本文關(guān)鍵詞：小膠質(zhì)細(xì)胞在胰島素作用下功能變化及機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察小膠質(zhì)細(xì)胞及高Trk A表達(dá)的小膠質(zhì)細(xì)胞在不同濃度胰島素作用下功能的變化及其可能機(jī)制,探討Trk A蛋白高表達(dá)對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞功能的影響。方法:用BV2、PC12細(xì)胞株分別代表小膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元。以BV2細(xì)胞、高TrkA表達(dá)的BV2(TrkA+BV2)細(xì)胞作為研究對(duì)象,用PC12細(xì)胞存活率反映二者在不同濃度胰島素作用下的功能。將0ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml的胰島素分別加入BV2和Trk A+BV2細(xì)胞,培養(yǎng)20h后收集上清液,以備培養(yǎng)PC12細(xì)胞。按上清液的不同,將PC12細(xì)胞分為:BV2細(xì)胞處理組和Trk A+BV2細(xì)胞處理組,前者加入收集好的BV2細(xì)胞上清液,后者加入Trk A+BV2細(xì)胞上清液。繼續(xù)培養(yǎng)PC12細(xì)胞1h,再加入H2O2損傷,用MTT法檢測(cè)PC12細(xì)胞存活率。將TrkA+BV2細(xì)胞處理組的PC12細(xì)胞存活率與同等條件下的BV2細(xì)胞處理組進(jìn)行對(duì)比,明確TrkA蛋白高表達(dá)對(duì)BV2細(xì)胞功能的影響。ELISA法檢測(cè)不同濃度胰島素作用下BV2及TrkA+BV2細(xì)胞NGF、IL-1β的分泌量。結(jié)果:1.當(dāng)胰島素濃度為0 ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml時(shí),BV2細(xì)胞處理組的PC12細(xì)胞存活率依次為48.26±0.70%、52.02±0.67%、57.30±0.91%、60.71±1.51%、69.25±1.79%。對(duì)應(yīng)胰島素濃度下,Trk A+BV2細(xì)胞處理組的PC12細(xì)胞存活率依次為49.34±1.33%、62.06±0.70%、68.25±1.56%、73.19±2.38%、81.87±1.28%。PC12細(xì)胞存活率均隨胰島素濃度的增加而逐漸增高,單因素方差分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,組內(nèi)兩兩比較,差異具有顯著性(P0.01)。與同等條件下的BV2細(xì)胞處理組比較(除0 ng/ml濃度外),Trk A+BV2細(xì)胞處理組的PC12細(xì)胞存活率均顯著升高(P0.01)。2.BV2與Trk A+BV2細(xì)胞NGF分泌量均隨胰島素濃度的升高而逐漸增多,其值分別為532.17±8.52ng/L VS 568.27±7.43ng/L(10ng/ml胰島素)、569.18±9.36ng/L VS 593.17±11.10ng/L(25ng/ml胰島素)、599.24±15.34ng/L VS 636.40±10.75ng/L(50ng/ml胰島素)、635.06±12.35ng/L VS 678.72±13.46ng/L(75ng/ml胰島素),單因素方差分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,組內(nèi)兩兩比較,差異具有顯著性(P0.05);與同等條件下的BV2細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比,Trk A+BV2細(xì)胞NGF的分泌量均顯著升高(P0.05)。BV2與Trk A+BV2細(xì)胞IL-1β分泌量隨胰島素濃度的升高而逐漸減少,其量分別為17.77±0.58ng/L VS 17.87±0.66ng/L(10ng/ml胰島素)、14.15±0.69ng/L VS 14.80±0.41 ng/L(25ng/ml胰島素)、13.67±0.89ng/L VS 14.11±0.10ng/L(50ng/ml胰島素)、11.53±1.54ng/L VS 11.76±0.84ng/L(75ng/ml胰島素),單因素方差分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,除25ng/ml與50ng/ml的分泌量比較無差異外(P0.05),剩余組內(nèi)兩兩比較差異均具有顯著性(P0.05);TrkA+BV2細(xì)胞與同等條件下的BV2細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比,IL-1β的分泌量均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.小膠質(zhì)細(xì)胞在一定范圍濃度胰島素刺激下(≤75ng/ml),通過分泌NGF發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,且隨著胰島素濃度的增加NGF分泌量逐漸增多、神經(jīng)保護(hù)作用逐漸增強(qiáng)。2.高Trk A表達(dá)的小膠質(zhì)細(xì)胞與同等胰島素濃度作用下的小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比(除0ng/ml胰島素外),NGF分泌量進(jìn)一步增多,從而發(fā)揮更強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：小膠質(zhì)細(xì)胞 TrkA蛋白 功能狀態(tài) 胰島素
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.2;R747.9
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11
• 實(shí)驗(yàn)材料和儀器11-13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-18
• 結(jié)果18-23
• 討論23-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-28
• 綜述28-37
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 致謝37-38

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本文編號(hào)：260102