；Rot:魚藤酮;Trpempty:色氨酸缺乏；Trpfeeding:色氨酸飲食。*P<0.05，Trpempty+RotvsControl3.1.4膳食色氨酸降低PD大鼠血清中促炎細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平為了進一步研究色氨酸對血清中炎性因子的影響，我們通過應(yīng)用ELISA法檢測血清各組促炎細胞因子IL-1β,IL-6與TNF-α的水平，發(fā)現(xiàn)色氨酸缺乏組PD大鼠血清中IL-1β,IL-6與TNF-α較正常組均顯著上調(diào)，而色氨酸飲食組PD大鼠血清中IL-1β,IL-6與TNF-α水平顯著低于色氨酸缺乏組（圖4）。14


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