【摘要】：我國傳統(tǒng)中藥種類繁多,各種藥材所含有的化學成分很是復(fù)雜,含量也相對較少。因而,從傳統(tǒng)中藥中分離純化出有效成分對于臨床醫(yī)學的藥理作用研究及含量的測定具有較為深遠的影響。本文分別應(yīng)用超臨界流體色譜(supercritical fluid chromatography,SFC)和制備型高效液相色譜(preparative high performance liquid chromatography,PHPLC)對吳茱萸、穿心蓮、木蝴蝶及知母中的化學成分進行分離與純化,所得到的化合物的純度經(jīng)高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)進行了檢測,并采用質(zhì)譜(MS)、紫外光譜(UV)和核磁共振波譜(NMR)對所得到的化合物的結(jié)構(gòu)進行了鑒定。1.SFC分離純化吳茱萸中兩種生物堿類成分研究使用超臨界二氧化碳(SC-CO_2)作為SFC流動相的主體,添加一定量的改性劑(如:甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈等),建立了從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿等成分的SFC方法。在一定研究范圍內(nèi),通過考察色譜柱的類型、改性劑種類及含量、流速、壓力和溫度等條件對分離效果的影響,最終確立了從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿的最適宜的色譜條件。從吳茱萸中分離純化得到的化合物的純度經(jīng)HPLC檢測分別為99.5%和99.8%,經(jīng)UV和NMR鑒定得到吳茱萸堿與吳茱萸次堿的化學結(jié)構(gòu)。通過實驗數(shù)據(jù),擬合得到van’t Hoff曲線,進一步探討了SFC分離過程的熱力學變化規(guī)律。將吳茱萸堿與吳茱萸次堿從流動相到固定相分配過程中的焓變差值與熵變差值進行比較,結(jié)果表明:在該條件下,從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿的SFC過程為焓控制的過程。2.SFC分離純化穿心蓮中兩種二萜內(nèi)酯類成分研究使用SC-CO_2作為SFC流動相的主體,添加一定量的改性劑(如:甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈等),建立了從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯等化學成分的SFC方法。在一定研究范圍內(nèi),通過考察色譜柱的類型、改性劑種類及含量、流速、壓力、溫度等條件對分離效果的影響,最終確立了從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的最適宜的色譜條件。從穿心蓮中分離純化得到的化合物的純度經(jīng)HPLC檢測分別為99.1%和98.5%,經(jīng)UV和NMR鑒定得到穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的化學結(jié)構(gòu)。通過實驗數(shù)據(jù),擬合得到van’t Hoff曲線,進一步探討了SFC分離過程的熱力學變化規(guī)律。將穿心蓮中的穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯從流動相到固定相分配過程中的焓變差值與熵變差值進行比較,結(jié)果表明:在該條件下,從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的SFC過程為焓控制的過程。3.PHPLC分離純化木蝴蝶中的兩種黃酮類成分實驗中以甲醇-水為流動相,建立了從木蝴蝶中分離純化黃芩素-7-O-葡萄糖苷和黃芩素-7-O-雙葡萄糖苷的PHPLC方法。采用C18柱(250 mm×25.4 mm I.D.,10μm),以甲醇-水(45:55,V/V)作為流動相進行等度洗脫,上樣量為20 mg,流速為30 m L/min,檢測波長設(shè)定為280 nm。從木蝴蝶中分離純化所得到的兩種化合物的純度經(jīng)HPLC檢測分別為98.1%和98.9%;然后再采用MS、UV、NMR鑒定,得到黃芩素-7-O-葡萄糖苷和黃芩素-7-O-雙葡萄糖苷的化學結(jié)構(gòu)。4.PHPLC分離純化知母中的兩種黃酮類成分實驗中以甲醇-水為流動相,建立了從知母中分離純化的芒果苷和新芒果苷的PHPLC方法。采用C18柱(250 mm×25.4 mm I.D.,10μm),流動相為甲醇-水(35:65,V/V)等度洗脫,上樣量為27.6 mg,流速為35 m L/min,檢測波長設(shè)定為254 nm。從知母中分離得到的兩種單體成分,經(jīng)HPLC檢測,其純度分別為98.4%和99.1%;其化學結(jié)構(gòu)經(jīng)MS、UV、NMR鑒定為芒果苷和新芒果苷。
[Abstract]:The traditional Chinese medicine has a wide variety of traditional Chinese medicines, and the chemical components contained in the various medicinal materials are very complex and the content is relatively small. Therefore, the separation and purification of the effective components from the traditional Chinese medicine has a far-reaching influence on the pharmacological action of the clinical medicine and the determination of the content. The chemical constituents of Wu's, Andrographis and Anemarrhena are isolated and purified by supercritical fluid chromatography (SFC) and preparative high performance liquid chromatography (PHPLC), respectively. the purity of the obtained compound is detected by high performance liquid chromatography (hplc) and mass spectrometry (ms) is used, The structure of the obtained compound was identified by ultraviolet (UV) and nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). In this paper, the SFC method for separating and purifying the components such as Wu's base and the base of Wu's tribasic was established. In this study, the most suitable chromatographic conditions for the separation and purification of Wu's base and the base of Wu's tribasic were established by examining the influence of the type of the column, the type of the modifier, the content, the flow rate, the pressure and the temperature on the separation effect. The purity of the obtained compound was 99.5% and 99.8% by