目的本研究運用外科手術法建立兔脛骨平臺骨折內固定術后模型,采用單純針刀、單純CPM以及針刀聯(lián)合CPM干預,并建立模型組與空白組進行對照,觀察家兔體重、患膝關節(jié)活動度、患膝關節(jié)直徑(腫脹程度)、患膝關節(jié)關節(jié)液內炎性因子、膝周韌帶組織形態(tài)學、纖維化程度以及韌帶組織中MMP-13、TIMP-1含量的變化,驗證單純針刀、單純CPM以及針刀聯(lián)合CPM干預治療兔脛骨平臺骨折內固定術后關節(jié)粘連的有效性,探討其中的作用機制,為針刀治療本病提供實驗依據。方法將30只6個月月齡健康普通級新西蘭大白兔,在造模前運用隨機數字表法將30只家兔選出6只為空白組,其余24只置于膝關節(jié)被動屈伸適應性訓練3d,然后進行造模。造模成功后采用隨機數字表法隨機分為四組,分別為模型組(即SED組),針刀組,CPM組,針刀+CPM組。造模成功后SDE組無任何干預,針刀組于造模一周后,行針刀松解術治療,每周1次,治療4周,共4次,CPM組于造模后第1d開始進行干預,被動運動角度40°~110°,針刀+CPM組結合針刀組和CPM組的治療方法進行治療。各組家兔分別于術前及術后第7、14、21、28天進行體重監(jiān)測、并于術前及術后第1、7、14、21、28天進行膝關節(jié)活動度和腫脹程度的測量。并在治療結束及上述測量完成后,抽取五組家兔右膝關節(jié)關節(jié)液,然后采用空氣栓塞法將其處死,取右膝關節(jié)內側副韌帶和外側副韌帶,用剪刀去除韌帶周邊結締組織,標本采集后將每份標本剪成合適大小,置于中性固定液中固定,進行HE染色,馬松三色染色觀察韌帶組織的形態(tài)結構以及纖維化程度,最后通過免疫組化法檢測MMP-13、TIMP-1的表達量。結果1.除開空白組,其余四組家兔均在實驗開始后第三周逐漸開始恢復體重,直至實驗結束,這四組體重數據之間并無統(tǒng)計學意義,但是與空白組家兔體重具有統(tǒng)計學差異(n=6,p0.01)。與空白組(n=6)相比,造模后被動最大屈曲角、被動最大伸長角、關節(jié)活動度明顯降低或升高(p0.01);與SED組(n=6)相比,干預14天后,CPM組(n=6)和針刀+CPM組(n=6)被動最大伸長角和關節(jié)活動度顯著增加,被動最大屈曲角顯著降低(p0.05;p0.01);干預第28天,針刀組(n=6)關節(jié)活動度較模型組明顯改善(p0.05),針刀+CPM組關節(jié)活動度較CPM組及針刀組明顯增加(p0.05)。與SED組相比(n=6),從干預第14天開始,其他組關節(jié)腫脹程度均有顯著性升高(p0.01)。與其他組相比,從干預的第21天開始針刀+CPM組(n=6)有顯著性差異(p0.01)。干預第28天,各組關節(jié)腫脹情況均有顯著性差異(p0.01)。2.膝關節(jié)液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表達水平在SED組家兔右膝關節(jié)中較空白組家兔右膝關節(jié)中顯著增加(n=6,p0.01)。膝關節(jié)液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表達水平在針刀組、CPM組家兔右膝關節(jié)中較SED組家兔右膝關節(jié)中顯著減少(n=6,p0.05)。針刀組與CPM組之間患膝(右膝)關節(jié)膝關節(jié)液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表達水平未見明顯變化。針刀+CPM組明顯降低患膝(右膝)關節(jié)膝關節(jié)液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表達水平,與SED組,CPM組和針刀組相比顯著降低(n=6,p0.01)。3.HE染色和馬松三色染色觀察干預前后內側副韌帶和外側副韌帶的變化。HE染色顯示,造模后,兔內外側副韌帶均無干預,韌帶纖維粗大、紊亂,韌帶細胞腫脹,韌帶細胞核變形,間質增寬,纖維化。治療后上述癥狀均有不同程度的緩解。馬松三色染色顯示,兔內側副韌帶和外側副韌帶的彈性纖維(紅色)在建模后明顯減少,而膠原纖維(藍色)明顯增加。內側副韌帶較外側副韌帶嚴重。干預后,可以看到彈性纖維有不同程度的增加。4.與空白組(n=6)相比,SED組韌帶標本中MMP-13表達水平顯著升高,TIMP-1表達水平顯著升高(n=6,p0.01)。經針刀和CPM治療后,針刀組、CPM組以及針刀+CPM組韌帶組織中MMP-13和TIMP-1的表達水平明顯低于SED組(n=6,p0.01)。針刀組與CPM組之間無顯著性差異。針刀+CPM組、空白組和針刀組、CPM組之間在部分韌帶組織中蛋白表達量存在顯著性差異(n=6,p0.05)。針刀+CPM組與空白組無顯著性差異。結論1.針刀聯(lián)合早期CPM治療可明顯改善造模后家兔的關節(jié)活動度以及關節(jié)腫脹程度,單純的兩種療法也有效果,但是不如兩種聯(lián)合使用明顯。2.針刀聯(lián)合早期CPM治療可明顯降低模型家兔右膝關節(jié)中的炎癥情況,單純的兩種療法也有效果,但是不如兩種聯(lián)合使用明顯。3.針刀聯(lián)合早期CPM治療可明顯改善韌帶組織的形態(tài)結構和纖維化程度,而其機制有可能是對周圍韌帶組織松解,刺激到某條機械刺激通路,以良性調節(jié)韌帶組織中MMPs和TIMPs的含量,改善了膝周韌帶的纖維化,以及調節(jié)關節(jié)內炎癥因子的分泌,從而起到保護關節(jié),恢復關節(jié)正常活動的作用。
【學位單位】：湖北中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2020
【中圖分類】：R245
【部分圖文】：

