【摘要】：肺炎克雷伯桿菌(Klebsiella pneumoniae)性質是革蘭陰性桿菌,由Friedlander在1882年從一位大葉性肺炎病人的痰液中分離純化得到。肺炎克雷伯桿菌外周有莢膜,這個特點導致其對外界環(huán)境的適應性增強。肺炎克雷伯桿菌常寄生在人體的腸道和呼吸道等部位,是臨床引起感染性疾病最為常見的病原體之一,是非常重要的條件性致病菌。肺炎克雷伯桿菌感染后可造成敗血癥,重癥肺炎,尿路,呼吸系統(tǒng)以及顱內(nèi),皮膚軟組織等部位的感染,且發(fā)生率不斷提高。近年來肺炎克雷伯桿菌不斷引發(fā)致命性社區(qū)獲得性問題,這引起了醫(yī)學界廣泛的關注。在健康人群中,肺炎克雷伯桿菌引起的感染性疾病發(fā)病率不斷的上升,其中包括肺炎、腦膜炎、眼內(nèi)炎以及肺炎克雷伯桿菌性肝膿腫等相關疾病。許多研究均表明了,肺炎克雷伯菌標本主要來自于痰液,提示肺炎克雷桿菌疾病主要引起呼吸系統(tǒng)疾病。根據(jù)2005-2014年CHINET克雷伯菌屬細菌耐藥性監(jiān)測顯示:10年之內(nèi)克雷伯桿菌的臨床檢出率不斷上升,從2005年的10.1%上升至2014年的14.3%,最主要的標本來源為呼吸道,占比為60.0%。2005-2014年的監(jiān)測顯示肺炎克雷伯桿菌對碳青霉烯類藥物的耐藥性呈上升趨勢,美羅培南耐藥率從2005年2.8%上升至2014年13.4%。肺炎克雷伯桿菌存在著不同的致病因子,這些因素的共同作用造成了人體各器官和系統(tǒng)的損傷。肺炎克雷伯桿菌的致病因子主要有莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、鐵細胞和鐵載體、血清殺菌素、抗菌肽、外膜孔道蛋白等。痰熱清由五味中藥組成,分別是:黃芩、熊膽粉、山羊角、金銀花、連翹組成。痰熱清主要臨床功效為解毒、清熱、化痰。臨床上主要用于風溫肺熱病屬痰熱阻肺癥。臨床常見癥狀有:咳嗽、發(fā)熱、咯痰不爽、口渴、舌紅、苔黃等;主要用于急性支氣管炎,急性肺炎(早期)出現(xiàn)的上述癥狀,臨床用途非常廣泛。痰熱清具有化痰、抑菌、抗病毒、解熱以及免疫調節(jié)等方面的藥理作用。將其轉換為注射劑型后,痰熱清在臨床上的應用變得越來越廣泛。痰熱清在臨床上還有很多沒有被發(fā)掘的使用價值,值得我們進一步進行挖掘,給臨床工作帶來等多的便利。目的:通過痰熱清注射液在體外對產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌株抑菌作用的觀察,研究痰熱清注射液對產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌株的作用效果,探討中藥以及中西藥聯(lián)合應用對產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌株的抑制作用,臨床中進行中藥對產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌株耐藥的干預,以達到減少和延緩細菌耐藥,并為進一步研究中藥在體內(nèi)的抑菌機理打下基礎。方法:采用全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)(Phenix-100)進行細菌的鑒定和表型篩選;按照臨床實驗室標準化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standard Institute,CLSI)推薦的紙片擴散法對初篩可疑的耐藥菌株進行確證實驗,按照CLSI推薦的肉湯稀釋法研究痰熱清注射液、痰熱清聯(lián)合美洛西林、痰熱清聯(lián)合美洛西林舒巴坦以及痰熱清聯(lián)合亞胺培南西司他丁鈉對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌的體外抑制作用。結果:痰熱清注射液對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌的藥物最低抑菌濃度MIC為500 μl/ml;美洛西林對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌的藥物最低抑菌濃度MIC為4096 μg/ml;美洛西林舒巴坦鈉對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌藥物最低抑菌濃度MIC為1024 μ g/ml;亞胺培南西司他丁鈉對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌藥物最低抑菌濃度MIC為64 μ g/ml。當痰熱清和美洛西林同時作用于產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌時,高濃度的痰熱清溶液可以使美洛西林的MIC值提高,提示臨床上美洛西林不能與痰熱清注射液短時間內(nèi)同時使用。如果痰熱清與美洛西林聯(lián)合應用不僅對降低美洛西林的MIC值沒有幫助甚至還會產(chǎn)生副作用。當痰熱清的濃度為350 μ l/ml-500 μ l/ml時,可使美洛西林的MIC值上升2倍至8192 μ g/ml。當痰熱清和美洛西林舒巴坦鈉同時作用于產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌時,痰熱清溶液和美洛西林舒巴坦聯(lián)合應用對降低美洛西林舒巴坦的MIC值沒有幫助,提示臨床上美洛西林舒巴坦鈉不宜與痰熱清注射液同時使用。兩者短時間內(nèi)聯(lián)合應用沒有協(xié)同作用。當痰熱清和亞胺培南西司他丁鈉同時作用于產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯菌時,當痰熱清溶液濃度為250-300 μl/ml時,可以使亞胺培南西司他丁鈉MIC值下降2倍,達到32μ g/ml時即可抑制產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯桿菌的生長繁殖;當痰熱清溶液濃度為350-500μ l/ml時,可以使亞胺培南西司他丁鈉MIC值下降4倍,達到16 μ g/ml即可抑制產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯桿菌的生長繁殖。結論:產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯桿菌毒性較強,不同抗生素對其的MIC值均較大,比其他常見耐藥菌的MIC值要高。酶抑制劑對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯桿菌的生長繁殖有一定的抑制作用,故美洛西林舒巴坦的MIC值較美洛西林低。痰熱清注射液單獨應用時對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯桿菌有良好的抑制作用,臨床上可以推廣使用;由于不同種類抗生素化學結構和抑菌機理之間的差別,痰熱清與不同抗生素之間的聯(lián)合應用效果不盡相同。痰熱清與亞胺培南西司他丁鈉之間的聯(lián)合應用效果較為理想,高濃度的痰熱清溶液可以使亞胺培南西司他丁鈉的MIC值出現(xiàn)較為明顯的下降趨勢,最高可以使亞胺培南西司他丁鈉的MIC值下降4倍,稍低濃度的痰熱清溶液可以使亞胺培南西司他丁鈉的MIC值下降2倍,臨床上推廣應用的價值較大;然而,痰熱清注射液與美洛西林聯(lián)合應用效果不佳,兩者甚至會產(chǎn)生一定拮抗作用,高濃度的痰熱清溶液甚至會使美洛西林對產(chǎn)KPC酶的肺炎克雷伯桿菌的MIC值升高2倍;痰熱清溶液和美洛西林舒巴坦同時應用時沒有降低并美洛西林舒巴坦的用藥量,美洛西林舒巴坦的MIC值保持不變,臨床上兩藥不宜聯(lián)合應用。
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285

【參考文獻】

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本文編號：2587435