發(fā)布時間：2017-03-25 06:03

  本文關(guān)鍵詞：鼠尾藻和海帶多糖與多酚對黃嘌呤氧化酶抑制作用及對高尿酸血癥小鼠降尿酸效果研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：黃嘌呤氧化酶(EC 1.1.3.2.2, Xathine Oxidase, XOD)是機(jī)體尿酸代謝的關(guān)鍵酶,在機(jī)體內(nèi)能夠?qū)⒋吸S嘌呤氧化為黃嘌呤并且繼續(xù)氧化生成終產(chǎn)物尿酸、過氧化氫和超氧化物。人體內(nèi)尿酸含量過高會引發(fā)高尿酸血癥并最終導(dǎo)致痛風(fēng),持續(xù)性的高尿酸血癥會引起高血壓、高血脂、心血管疾病、慢性腎病等并發(fā)癥的發(fā)生。近年來,黃嘌呤氧化酶抑制劑作為一種極為有效的抗高尿酸血癥藥物受到了國內(nèi)外研究學(xué)者的廣泛關(guān)注。但是,目前臨床中應(yīng)用的黃嘌呤氧化酶抑制劑類藥物普遍存在著嚴(yán)重的毒副作用,因此,從天然活性物質(zhì)中尋找高效、安全無毒的黃嘌呤氧化酶抑制劑逐漸成為抗高尿酸血癥藥物研究的新方向。本文研究了鼠尾藻和海帶多糖與多酚對XOD的抑制作用,測定了它們在體外對XOD的半抑制濃度(IC50)；動力學(xué)方法研究了這些多糖與多酚對XOD的抑制類型、抑制機(jī)理和抑制常數(shù)；分別測定了它們與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用以及在體外對自由基的清除作用；采用氧嗪酸鉀腹腔注射小鼠建立高尿酸血癥模型,研究了海帶多糖對高尿酸血癥小鼠的降尿酸效果,并對小鼠肝臟中XOD的活力進(jìn)行測定。實驗結(jié)果如下：實驗測得鼠尾藻多酚與鼠尾藻多糖對XOD都具有一定的抑制作用,其IC5o分別為0.58mg/mL和1.21mg/mL,動力學(xué)分析結(jié)果顯示,二者對XOD的抑制類型都為競爭性可逆抑制作用,Ki值分別為0.07mg/mL和0.46mg/mL;海帶多酚與海帶多糖的ICso分別為0.88mg/mL和1.63mg/mL,海帶多糖對XOD的抑制類型為競爭性可逆抑制作用,Ki值為0.30mg/mL,海帶多酚對XOD的抑制類型為反競爭性可逆抑制作用,Ki值為0.21mg/mL。用等毒法研究這些海藻多糖和多酚與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用,結(jié)果顯示鼠尾藻多酚與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用屬于弱協(xié)同作用；鼠尾藻多糖、海帶多酚、海帶多糖與別嘌呤醇的聯(lián)合抑制作用都表現(xiàn)為協(xié)同作用。鼠尾藻和海帶多糖與多酚在體外對OH-和O2-都具有清除作用,其中鼠尾藻多糖和鼠尾藻多酚對OH-的清除率都大于50%,并且隨著清除劑濃度的增大,清除率也隨之升高,二者對O2-的清除作用較弱,最高清除率為61.86%,劑量依賴關(guān)系不顯著。海帶多糖和海帶多酚對OH-的清除作用更強(qiáng),清除率最高可達(dá)到92.13%,劑量依賴效應(yīng)顯著,而對O2-的清除作用較弱,劑量依賴效應(yīng)不顯著。用不同劑量的海帶多糖灌胃7d后,海帶多糖高、中劑量組小鼠血尿酸水平明顯低于模型組(P0.05),小鼠肝臟中XOD的酶活力與模型組相比差異顯著(P0.05),說明海帶多糖能夠顯著降低高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平,且對小鼠肝臟中XOD酶活具有抑制作用。實驗組小鼠的血尿酸水平與正常組小鼠相比無明顯差別(P0.05),說明高尿酸血癥小鼠的血尿酸已基本恢復(fù)至正常水平。