湖北中醫(yī)藥大學2020屆碩士學位論文6離，即膝關節(jié)直徑[33]。為了保證實驗的準確性，在測量過程中，兩個檢驗員獨立地進行數據測量，并對每個肢體重復測量三次。主考人對彼此的分數視而不見。報告的值是兩個審查員所測量的六個測量值的平均值。3.2統(tǒng)計方法采用SPSS25.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用均值±標準差表示。采用單ANOVA分析，若差異具有統(tǒng)計學意義，再進行組間兩兩比較，采用LSD-t檢驗。設α=0.05，p<0.05認為差異具有統(tǒng)計學意義。4結果4.1體重眾所周知，關節(jié)紅腫和體重減輕通常出現(xiàn)在關節(jié)炎的發(fā)病期;體重變化是評估疾病過程和動物壓力的參數之一。表1各組家兔干預前后體重變化（單位：kg）組別n（只）0天7天14天21天28天空白組62.97±0.273.05±0.243.11±0.213.16±0.193.23±0.20SED組62.98±0.252.51±0.15*2.32±0.12*2.45±0.17*2.68±0.23*針刀組62.97±0.292.49±0.17*2.45±0.14*△2.61±0.23*△2.88±0.21*CPM組62.98±0.232.50±0.14*2.46±0.12*△2.62±0.21*△2.86±0.21*針刀加CPM組62.98±0.272.48±0.18*2.47±0.13*△2.66±0.19*△2.91±0.15*注：*與同期空白組比較,p<0.01;△與同期空白組比較，p<0.05圖1各組家兔干預前后體重變化注：*與同期空白組比較,p<0.01;△與同期SED組比較，p<0.05

針刀聯(lián)合持續(xù)被動運動對兔脛骨平臺骨折術后關節(jié)功能障礙影響的實驗研究9圖2各組家兔干預前后關節(jié)活動度的變化注：*與同期空白組比較,p<0.01;#與同期SED組比較，p<0.05;△與同期SED組比較，p<0.01;▲與同期針刀+CPM組比較，p<0.05由表2、3、4和圖2結果可見，與空白組（n=6）相比，造模后被動最大屈曲角、被動最大伸長角、關節(jié)活動度明顯降低或升高（p<0.01）。與SED組（n=6）相比，干預14天后，CPM組（n=6）和針刀+CPM組（n=6）被動最大伸長角和關節(jié)活動度顯著增加，被動最大屈曲角顯著降低（P<0.05；p<0.01）。干預第28天，針刀組（n=6）關節(jié)活動度較模型組明顯改善（p<0.05），針刀+CPM組關節(jié)活動度較CPM組及針刀組明顯增加（p<0.05）�？偠灾炷：蠹彝没枷霈F(xiàn)明顯的關節(jié)屈伸受限，關節(jié)活動度明顯下降，CPM組、針刀+CPM組在治療第二周后關節(jié)活動度出現(xiàn)明顯改善，而針刀組在治療第四周后才出現(xiàn)明顯改善。4.3膝關節(jié)直徑

湖北中醫(yī)藥大學2020屆碩士學位論文10表5除開空白組其余4組家兔干預前后關節(jié)腫脹程度變化（單位：cm）組別n（只）1天7天14天21天28天SED組60.3270±0.01200.2058±0.00480.1728±0.00360.1742±0.0021#0.1688±0.0043△針刀組60.3195±0.00590.2093±0.00470.1818±0.0028*0.1747±0.0026#0.1533±0.0047■CPM組60.3232±0.0090.2088±0.00590.1851±0.0035*0.1735±0.0041#0.1442±0.0039▲針刀加CPM組60.3234±0.0140.2063±0.00460.1814±0.0024*0.1644±0.00350.1219±0.0069□注：*與同期SED組比較，p<0.01;#與同期針刀+CPM組比較，p<0.01;△▲■□與同期各組相比，p<0.01圖3除開空白組其余四組家兔干預前后關節(jié)腫脹程度的變化注：*與同期SED組比較，p<0.01;#與同期針刀+CPM組比較，p<0.01;△▲■□與同期各組相比，p<0.01由表5和圖3結果可見，與SED組相比（n=6），從干預第14天開始，其他組關節(jié)腫脹程度均有顯著性升高（p<0.01）。與其他組相比，從干預的第21天開始針刀+CPM組（n=6）有顯著性差異（p<0.01）。干預第28天，各組關節(jié)腫脹情況均有顯著性差異（p<0.01）。5討論通過以上實驗的結果可知，SED組家兔出現(xiàn)了體重減輕，關節(jié)腫脹以及關節(jié)活動度降低等現(xiàn)象，均提示其因為手術而導致了關節(jié)炎癥及粘連的發(fā)生，并與我們之前推斷情況是一致的，而針刀組、CPM組和針刀+CPM組各家兔經過干預后對應的癥狀得到明顯的緩解。
【參考文獻】

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本文編號：2864212