目的:探討Grb10/IGF-1R信號通路在跑臺運動干預下緩解STZ誘導的糖尿病腦病大鼠認知功能中的作用機制。方法:實驗動物分組及造模:采用體重為160±20 g的2月齡雄性SD大鼠30只,適應性喂養(yǎng)1周后,按體重隨機分為10只對照組（NC）和20只糖尿病模型組（DM）。DM組采用4周的高脂飼料喂養(yǎng)聯(lián)合STZ注射方法造模,每只大鼠稱重后按25 mg/kg的劑量腹腔注射STZ,NC組大鼠稱重后腹腔注射相應劑量的檸檬酸緩沖液。造模成功的大鼠可以隨機分為糖尿病組（DM組）和糖尿病運動干預組（DM+Exe）各10只。DM+Exe組大鼠每天晚上8點以12 m/min的速度在無坡度的跑臺上運動40 min,每周運動5次,連續(xù)運動8周。運動干預結束后休息一天即進行為期6天的Morris水迷宮測試實驗,以觀察大鼠的行為學表現(xiàn)。實驗結束后,麻醉的狀態(tài)下處死大鼠,在冰塊上迅速剝離腦、海馬及皮層組織,立即將海馬與皮層組織放入液氮中保存,將全腦固定于4%多聚甲醛溶液中12-24 h。尼氏染色觀察大鼠海馬各區(qū)神經元形態(tài)變化;Western blot檢測大鼠海馬和皮層內AD樣病理蛋白、突觸可塑性相關蛋白、Grb1... 

【文章來源】：武漢體育學院湖北省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

成功建立糖尿病大鼠模型

碩士學位論文MASTER"STHESIS184.2跑臺運動減輕糖尿病腦病大鼠的認知功能障礙認知功能障礙是糖尿病腦病的一個重要的臨床表現(xiàn)。MWM的創(chuàng)建目的是為了檢測海馬區(qū)的學習和記憶功能，所以我們采用MWM法檢測STZ誘導的糖尿病性腦病大鼠的空間學習記憶能力。1-5天的結果表明：與NC組比，DM組大鼠的尋找平臺的逃避潛伏期明顯延長，第6天越過平臺位置的次數(shù)也明顯少于NC組。并且DM組大鼠第6天的行為學軌跡明顯比NC組大鼠更紊亂，更難找到目標平臺。說明糖尿病大鼠出現(xiàn)學習和記憶功能損傷，表現(xiàn)出糖尿病腦病癥狀。然而，正如我們所預料的，在8周的跑臺運動訓練后，DM+Exe組顯著縮短了DM大鼠的逃避潛伏期，增加了DM大鼠越過平臺的次數(shù)，行為學軌跡也較DM組簡單，較容易發(fā)現(xiàn)目標平臺。因此，我們的實驗結果得出，跑臺運動能減輕STZ誘導的糖尿病性腦病大鼠的認知功能障礙（圖4-2A、4-2B）。圖4-2跑臺運動減輕糖尿病腦病大鼠的認知功能障礙注：MWM法評價NC組、DM組、DM+EXe組大鼠學習記憶能力的變化(n=10/組)。A.1-5天MWM訓練大鼠平臺潛伏期。B.在第6天大鼠穿越目標平臺的次數(shù)。C.第6天大鼠游泳軌跡圖。

4.實驗結果194.3跑臺運動減輕糖尿病腦病大鼠海馬神經元的損傷為了更好的研究STZ誘導的糖尿病性腦病大鼠海馬神經元的損傷情況，我們采用尼氏染色法觀察海馬組織的超微結構，檢測其組織及神經元形態(tài)改變。尼氏體是神經元特征性結構，通過觀察尼氏體的形態(tài)和數(shù)量，有助于我們判斷神經元是否損傷。尼氏染色顯示：NC組大鼠的海馬組織CA1、CA3、DG區(qū)尼氏體較大而且多、神經元胞體和突起輪廓清晰、結構正常呈虎斑樣；但DM組大鼠的海馬區(qū)尼氏體較小且分散、數(shù)量較少、尼氏體模糊。表明STZ誘導的糖尿病腦病大鼠海馬神經元出現(xiàn)損傷。8周的跑臺運動干預，尼氏染色看到海馬尼氏體變大、形態(tài)表現(xiàn)正常、尼氏體數(shù)目明顯增多，提示跑臺運動可有效減輕STZ誘導的糖尿病腦病大鼠海馬區(qū)神經元的損傷。圖4-3跑臺運動減輕糖尿病腦病大鼠海馬神經元的損傷注：尼氏染色結果顯示大鼠海馬CA1、CA3、DG區(qū)超微組織結構的病理改變，原始圖片的放大倍數(shù)是×200，比例尺為100μm。圖中黑色箭頭代表尼氏體模糊且排列松弛部位。


本文編號：2937092