發(fā)布時間：2020-01-24 07:40

【摘要】：本研究分為兩個部分:一是抗骨接生軟膏的藥學(xué)研究;二是基于斑馬魚M-Act/Tox 一體化評價技術(shù)解析淫羊藿抗骨質(zhì)疏松物質(zhì)基礎(chǔ)。第一部分內(nèi)容:抗骨接生軟膏的藥學(xué)研究抗骨接生軟膏系江蘇省中醫(yī)藥研究院骨傷科用于治療膝骨關(guān)節(jié)炎、腰椎骨關(guān)節(jié)炎、肩周炎,等證屬陽虛寒凝,瘀血阻滯者的經(jīng)驗方。由花椒、艾葉、蒼術(shù)、獨活、桂枝、紅花等10味組成,而現(xiàn)有處方為病人自己打粉攪拌后外敷,極其不方便。本課題在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下,將其制成軟膏便于攜帶及貯存。按照國家藥品監(jiān)督管理局《藥品注冊管理辦法》及《醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑注冊管理辦法(試行)》的相關(guān)法律法規(guī)要求,對抗骨接生軟膏進(jìn)行了藥學(xué)研究,內(nèi)容包括文獻(xiàn)研究、制備工藝研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、穩(wěn)定性的藥學(xué)研究,進(jìn)一步進(jìn)行皮膚刺激性及斑馬魚初步評價研究。此外,淫羊藿為骨傷科常用中藥,其潛在肝毒副作用引起重視,毒/效物質(zhì)基礎(chǔ)亟待明晰,本文用模式生物斑馬魚M-Act/Tox(Metabolism-Action/Toxicity)—體化評價技術(shù)解析淫羊藿抗骨質(zhì)疏松物質(zhì)基礎(chǔ)。1.文獻(xiàn)研究在緒論部分闡述了國內(nèi)外治療關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展,對抗骨接生方中主要藥味的理化性質(zhì)和藥理作用進(jìn)行歸納總結(jié)。2.抗骨接生軟膏制備工藝研究對抗骨接生軟膏進(jìn)行了打粉和制劑成型研究,以出粉率及粉碎特點即粉碎難易程度和粘壁與否為考察指標(biāo),按照藥材性質(zhì)分為單獨打粉、分類打粉和全方混合打粉,優(yōu)選出打粉工藝為全方混合打粉。確定選用基質(zhì)為甘油和凡士林后,以濕度、粘稠度和混合性能為考察指標(biāo),采用單因素及正交L9(34)考查基質(zhì)用量及配比、攪拌溫度、藥粉與基質(zhì)加入混合方式對抗骨接生軟膏成型的影響。將山梨酸鉀、苯甲酸鈉和尼泊金乙酯等防腐劑進(jìn)行對比,確定選用苯甲酸鈉為防腐劑,3批小試及3批中試后最終確定成型工藝確定工藝為:以上十味,混勻,粉碎成細(xì)粉,加入甘油600g,凡士林200g以及苯甲酸鈉3.3g(用少量水溶解),混勻,制成1100g,即得。3.抗骨接生軟膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究為使抗骨接生軟膏質(zhì)量可控,對其性狀、鑒別、檢查、含量測定等方面進(jìn)行了考察,建立了桂枝、紅花、獨活等的薄層鑒別方法。采用HPLC建立獨活中蛇床子素含量測定方法,規(guī)定了含量限度,制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)。計算平均值為1.06mg/10g軟膏,按含量下限取平均值的60%為0.636 mg/10g軟膏,暫規(guī)定本品每10g含獨活以蛇床子素(C15H1603)計,不得少于 0.60mg。4.抗骨接生軟膏的穩(wěn)定性研究根據(jù)《中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,考察藥品的穩(wěn)定性,確定有效期,進(jìn)行影響因素試驗;對三批中試樣品進(jìn)行了光照高溫影響因素試驗、6個月的加速穩(wěn)定性試驗和12個月的長期穩(wěn)定性試驗。對其性狀、鑒別、含量測定等進(jìn)行穩(wěn)定性考察,考察結(jié)果顯示本品質(zhì)量穩(wěn)定。5.皮膚刺激性及斑馬魚評價研究給家兔背部涂抹抗骨接生軟膏Oh～72h未出現(xiàn)血管、肌肉、皮膚黏膜等部位接觸受試藥物后引起紅腫、充血、滲出、變性或壞死等局部反應(yīng)等不良反應(yīng)。并用斑馬魚模型評價了抗骨接生方的安全性。第二部分內(nèi)容:基于斑馬魚M-Act/Tox 一體化評價技術(shù)解析淫羊藿抗骨質(zhì)疏松物質(zhì)基礎(chǔ)研究1.對不同品種淫羊藿提取物,淫羊藿中不同組分(淫羊藿總黃酮、生物堿、有機(jī)酸及多糖)及代表成分(8個黃酮、3個有機(jī)酸和1個生物堿)用斑馬魚進(jìn)行抗骨質(zhì)疏松活性與安全性評價,以黃酮成分為主要指標(biāo),考查其經(jīng)斑馬魚的代謝特點,及其它組分(生物堿、有機(jī)酸和多糖)對黃酮成分M-Act/Tox特性影響。2.用斑馬魚評價抗骨質(zhì)疏松活性發(fā)現(xiàn):不同品種淫羊藿均有抗骨質(zhì)疏松活性;淫羊藿黃酮成分是主要抗骨質(zhì)疏松活性成分,淫羊藿提取物及黃酮組分/成分的作用機(jī)制主要為下調(diào)RANKL的表達(dá),抑制骨吸收。有機(jī)酸類成分具有一定抗骨質(zhì)疏松活性,而生物堿和多糖沒有活性。3.用斑馬魚評價安全性發(fā)現(xiàn):不同品種淫羊藿對斑馬魚的毒性具有差異,致斑馬幼魚不同程度卵黃囊腫大、變黑或變形,淫羊藿50%提取物對骨質(zhì)疏松模型魚的毒性較健康魚大;不同組分安全性具差異:淫羊藿生物堿和黃酮對斑馬魚有一定毒性,其次是有機(jī)酸類,多糖成分安全性最好;淫羊藿黃酮單體的安全性不同:箭藿苷B,箭藿苷C朝藿定C,箭藿苷A淫羊藿苷,寶藿苷I,朝藿定A和朝藿定B,黃酮對斑馬魚的毒性包括代謝增毒和代謝減毒兩方面;綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸及木蘭花堿毒性較低。4.用斑馬魚對淫羊藿的黃酮組份/成分的代謝研究發(fā)現(xiàn):淫羊藿黃酮具共同的脫糖基代謝規(guī)律,經(jīng)斑馬魚代謝后,即7位葡萄糖基易脫去,3位葡萄糖基和3位木糖基易脫去,但鼠李糖基難于脫去,即多種淫羊藿黃酮在體內(nèi)主要轉(zhuǎn)化成共含鼠李糖基的雙糖苷箭藿苷C或單糖苷寶藿苷I,朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷和箭藿定B的主要代謝產(chǎn)物均為BI,朝藿定C的主要代謝產(chǎn)物箭藿苷C;PN模型魚對淫羊藿黃酮成分的代謝速度一般較健康魚略快。5.用斑馬魚模型評價不同組分對淫羊藿黃酮成分M-Act/Tox的影響:多糖類成分可明顯加速淫羊藿黃酮成分代謝轉(zhuǎn)化,增加黃酮毒性;有機(jī)酸類成分可減慢淫羊藿黃酮成分代謝轉(zhuǎn)化,但不會明顯影響黃酮毒性;生物堿類對淫羊藿黃酮成分代謝速度影響不大,但增加黃酮毒性。淫羊藿多糖類、有機(jī)酸類及生物堿類成分不會顯著影響黃酮成分的抗骨質(zhì)疏松活性。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R283.6;R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王煥珍;柴藝匯;陳云志;高潔;陳功;陳偉;;淫羊藿化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2016年07期

