【摘要】：目的:采用分子生物學技術明確過敏體質和平和體質人群IgE抗體類別轉換相關分子表達的差異,尋找過敏體質特異性的潛在分子生物學標志,探尋過敏體質形成的微觀機制;采用過敏康調理過敏體質,觀察其對過敏體質人群相關疾病及生活質量的改善狀況;明確過敏康調理過敏體質的作用靶點。方法:根據中醫(yī)體質分類與判定、過敏原檢測、過敏性鼻炎診斷標準,排除兼夾體質者、有明確西醫(yī)診斷疾病者、服藥期間者以及孕婦和哺乳期婦女,共納入包含32例過敏體質者和20例平和體質者的樣本群體52人,其中2例在實驗過程中脫落。受試者來源分為兩個部分,一部分為北京中醫(yī)藥大學國醫(yī)堂中醫(yī)門診部、北京醫(yī)圣堂中醫(yī)門診部、北京弘醫(yī)堂中醫(yī)門診部就診的過敏性鼻炎患者,另一部分為經張貼招募過敏體質及平和體質受試者海報獲取的北京市各大高校學生志愿者。過敏康干預前,用普通采血管抽取受試者靜脈血20ml,分離血清,用蛋白芯片技術檢測平和體質與過敏體質者血清中IL-4、IL-13、CD40、BAFF、APRIL、IFN-y蛋白表達差異;用HDTA抗凝管抽取受試者靜脈血5ml,并按QuantiGene plex試劑盒說明預處理全血,之后用QGP法檢測平和體質與過敏體質AID、ID2 MmRNA表達水平,過敏康干預三個月后,再次抽取過敏體質者靜脈血,并用以上方法做同樣的檢測。數據采用spss20軟件分析,平和體質與過敏體質比較采用獨立t檢驗,過敏體質干預前后比較采用配對t檢驗統(tǒng)計分析,數據以x±s表示,P0.5差異有統(tǒng)計學意義,P0.05差異沒有統(tǒng)計學意義。觀察過敏性鼻炎患者在過敏康干預開始前、干預4周后、干預8周后、干預12周后,干預結束1年時鼻癥狀總分表(TNSS)、伴隨癥狀評價表(TNNSS)、變應性鼻炎患者生活質量評分表(RQLQ)的變化。數據采用spss20軟件分析,兩樣本比較,差值滿足正態(tài)分布,采用配對t檢驗。差值呈非正太分布,采用wilcoxon秩和檢驗。計量資料以x±s表示,P0.05差異有統(tǒng)計學意義。結果:1.與平和體質組比較,過敏體質組血清IL-4蛋白水平高于平和體質對照組,差異具有明顯統(tǒng)計學意義(P0.01);IL-13、CD40蛋白濃度高于平和體質對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);IFN-γ蛋白水平低于平和體質對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);APRIL、BAFF蛋白濃度高于平和體質對照組,差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。過敏體質組AID mRNA表達水平高于平和體質對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);Id2 mRNA表達水平低于平和體質對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.與干預前比較,過敏體質組干預后血清中IL-4、IL-13蛋白水平降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);IFN-γ蛋白水平升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);CD40、BAFF、APRIL蛋白水平降低,差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);過敏體質組干預后AID mRNA表達水平略高于過敏體質干預前,但差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);Id2 mRNA表達水平較干預前升高,差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。過敏體質組干預前后,血清中總IgE水平平均值下降,差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05);血清中sIgE水平平均值下降,差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.與干預前相比,過敏性鼻炎患者在過敏康干預4周后、干預8周后、干預12周后、干預結束1年時鼻癥狀總分(TNSS)、伴隨癥狀評分(TNNSS)、變應性鼻炎患者生活質量評分(RQLQ)均有下降,其差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1.IL-4、IL-13、IFN-γ是平和體質與過敏體質的差異性因子,參與過敏體質的形成機制,并作為過敏康調理過敏體質作用的靶點;過敏體質的形成涉及抗體類別轉換過程中IL-4和CD40之間的協(xié)同關系對AID誘導的調節(jié)及Id2的缺失;但過敏體質的形成可能不涉及IgE抗體類別轉換的替代途徑。2.抗體類別轉換過程中,所涉及的轉錄因子結合位點較多,過敏康調理過敏體質可能直接作用于抗體類別轉換過程中NF-κB、STAT6、E2A等轉錄因子結合位點或蛋白激酶,這有待于將來實驗的進一步研究。3.過敏康干預后,過敏癥狀有所改善,但IgE和sIgE的下降不具有統(tǒng)計學差異,可能是低親和力的IgE與高親和力的IgE發(fā)生有益競爭的結果,這有待于后期實驗的進一步驗證。4.過敏康從扶正祛邪的角度調理過敏體質,能明顯改善過敏性鼻炎患者的癥狀,但體質是長期穩(wěn)定存在的狀態(tài),改變十分緩慢,因此,后期實驗需要進一步增加用藥時間,或對病人進行飲食、起居上的綜合指導使其體質得到進一步的改善。
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R229

【參考文獻】

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