發(fā)布時間：2018-10-29 12:44

【摘要】：目的:原發(fā)性干燥綜合征(primary sj?gren’s syndrome,pSS)是一種以唾液腺高度淋巴細胞浸潤,并具有高球蛋白血癥為特征的彌漫性結(jié)締組織病。臨床表現(xiàn)主要包括口干燥癥,干燥性角、結(jié)膜炎等外分泌腺受損的癥狀,同時也常伴有系統(tǒng)損傷,如肺間質(zhì)纖維化、神經(jīng)系統(tǒng)病變、腎小管酸中毒等。pSS病因及發(fā)病機制未明,其發(fā)病可能與感染、環(huán)境、遺傳及免疫功能紊亂等因素有關(guān)。目前B淋巴細胞在自身免疫性疾病發(fā)病中的作用日漸受到重視。有研究顯示調(diào)節(jié)性B細胞(regulatory B cell,Breg)及白介素-17(interleukin 17,IL-17)與pSS的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本研究通過檢測調(diào)節(jié)性B淋巴細胞(CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs)及白介素-17在pSS患者外周血中的表達水平,分析兩者與臨床、系統(tǒng)受累情況、相關(guān)實驗室指標(biāo)、唇腺病理分級及疾病活動度的相關(guān)性,來探討CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及IL-17在pSS發(fā)生發(fā)展中的作用。方法:1病例選擇:選取自2016年3月至2016年11月期間河北省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科初治pSS患者30例作為實驗組,均符合歐美共識小組(AECG)2002年修訂版干燥綜合征國際分類標(biāo)準(zhǔn),并且排除Ig G4相關(guān)疾病(Ig G4 related disease,Ig G4-RD)等其他自身免疫性疾病、惡性腫瘤、獲得性免疫缺陷綜合征(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)、移植物抗宿主病、病毒性肝炎、抗乙酰膽堿藥物、糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑應(yīng)用者。選取健康志愿者20例為對照組,性別、年齡與實驗組均匹配。2收集入選對象基本信息及臨床資料:記錄基本信息如性別、年齡、病程,臨床癥狀及體征,實驗室指標(biāo)如白細胞計數(shù)(WBC)、紅細胞計數(shù)(RBC)、血小板計數(shù)(PLT)、血紅蛋白計數(shù)(Hb)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血沉(ESR)、類風(fēng)濕因子(RF)、抗核抗體(ANA)、ENA抗體譜、免疫球蛋白(Ig)、補體C3、C4。3實驗方法:采用流式細胞術(shù)(FCM)檢測實驗組及對照組表型為CD19+CD24hi CD38hi的Bregs占CD19+細胞的百分比;酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測兩組外周血清中IL-17的表達水平。4唇腺病理分級:無菌條件下取下唇腺活組織并應(yīng)用福爾馬林固定,經(jīng)石蠟包埋,切片,HE染色。根據(jù)Chisholm標(biāo)準(zhǔn)分為0~Ⅳ級。5 pSS疾病活動評估:根據(jù)2009年歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)制定的干燥綜合征疾病活動度指數(shù)(ESSDAI)評估實驗組疾病活動度。6數(shù)據(jù)處理:應(yīng)用SPSS 21.0.0統(tǒng)計軟件處理。計量資料符合正態(tài)分布的結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Xˉ±SD)表示,具有方差齊性的兩組間比較應(yīng)用獨立樣本t檢驗,多組樣本間均數(shù)比較應(yīng)用單因素ANOVA方差分析,相關(guān)分析應(yīng)用Spearman相關(guān)分析;計量資料非正態(tài)分布的結(jié)果以中位數(shù)(四分位間距)[M(P25,P75)]表示,兩組資料比較應(yīng)用非參數(shù)Mann-Whitney U檢驗,多組間比較應(yīng)用Kruskal-Wallace檢驗,相關(guān)分析應(yīng)用Spearman相關(guān)系數(shù)檢驗。所有的統(tǒng)計檢驗均應(yīng)用雙側(cè)檢驗,P值小于或等于0.05將被認為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1 pSS組及健康對照組外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17表達水平:pSS組外周血中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比為(4.18±1.98%),較健康對照組(1.10±0.63%)顯著升高(P0.001)。血清IL-17的表達水平(17.99±9.88pg/ml)顯著高于健康對照組(13.32±5.29pg/ml,P0.05);2 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17的表達水平與系統(tǒng)損傷的關(guān)系:根據(jù)患者有無系統(tǒng)損傷,將pSS患者分為系統(tǒng)損傷組(20例,66.7%)、非系統(tǒng)損傷組(10例,33.3%);系統(tǒng)損傷組定義為在pSS診斷基礎(chǔ)上,排除其他因素,如藥物、感染等,而出現(xiàn)呼吸、消化、血液、神經(jīng)、泌尿系統(tǒng)等任一系統(tǒng)受累者,非系統(tǒng)損傷組定義為單純表現(xiàn)為口干和(或)眼干癥狀的pSS患者。