目的探尋CD137-CD137L受體-配體互相作用是否通過TRAF6/JNK/AP-1信號(hào)通路影響小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）活化T細(xì)胞核因子c（NFATc1）的表達(dá)。方法組織貼塊法原代培育小鼠VSMC,取第4代細(xì)胞用于試驗(yàn)。VSMC分為6組:對(duì)照組、CD137激動(dòng)組、CD137拮抗組、siTRAF6干預(yù)組、siJNK干預(yù)組及siAP-1干預(yù)組。各組TRAF6、磷酸化JNK（p-JNK）、磷酸化AP-1（p-AP-1）及NFATc1蛋白表達(dá)程度用Western blot檢測(cè)。各組細(xì)胞TRAF6、p-JNK、p-AP-1及NFATc1的分布情況用免疫熒光法檢測(cè)。TRAF6、JNK、AP-1采用小干擾RNA技術(shù)沉默表達(dá)。TRAF6、JNK、AP-1及NFATc1 mRNA水平的表達(dá)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR來測(cè)定;細(xì)胞凋亡和增殖情況采用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry,FCM）和CCK-8實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)。結(jié)果（1）CCK-8檢測(cè)顯示:CD137-CD137L信號(hào)激活后,血管平滑肌細(xì)胞可以發(fā)生明顯的增殖。（2）與對(duì)照組比較,CD137激動(dòng)組（CD137-CD137L信號(hào)激活）TRAF... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
常用縮略詞對(duì)照表
第一章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 TRAF6 及 JNK 在心血管疾病中的作用
        1.2.1 TRAF6的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性
        1.2.2 JNK的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性
        1.2.3 TRAF6/JNK 信號(hào)在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用
        1.2.4 展望
    1.3. NFATc1在心血管疾病中的作用
        1.3.1 TRAF6的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性
        1.3.2 NFATc1與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
        1.3.3 NFATc1與動(dòng)脈血管鈣化的關(guān)系
        1.3.4 NFATc1與血管平滑肌細(xì)胞的關(guān)系
        1.3.5 展望
    1.4 研究目的、內(nèi)容與意義
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容
        1.4.3 研究意義
第二章 CD137信號(hào)通過激活TRAF6/JNK/AP-1 通路影響小鼠VSMC活化T細(xì)胞核因子c1的表達(dá)
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑及耗材
        2.1.3 主要溶液及成份
        2.1.4 手術(shù)器械
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 方法
        2.2.1 VSMC分離、培養(yǎng)及鑒定
        2.2.2 血管平滑肌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)
        2.2.3 RT-qPCR分析
        2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
        2.2.5 細(xì)胞蛋白的提取及Western blot法檢測(cè)
        2.2.6 CCK-8 的檢測(cè)
        2.2.7 免疫熒光法檢測(cè)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
第三章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 CD137-CD137L相互作用調(diào)控NFATc1啟動(dòng)血管鈣化的機(jī)制研究
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CD137信號(hào)通過核因子κB影響小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞活化T細(xì)胞核因子c1表達(dá)[J]. 殷云杰,嚴(yán)金川,王中群,劉培晶,梁儀.  中華心血管病雜志. 2015 (07)
[2]干預(yù)CD137-CD137配體軸對(duì)載脂蛋白E基因敲除小鼠活化T細(xì)胞核因子c1表達(dá)的影響[J]. 楊海兵,嚴(yán)金川,蘇紅玲,袁偉,徐良潔.  中華心血管病雜志. 2012 (09)
[3]活化T細(xì)胞核因子與急性冠脈綜合征的相關(guān)性研究[J]. 徐安妨,楊麗霞,齊峰,郭傳明,王先梅,郭瑞威.  嶺南心血管病雜志. 2010(05)
[4]我國心血管病及其主要危險(xiǎn)因素的流行病學(xué)研究[J]. 王薇,趙冬.  首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(02)
[5]鋅指蛋白A20及其對(duì)炎癥反應(yīng)的調(diào)控[J]. 吳麗娟,康格非.  生命的化學(xué). 2004(03)



本文編號(hào)：2962892