2 王可可;龔其海;;淫羊藿化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J];中國民族民間醫(yī)藥;2015年19期

3 于一云;薛愉;朱小霞;鄒和建;;急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的藥物治療及選擇[J];上海醫(yī)藥;2015年11期

4 王丹丹;韋英杰;景莉君;賈曉斌;劉超;;基于斑馬魚毒/效聯(lián)合評價的強(qiáng)骨膠囊抗骨質(zhì)疏松活性與安全性研究[J];中成藥;2015年05期

5 丁道芳;杜國慶;李玲慧;宋奕;徐勤光;曹月龍;詹紅生;鄭昱新;;骨關(guān)節(jié)炎治療的分子靶點研究進(jìn)展[J];分子影像學(xué)雜志;2015年01期

6 易善勇;官麗莉;楊晶;李海燕;李校X;姜潮;黃建;;紅花藥理作用及其開發(fā)與應(yīng)用研究進(jìn)展[J];北方園藝;2015年05期

7 袁航;曹樹萍;陳抒云;過立農(nóng);鄭健;林瑞超;;淫羊藿的化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J];中草藥;2014年24期

8 陳夢菲;姜宏;;獨活寄生湯治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎研究進(jìn)展[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2014年06期

9 詹揚;韋英杰;王長梅;孫娥;賈曉斌;;淫羊藿總黃酮對潑尼松龍誘導(dǎo)斑馬魚致骨質(zhì)疏松的防治作用[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2014年04期

10 詹揚;韋英杰;王長梅;徐鳳娟;孫娥;姚楠;賈曉斌;;基于斑馬魚模型評價微量淫羊藿苷和朝藿定B的抗骨質(zhì)疏松活性[J];中國藥學(xué)雜志;2014年01期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 景莉君;活血舒筋合劑的藥學(xué)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 邊海疆;莪術(shù)殘油軟膏劑的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2010年

3 靳文仙;LBH復(fù)方軟膏的研制與分析[D];天津大學(xué);2007年

，

本文編號：2572599