此外,海帶多糖組小鼠在實驗期間體重增長穩(wěn)定、毛色鮮亮、精神狀態(tài)良好、無死亡現(xiàn)象,證明海帶多糖作為降尿酸藥物是安全無毒的。鼠尾藻和海帶多糖與多酚對XOD具有較高的抑制活性,在體外對羥自由基和過氧陰離子都具有較強(qiáng)的清除作用,且海帶多糖對氧嗪酸鉀所致的高尿酸血癥具有良好的改善作用。海帶是一種食用藻類,其營養(yǎng)豐富,安全無毒,具有多種生物活性功能,鼠尾藻作為沿海常見的優(yōu)勢種海藻,全年生長,分布廣泛,目前還未得到充分的開發(fā)利用。因此,鼠尾藻和海帶多糖與多酚在作為抗高尿酸血癥藥物和抗氧化劑方面都具有良好的開發(fā)前景,本文為鼠尾藻和海帶的進(jìn)一步開發(fā)與應(yīng)用提供了新的研究思路。
【關(guān)鍵詞】：鼠尾藻 海帶 多糖 多酚 黃嘌呤氧化酶 抑制作用 高尿酸血癥
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-14
• 第一章 前言14-30
• 1 高尿酸血癥概述14-21
• 1.1 高尿酸血癥發(fā)病機(jī)制14-17
• 1.1.1 原發(fā)性高尿酸血癥14-16
• 1.1.2 繼發(fā)性高尿酸血癥16-17
• 1.2 高尿酸血癥與其他疾病的關(guān)系17-19
• 1.2.1 高尿酸血癥與心腦血管疾病17-18
• 1.2.2 高尿酸血癥與高血壓18
• 1.2.3 高尿酸血癥與高血脂18
• 1.2.4 高尿酸血癥與糖尿病18-19
• 1.3 高尿酸血癥的治療方法19-21
• 1.3.1 藥物治療19-21
• 1.3.2 非藥物治療21
• 2 黃嘌呤氧化酶概述21-27
• 2.1 XOD的結(jié)構(gòu)特征與催化機(jī)理22-23
• 2.2 黃嘌呤氧化酶抑制劑23-27
• 2.2.1 化學(xué)合成類抑制劑24-26
• 2.2.2 天然來源抑制劑26-27
• 3 實驗藻類介紹27-29
• 3.1 鼠尾藻27-28
• 3.2 海帶28-29
• 4 立項依據(jù)29-30
• 第二章 鼠尾藻多糖和多酚對黃嘌呤氧化酶的抑制作用30-46
• 1 前言30
• 2 實驗材料、藥品與儀器30-33
• 2.1 實驗材料的制備30
• 2.2 藥品與試劑的配制30-33
• 2.2.1 藥品30-31
• 2.2.2 實驗試劑配制31-33
• 2.3 實驗儀器33
• 3 實驗方法33-38
• 3.1 實驗原理33-34
• 3.2 鼠尾藻多酚和多糖樣品的制備34-35
• 3.2.1 鼠尾藻多酚的制備34
• 3.2.2 鼠尾藻多糖的制備34-35
• 3.3 鼠尾藻多酚和多糖對XOD抑制活性的研究35-36
• 3.3.1 鼠尾藻多酚和多糖對XOD半抑制濃度的測定35
• 3.3.2 鼠尾藻多酚和多糖對XOD的抑制作用機(jī)理的測定35
• 3.3.3 鼠尾藻多酚和多糖對XOD的抑制類型及抑制常數(shù)的測定35-36
• 3.4 鼠尾藻多酚和多糖與別嘌呤醇對XOD的聯(lián)合抑制作用36
• 3.5 鼠尾藻多酚和多糖的體外抗氧化作用36-37
• 3.5.1 鼠尾藻多酚和多糖對OH~-的清除作用36-37
• 3.5.2 鼠尾藻多酚和多糖對O_2~-的清除作用37
• 3.6 數(shù)據(jù)處理37-38
• 4 實驗結(jié)果38-44
• 4.1 鼠尾藻多酚和多糖對XOD抑制作用的研究38-41
• 4.1.1 鼠尾藻多酚和多糖對XOD半抑制濃度的測定38
• 4.1.2 鼠尾藻多酚和多糖對XOD抑制作用機(jī)理的測定38-39
• 4.1.3 鼠尾藻多酚和多糖對XOD抑制作用類型和抑制常數(shù)的測定39-41
• 4.2 鼠尾藻多酚和多糖和別嘌呤醇對XOD的聯(lián)合抑制作用41-42
• 4.3 鼠尾藻多酚和多糖的體外抗氧化作用42-44
