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沉默ATF5對鼻咽癌細胞凋亡及周期的影響

發(fā)布時間:2020-12-11 00:05
  目的:比較轉(zhuǎn)錄激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)沉默前后鼻咽癌CNE-2Z細胞凋亡及細胞周期進程的變化,探討ATF5沉默對鼻咽癌細胞凋亡及細胞周期影響的可能機制,為提高鼻咽癌治療效果提供新思路。方法:1)以鼻咽癌CNE-2Z細胞為研究對象,運用sh RNA-ATF5慢病毒載體感染CNE-2Z細胞(sh RNA-ATF5組),以慢病毒空載體感染CNE-2Z細胞(LV-sh RNANC)作為陰性對照組(NC組),未感染慢病毒CNE-2Z細胞作空白對照組(Control組)。2)利用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測CNE-2Z細胞慢病毒干擾效率。3)采用流式細胞儀(Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS)Annexin VAPC單染法及Tunel免疫熒光檢測ATF5沉默前后CNE-2Z細胞凋亡率的變化,運用碘化丙啶(Propidumiodid... 

【文章來源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

沉默ATF5對鼻咽癌細胞凋亡及周期的影響


CNE-2Z細胞感染慢病毒的熒光表達情況

慢病毒,細胞,干擾效率,醫(yī)科大


遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月17圖2慢病毒感染CNE-2Z細胞后ATF5mRNA表達水平變化Fig.2ExpressionofATF5mRNAinCNE-2Zcellswithlentivirus注:A.擴增曲線;B.溶解曲線;C.各組ATF5mRNA的表達水平比較;Control:空白對照組;NC:空載病毒的陰性對照組;shRNA-ATF5:ATF5沉默組;shRNA-ATF5groupvsControlandNC**P<0.014.1.3shRNA-ATF5在CNE-2Z細胞ATF5蛋白水平的干擾效率Westernblot檢測結(jié)果顯示,shRNA-ATF5組較Control組和NC組,ATF5蛋白表達水平明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001,P=0.002,圖3),兩對照組間無明顯差異(P>0.05,圖3)。

干擾效率,慢病毒,細胞,蛋白


遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月18圖3慢病毒感染CNE-2Z細胞后ATF5蛋白水平的干擾效率Fig.3ExpressionofATF5proteininCNE-2Zcellswithlentivirus注:Control:空白對照組;NC:空載病毒的陰性對照組;shATF5:ATF5沉默組;shATF5groupvsControlandNC**P<0.014.2ATF5沉默對CNE-2Z細胞凋亡的影響4.2.1流式細胞儀檢測CNE-2Z細胞凋亡率AnnexinV-APC單染法檢測CNE-2Z細胞凋亡水平顯示,shRNA-ATF5組較Control組、NC組CNE-2Z細胞的凋亡率均明顯增高(P=0.000,表11、圖4),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義,兩對照組間無明顯差異(P,表11、圖4)。表11ATF5沉默對CNE-2Z細胞凋亡率的影響Tab.11EffectonapoptosisofCNE-2ZcellsafterATF5silencing組別凋亡率()Control3.610.10***NC3.800.18***shATF56.260.15注:shATF5groupvsControlandNC***P<0.001

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Bufalin suppresses the migration and invasion of prostate cancer cells through HOTAIR,the sponge of miR-520b[J]. Jian-jun Zhang,Xiao-hui Zhou,Yan Zhou,Yong-gang Wang,Bin-zhi Qian,Ai-na He,Zan Shen,Hai-yan Hu,Yang Yao.  Acta Pharmacologica Sinica. 2019(09)
[2]RNA干擾ATF5基因下調(diào)NF-κB信號誘導(dǎo)腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡[J]. 馬進海,馬淑娟,汪濤,張王成.  中國病理生理雜志. 2019(08)
[3]Brucea javanica oil emulsion improves the effect of radiotherapy on esophageal cancer cells by inhibiting cyclin D1-CDK4/6 axis[J]. Zhong-Hua Qiu,Wei-Wei Zhang,Hong-Hua Zhang,Gui-Hua Jiao.  World Journal of Gastroenterology. 2019(20)
[4]ATF5基因siRNA對肺癌細胞凋亡及化療增敏的機制[J]. 汪銳,陳麗安,龍國賢.  中國老年學(xué)雜志. 2019(10)
[5]ATF5在鼻咽癌組織中的表達及臨床意義[J]. 馮光勇,張瑩瑩,張貴海.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2018(02)
[6]鼻咽癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移診斷專家共識[J]. 李金高,陳曉鐘,林少俊,胡超蘇.  中華放射腫瘤學(xué)雜志. 2018 (01)
[7]莪術(shù)醇對鼻咽癌細胞CEN-2增殖與凋亡的影響[J]. 王娟,陳旭,曾建紅.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(07)
[8]鼻咽癌相關(guān)基因NAG7對鼻咽癌細胞周期及凋亡的影響(英文)[J]. 譚琛,彭聰,黃宇琛,張秋紅,唐珂,李小玲,李桂源.  癌癥. 2002(05)

碩士論文
[1]沉默ATF5對卵巢癌細胞skov-3裸鼠成瘤的研究[D]. 谷雪.青島大學(xué) 2014
[2]沉默ATF5對卵巢癌細胞增殖、凋亡及化療敏感性的影響[D]. 齊亞妮.青島大學(xué) 2012



本文編號:2909529

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