目的:通過構(gòu)建2型糖尿病(Type 2 diabetes Mellitus,T2DM)大鼠動物模型,觀察利拉魯肽干預(yù)后其血生化指標(如血脂、血糖、胰島素等)的改變、腎周脂肪細胞胰島素誘導(dǎo)基因(Insulin induced gen,INSIG)的表達情況,以明確利拉魯肽對2型糖尿病大鼠體內(nèi)糖脂代謝的影響,為糖尿病合并脂代謝紊亂病人的治療提供依據(jù);同時通過研究利拉魯肽干預(yù),對2型糖尿病大鼠內(nèi)臟脂肪組織胰島素誘導(dǎo)基因表達的影響,為2型糖尿病伴肥胖癥病人的治療提供可能的新靶點。方法:將30只體重200-250g的8周齡雄性SD大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,進而隨機分配,將其分成正常對照組(NC組)以及模型組(DM組)。正常對照組用普通飼料喂養(yǎng),模型組用高糖高脂飼料喂養(yǎng),喂養(yǎng)4周,然后腹腔注射1%鏈脲佐菌素(35mg/kg)以制備T2DM大鼠模型,NC組注射等量生理鹽水。注藥后連續(xù)監(jiān)測3天血糖,若隨機血糖大于16.7mmol/L和(或)空腹血糖大于11.1mmol/L則判定為T2DM大鼠造模成功。造模成功后,把T2DM大鼠進一步分成低劑量利拉魯肽組(LL組,100ug/(Kg·d))、高劑量利拉魯肽組(HL組,200ug/(Kg·d))和糖尿病組(DM組),四組大鼠內(nèi)眥靜脈采血化驗空腹血糖、空腹胰島素、血脂譜等指標,計算胰島素抵抗指數(shù),之后開始藥物干預(yù),連續(xù)給藥8周,期間每兩周監(jiān)測并記錄大鼠空腹血糖及體重,觀察一般情況。8周后,各組大鼠心臟取血,再次測定上述指標,并計算胰島素抵抗指數(shù),取腎周脂肪組織,稱重,提取組織蛋白后,通過Western Blot檢測insig-1表達情況,最后分析數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.各組大鼠的一般情況及體重變化NC組大鼠毛發(fā)亮澤無脫落,動作敏捷,夜間活動多,精神狀態(tài)好,墊料相對干燥,相比之下,DM組大鼠毛發(fā)暗淡濕膩易脫落,反應(yīng)變慢,夜間活動少,精神欠佳,大鼠進食量、飲水量均明顯增加,墊料潮濕,需頻繁更換,每日清理。利拉魯肽干預(yù)后,大鼠的毛色、精神狀態(tài)、反應(yīng)速度均好轉(zhuǎn),多尿、多飲、多食癥狀減輕,且HL組改善更明顯。此外,DM組大鼠體重較NC組明顯增加,而利拉魯肽干預(yù)后大鼠體重有所下降,且HL組較LL組大鼠體重下降明顯(p0.05)。2.各組大鼠血糖、胰島素及胰島素抵抗指數(shù)改變對比NC組大鼠,DM組大鼠空腹血糖、空腹胰島素水平以及胰島素抵抗指數(shù)均明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);對比DM組,可發(fā)現(xiàn)藥物干預(yù)組大鼠上述指標均有下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);進一步對比不同給藥劑量組,可見HL組較LL組大鼠體重下降明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。3.各組大鼠血脂譜改變與NC組相比,DM組大鼠總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯均有明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),高密度脂蛋白膽固醇水平有一定下降,但差異不顯著(p0.05);給予利拉魯肽干預(yù)后,大鼠血脂譜較DM組有明顯改善,其中,總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇均下降明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);HL組大鼠血甘油三酯下降明顯(p0.05),LL組下降不明顯(p0.05);藥物干預(yù)后大鼠高密度脂蛋白膽固醇有一定升高,但差異不顯著(p0.05);不同劑量利拉魯肽干預(yù)組對比可見,HL組低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯明顯下降,高密度脂蛋白膽固醇明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),總膽固醇有一定降低,但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.各組大鼠脂肪組織大體改變及insig-1的表達情況藥物干預(yù)8周后,處死各組大鼠,取出腎周脂肪組織并稱重,計算大鼠腎周脂肪組織/體重比值,組間對比發(fā)現(xiàn),NC組大鼠腎周脂肪組織重量較DM組輕,腎周脂肪組織占體重比值較DM組小,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);而與DM組相比,利拉魯肽干預(yù)后各組大鼠腎周脂肪組織重量均有下降,腎周脂肪組織占體重比值亦減小(p0.05);HL組較LL組大鼠上述指標有所下降,但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。與NC組相比,三組T2DM大鼠腎周脂肪組織insig-1表達均有降低(p0.05);對比DM組,利拉魯肽干預(yù)組腎周脂肪組織insig-1表達增加(p0.05),且HL組較LL組表達增加更明顯(p0.05)。結(jié)論:1.利拉魯肽可以改善T2DM大鼠一般情況,減輕多食、多飲、多尿等癥狀,同時可減輕體重,且這一改善呈利拉魯肽劑量依賴性;2.利拉魯肽可以降低T2DM大鼠空腹血糖,改善胰島素抵抗,增加胰島素敏感性,其作用強度呈利拉魯肽劑量依賴性;3.利拉魯肽可以通過增加脂肪組織中insig-1的表達,使T2DM大鼠腎周脂肪組織重量減輕,脂肪組織含量減少,同時改善T2DM大鼠脂質(zhì)代謝紊亂,其調(diào)控強度與利拉魯肽之間呈劑量依賴性。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：R587.1
【部分圖文】：

