發(fā)布時間：2020-11-21 15:43

　　 目的:通過探討耐力運(yùn)動對老年小鼠心肌組織T-鈣粘蛋白及其配體脂聯(lián)素和下游相關(guān)蛋白分子表達(dá)的影響,闡明耐力運(yùn)動對老齡心肌保護(hù)作用的機(jī)制及探討T-鈣粘蛋白在其中的價值。方法:本實驗分為兩部分,第一部分探討耐力運(yùn)動對老年小鼠心肌組織T-鈣粘蛋白表達(dá)及脂聯(lián)素/T-鈣粘蛋白/AMPK級聯(lián)的影響。將30只17月齡C57雄性老年小鼠隨機(jī)分為老年運(yùn)動組及老年對照組,每組各15只。老年運(yùn)動組進(jìn)行12周耐力運(yùn)動,老年對照組采取常規(guī)飼養(yǎng),無運(yùn)動干預(yù),另取15只2月齡C57雄性小鼠納入為青年對照組,常規(guī)飼養(yǎng),無運(yùn)動干預(yù)。采用免疫組化法觀測老年運(yùn)動組,老年對照組及青年對照組小鼠心肌組織T-鈣粘蛋白及其配體脂聯(lián)素的分布和陽性表達(dá),采用免疫印跡檢測心肌組織T-鈣粘蛋白、脂聯(lián)素的蛋白表達(dá)及AMPK磷酸化水平。第二部分探討耐力運(yùn)動對老年小鼠心肌的保護(hù)作用。采用免疫印跡檢測三組小鼠心肌組織促凋亡蛋白分子Bax、Caspase-9,抑凋亡蛋白分子Bcl-2的表達(dá);采用免疫組化觀測各組心肌組織抑自噬蛋白p-mTOR的細(xì)胞定位和陽性表達(dá),免疫印跡檢測促自噬蛋白Beclin-1的表達(dá),抑自噬蛋白mTOR的活化水平;免疫印跡檢測各組心肌組織纖維化相關(guān)蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表達(dá),天狼猩紅染色觀察各組心肌纖維化程度。結(jié)果:T-鈣粘蛋白定位于心肌細(xì)胞胞膜及血管內(nèi)皮,脂聯(lián)素定位于心肌細(xì)胞胞膜、胞漿及血管內(nèi)皮;免疫組化及免疫印跡結(jié)果均顯示,老年對照組與青年對照組相比,心肌組織T-鈣粘蛋白、其配體脂聯(lián)素的表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05),免疫印跡結(jié)果示AMPK活化水平顯著下調(diào)(P0.05);而經(jīng)12周耐力運(yùn)動訓(xùn)練后,老年運(yùn)動組與老年對照組相比,T-鈣粘蛋白、脂聯(lián)素的表達(dá),AMPK活化水平顯著升高(P0.05)。與青年對照組相比,老年對照組的小鼠心肌組織抑凋亡蛋白bcl-2表達(dá)顯著下調(diào),促凋亡蛋白bax、Caspase-9表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05);老年運(yùn)動組與老年對照組相比,心肌組織抑凋亡蛋白bcl-2表達(dá)顯著上調(diào),促凋亡蛋白bax、Caspase-9表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05)。老年對照組與青年對照組小鼠相比,心肌組織抑自噬蛋白mTOR活化水平顯著上調(diào),促自噬蛋白Beclin-1表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05);老年運(yùn)動組與老年對照組相比,心肌組織抑自噬蛋白mTOR活化水平顯著下調(diào),促自噬蛋白beclin-1表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05)。老年對照組與青年對照組相比,纖維化相關(guān)信號蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05),心肌纖維化程度加重,而經(jīng)過12周耐力運(yùn)動后,老年運(yùn)動組與老年對照組小鼠相比,心肌組織纖維化相關(guān)信號蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05),纖維化程度減輕。結(jié)論:耐力運(yùn)動可增強(qiáng)老年小鼠心肌T-鈣粘蛋白表達(dá),促進(jìn)其配體脂聯(lián)素與心肌組織結(jié)合,刺激AMPK活化,影響下游凋亡、自噬、纖維化相關(guān)信號蛋白的表達(dá)從而實現(xiàn)對老齡心肌的保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：R493
【部分圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文20圖1各組心肌組織T-鈣粘蛋白免疫組化染色及平均光密度分析Fig.1ImmunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofT-cadherininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年對照組，OC=老年對照組，OE=老年運(yùn)動組；aP<0.05，與老年對照組相比）青年對照組、老年對照組及進(jìn)行耐力運(yùn)動的老年運(yùn)動組小鼠心肌組織T-鈣粘蛋白的免疫印跡檢測結(jié)果如下圖2所示。與青年對照組相比，老年對照組小鼠心肌組織T-鈣粘蛋白表達(dá)水平顯著降低(P＜0.01)；而經(jīng)12周耐力運(yùn)動后，老年運(yùn)動組與老年對照組相比，T-鈣粘蛋白表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）。圖2免疫印跡檢測各組心肌組織T-鈣粘蛋白表達(dá)Fig.2DetectionofT-cadherinexpressioninmyocardiumofeachgroupbyWesternblot（注：YC=青年對照組，OC=老年對照組，OE=老年運(yùn)動組；aP<0.05，bP<0.01與老年對照組相比）2.1.2各組心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)變化各組小鼠心肌組織脂聯(lián)素免疫組化染色如圖3所示，高倍鏡下可觀察到脂聯(lián)素分布在小鼠心肌細(xì)胞胞膜、胞漿及血管內(nèi)皮，對其陽性表達(dá)進(jìn)行半定量分析,與T-鈣粘蛋白變化趨勢相一致。與青年對照組相比，老年對照組心肌組織脂聯(lián)素蛋白陽性表達(dá)顯著下調(diào)(P＜0.05)；而經(jīng)過耐力運(yùn)動后老年運(yùn)動組與老年對照組相比，脂聯(lián)素陽性表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.05)；詳見圖3。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文21圖3各組心肌組織脂聯(lián)素免疫組化染色及平均光密度分析Fig.3Immunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofadiponectininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年對照組，OC=老年對照組，OE=老年運(yùn)動組；aP<0.05與老年對照組相比）下圖4所示為各組心肌組織脂聯(lián)素免疫印跡檢測結(jié)果。與青年對照組相比，老年對照組小鼠心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與老年對照組相比，老年運(yùn)動組小鼠經(jīng)12周耐力運(yùn)動后小鼠心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)（P＜0.05）。圖4免疫印跡檢測各組心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文21圖3各組心肌組織脂聯(lián)素免疫組化染色及平均光密度分析Fig.3Immunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofadiponectininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年對照組，OC=老年對照組，OE=老年運(yùn)動組；aP<0.05與老年對照組相比）下圖4所示為各組心肌組織脂聯(lián)素免疫印跡檢測結(jié)果。與青年對照組相比，老年對照組小鼠心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與老年對照組相比，老年運(yùn)動組小鼠經(jīng)12周耐力運(yùn)動后小鼠心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)（P＜0.05）。圖4免疫印跡檢測各組心肌組織脂聯(lián)素蛋白表達(dá)
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 潘月順;仇琪;;不同負(fù)荷運(yùn)動對慢性心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[J];中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志;2013年12期

本文編號：2893233