• 4.3.1 鼠尾藻多酚和多糖對OH~-的清除作用42-43
• 4.3.2 鼠尾藻多酚和多糖對O_2~-的清除作用43-44
• 5 討論44-46
• 第三章 海帶多酚和多糖對黃嘌呤氧化酶的抑制作用46-56
• 1 前言46
• 2 實驗材料、藥品與儀器46
• 2.1 實驗材料46
• 2.2 實驗藥品與試劑46
• 2.2.1 藥品46
• 2.2.2 試劑配制46
• 2.3 實驗儀器46
• 3 實驗方法46-48
• 3.1 海帶多糖和多酚的制備46-47
• 3.1.1 海帶多糖的制備46-47
• 3.1.2 海帶多酚的制備47
• 3.2 海帶多酚和多糖對XOD抑制活性的測定47
• 3.2.1 海帶多酚和多糖對XOD半抑制濃度的測定47
• 3.2.2 海帶多酚和多糖對XOD抑制機(jī)理的測定47
• 3.2.3 海帶多酚和多糖對XOD抑制類型和抑制常數(shù)的測定47
• 3.3 海帶多酚和多糖與別嘌呤醇對XOD的聯(lián)合抑制作用47
• 3.4 海帶多酚和多糖的體外抗氧化作用47-48
• 3.4.1 海帶多酚和多糖對OH~-的清除作用47-48
• 3.4.2 海帶多酚和多糖對O_2~-的清除作用48
• 3.5 數(shù)據(jù)處理48
• 4 實驗結(jié)果48-54
• 4.1 海帶多酚和多糖對XOD抑制作用的研究48-52
• 4.1.1 海帶多酚和多糖對XOD半抑制濃度的測定48
• 4.1.2 海帶多酚和多糖對XOD抑制機(jī)理的測定48-49
• 4.1.3 海帶多酚和多糖對XOD抑制類型和抑制常數(shù)的測定49-52
• 4.2 海帶多酚和多糖和別嘌呤醇對XOD的聯(lián)合抑制作用52
• 4.3 海帶多酚和多糖的體外抗氧化作用52-54
• 4.3.1 海帶多酚和多糖對OH~-的清除作用52-53
• 4.3.2 海帶多酚和多糖O_2~-的清除作用53-54
• 5 討論54-56
• 第四章 海帶多糖對高尿酸血癥小鼠降尿酸效果的研究56-66
• 1 前言56
• 2 實驗材料、藥品和儀器56-58
• 2.1 實驗材料56
• 2.2 藥品與試劑56-58
• 2.2.1 藥品56-57
• 2.2.2 試劑配制57-58
• 2.3 儀器58
• 3 實驗方法58-60
• 3.1 小鼠實驗分組和給藥58-59
• 3.2 血清尿酸水平的測定59
• 3.3 海帶多糖對小鼠肝臟XOD活力的影響59-60
• 3.3.1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制59
• 3.3.2 尿酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制59-60
• 3.3.3 肝臟XOD活性測定60
• 3.4 數(shù)據(jù)處理60
• 4 實驗結(jié)果60-64
• 4.1 海帶多糖對高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平的影響60-61
• 4.2 海帶多糖對小鼠肝臟XOD活力的影響61-63
• 4.2.1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線61-62
• 4.2.2 尿酸標(biāo)準(zhǔn)曲線62
• 4.2.3 小鼠肝臟XOD活力測定62-63
• 4.3 小鼠的生長狀態(tài)63-64
• 5 討論64-66
• 全文總結(jié)66-68
• 參考文獻(xiàn)68-74
• 致謝74-75
• 個人簡歷75
• 已發(fā)表學(xué)術(shù)論文75

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 史s

本文編號：266741