上述分組中pSS患者外周血中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比分別為4.29±2.27%和3.96±1.33%,血清IL-17的表達分別為19.04±9.93pg/ml及15.50±9.47pg/ml,兩組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17表達與相關(guān)實驗室指標(biāo)的關(guān)系:pSS患者外周血中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比與病程呈負相關(guān)(r=-0.37;P0.05),與血紅蛋白含量呈負相關(guān)(r=-0.43;P0.05),與Ig G呈正相關(guān)(r=0.36;P0.05);與Ig M呈正相關(guān)(r=0.45;P0.05)。pSS患者血清IL-17的水平與ESR呈正相關(guān)(r=0.58;P0.001),與WBC呈正相關(guān)(r=0.53;P0.01);4 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17表達水平與自身抗體的關(guān)系:按照自身抗體ANA、SSA、SSB、RF是否存在,將pSS患者分為ANA陽性組(28例,93%)、ANA陰性組(2例,7%);RF陽性組(9例,30%)、RF陰性組(21例,70%);抗SSA陽性組(16例,53%)、抗SSA陰性組(14例,47%);抗SSB陽性組(7例,23%)、抗SSB陰性組(23例,77%)�？筍SA抗體陽性組pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比(4.86±2.21%),顯著高于抗體陰性組(3.40±1.39%,P0.05),抗SSB抗體陽性組pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比為(6.08±2.08%),顯著高于抗體陰性組(3.60±1.59%,P0.05)。上述其余各抗體陽性組和陰性組pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞百分比無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。pSS患者血清IL-17表達水平在各自身抗體陽性組及陰性組間無顯著差異(P0.05);5 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17表達水平與唇腺組織病理分級的關(guān)系:實驗組pSS患者唇腺病理等級分布情況為:Ⅲ級6例(20%),Ⅳ級24(80%)例,兩組間CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞的百分比分別為3.23±1.42%及4.41±2.05%,血清IL-17水平分別為17.97±8.35pg/ml及17.83±10.24pg/ml,兩組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);6 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs及血清IL-17表達水平與疾病活動指數(shù)ESSDAI的關(guān)系:按ESSDAI評分將疾病活動度分為4組。1-4組分數(shù)段分別為:0-2分,3-5分,6-8分,9分及以上。實驗組pSS患者ESSDAI評分分布0-2分9例(30%),3-5分18例(60%),6-8分3例(10%)。各分組中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+B淋巴細胞的百分比分別為3.29±1.48%,4.34±2.02%和5.84±1.40%,血清IL-17的水平分別為16.30±7.75pg/ml,17.51±9.76pg/ml和24.62±15.80pg/ml。在疾病活動度不同分組之間CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+淋巴細胞的百分比及血清IL-17表達水平差異無統(tǒng)計意義(F=1.21,0.84,P0.05);7 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs占CD19+淋巴細胞的百分比與血清IL-17水平的相關(guān)性:統(tǒng)計學(xué)分析顯示r=0.21,P=0.28,這一結(jié)果提示兩者之間無顯著相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論:1 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs和血清IL-17表達水平較對照組顯著升高,提示CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs和血清IL-17參與了pSS的發(fā)病過程。2 pSS患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs表達水平在抗SSA抗體陽性和抗SSB抗體陽性組顯著高于對應(yīng)抗體陰性的患者,且與Ig G、Ig M水平呈正相關(guān),提示pSS患者CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Bregs高表達與pSS患者免疫功能紊亂有關(guān)。3 pSS患者血清IL-17的表達與ESR及WBC呈正相關(guān),為IL-17作為炎性因子參與pSS的發(fā)病過程提供了進一步的證據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R593.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王笑顏;鄒偉華;吳泉;顧金華;;原發(fā)性干燥綜合征患者IL-17測定及臨床意義[J];中華全科醫(yī)學(xué);2014年04期

2 于織波;張風(fēng)肖;寧曉然;閆永龍;齊fE;;白細胞介素17在原發(fā)性干燥綜合征患者唇腺中的表達及意義[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年10期

3 孫s，

本文編號：2297729