HPLC, and the chemical structure of Wu's base and Wu's tribasic was obtained by UV and NMR. According to the experimental data, the van't Hoff curve is obtained, and the thermodynamic rule of the SFC separation process is further discussed. In this paper, the difference of the difference between the temperature and the entropy of the alkali from the mobile phase to the fixed phase is compared with the difference of the entropy variation. The results show that under this condition, In this paper, the SFC process of the purification of the two kinds of diolactone in Andrographis paniculata was studied by using SC-CO _ 2 as the main body of the SFC mobile phase, and a certain amount of modifier (such as methanol, ethanol, isopropanol, acetonitrile, etc.) was added. A method for separating and purifying the chemical constituents of Andrographolide and dehydroandrographolide from Andrographis paniculata is established. The most suitable chromatographic conditions for separating and purifying andrographolide and dehydroandrographolide from Andrographis paniculata were established by examining the influence of the type of the column, the type of the modifier, the content, the flow rate, the pressure and the temperature on the separation effect. The purity of the compound obtained from the separation and purification of the Andrographis paniculata is 99.1% and 98.5%, respectively, and the chemical structure of the andrographolide and the dehydrated andrographolide is obtained by UV and NMR. According to the experimental data, the van't Hoff curve is obtained, and the thermodynamic rule of the SFC separation process is further discussed. comparing the pressure difference between the andrographolide and the dehydrated andrographolide from the flowing phase to the fixed phase distribution process, and the result shows that under the condition, the process of separating and purifying the SFC process of the andrographolide and the dehydrated andrographolide from the Andrographis paniculata is the process of the control of the water,3. the two kinds of flavonoids in the purified wood butterfly are separated and purified by the PHPLC, and the methanol-water is used as the mobile phase, A PHPLC method for separating and purifying the berberine-7-O-glucose and the berberine-7-O-digluconate from a butterfly was established. A C18 column (250 mm, 25.4 mm I. D.,10. mu.m) was used as the mobile phase for isocratic elution with methanol-water (45:55, V/ V), with a loading amount of 20 mg, a flow rate of 30 m L/ min, and a detection wavelength of 280 nm. The purity of the two compounds obtained from the separation and purification of the wood butterfly is 98.1% and 98.9%, respectively, and then the MS, the UV and the NMR are used for identification, The chemical structure of the berberine-7-O-glucomin and the berberine-7-O-digluconate was obtained.4. The PHPLC was used to separate and purify the two kinds of flavonoids in anemarrhena, and a PHPLC method for separating and purifying the mango and the new mango juice from anemarrhena was established. A C18 column (250 mm, 25.4 mm I. D.,10. mu.m) was used, and the mobile phase was methanol-water (35:65, V/ V) isocratic elution, the loading amount was 27.6 mg, the flow rate was 35 m L/ min, and the detection wavelength was set to 254 nm. The purity of the two monomer components isolated from Rhizoma Anemarrhenae was 98.4% and 99.1%, respectively. The chemical structure of the two monomer components was identified as mango juice and new mango juice by MS, UV and NMR.
【學位授予單位】：聊城大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1

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