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文182結(jié)果2.1各組大鼠一般情況及體重變化正常對照組大鼠毛發(fā)亮澤無脫落，動作敏捷，夜間活動多，精神狀態(tài)好，進食、飲水狀態(tài)均可，墊料相對干燥，無需頻繁更換；與正常組對比，糖尿病組大鼠毛發(fā)暗淡濕膩易脫落，反應(yīng)變慢，夜間活動少，精神欠佳，進食量、飲水量均明顯增加，墊料潮濕，需頻繁更換；對比糖尿病組，藥物干預(yù)組大鼠的毛色、精神狀態(tài)、反應(yīng)速度均可，多食、多飲、多尿等癥狀輕，且高劑量組改善更明顯，但相對于正常組大鼠仍差。實驗中藥物干預(yù)期共8周，期間每2周測量并記錄大鼠體重變化，觀察對比測量結(jié)果可發(fā)現(xiàn)，對比正常組，糖尿病組大鼠體重增加明顯，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05），藥物干預(yù)組大鼠的體重亦有一定增加，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；與糖尿病組大鼠對比，藥物干預(yù)組大鼠體重有減輕，且高劑量組（p＜0.05）較低劑量組（p＞0.05）下降更明顯，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）（圖1）。藥物干預(yù)8周后，大鼠的體重值如下（表1）。實驗至結(jié)束，30只大鼠中死亡5只，均表現(xiàn)為毛發(fā)干燥直立，深大呼吸，測即刻血糖明顯高于正常，部分血糖無法測出，考慮可能為血糖過高引起的高血糖危象所致；此外，造模成功后1周觀察期內(nèi)，1只大鼠因血糖低至造模標準以下，剔除出組，故最后實驗各組大鼠均為6只。圖1各組大鼠體重變化情況

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文21與正常組相比，三組糖尿病大鼠的腎周脂肪組織中，insig-1表達均有降低（p＜0.05）；與糖尿病組相比，藥物干預(yù)組腎周脂肪組織insig-1表達增加（p＜0.05），且高劑量組比低劑量組表達增加更明顯（p＜0.05）（圖2）。圖2各組大鼠腎周脂肪組織insig-1表達情況注3：與NC組相比，pa＜0.05；與DM組相比，pc＜0.05；與LL組相比，pc＞0.05Insig-1β-actinNC組DM組LL組HL組abc＊2.5各組大鼠的腎周脂肪組織insig-1的表達情況
【參考文獻】

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1 王丹碧;李雪萍;;脂代謝紊亂與骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)系研究進展[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2019年05期

本文編號：2874560