本文關(guān)鍵詞：三株海洋來源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國(guó)海洋大學(xué)》 2011年

兩株南極海洋來源真菌活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究

馬紅艷  

【摘要】：南極海洋來源微生物生存環(huán)境特殊,其次級(jí)代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎、活性獨(dú)特,是新型藥物先導(dǎo)化合物的潛在來源。本論文采用了活性篩選和化學(xué)篩選相結(jié)合的方法,對(duì)南極來源具有抗腫瘤活性的微生物進(jìn)行分離和篩選,選取其中2株具有抗腫瘤活性的真菌進(jìn)行了活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究。 從采自南極海域的海綿、海藻、海水、海泥等11個(gè)樣品中分離得到了58株真菌。通過海蝦生物致死法初篩,獲得活性菌株8株。對(duì)這8株菌株,我們采用兩種培養(yǎng)基發(fā)酵,并采用人慢性髓原白血病K562細(xì)胞通過SRB法篩選,得到5株具有較強(qiáng)細(xì)胞毒活性的菌株。對(duì)5株活性真菌進(jìn)行發(fā)酵條件摸索,以其中2株(PRB-2、PR4-1-3)作為主要研究對(duì)象進(jìn)行大量發(fā)酵,系統(tǒng)研究其活性次級(jí)代謝產(chǎn)物。 對(duì)2株發(fā)酵產(chǎn)物的乙酸乙酯提取物采用薄層色譜、正相及反相硅膠柱色譜、LH-20凝膠柱色譜、高壓液相色譜等現(xiàn)代分離純化手段,從菌株P(guān)RB-2(Penicillium crustosum)的粗提物中分離得到15個(gè)單體化合物(1-15);從菌株P(guān)R4-1-3(Penicillin chrysogenum)的粗提物中分離得到9個(gè)單體化合物(16-24);共24個(gè)化合物。 利用現(xiàn)代波譜學(xué)(IR,UV,MS,NMR,X-ray)確定了全部24個(gè)化合物(1-24)的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱參見Table 1),其中新化合物3個(gè)。新化合物結(jié)構(gòu)類型為γ-丁內(nèi)酯(1-3),其中1為新骨架化合物。已知化合物包括5個(gè)生物堿(4-7、18)、4個(gè)蒽醌(8、19-21),6個(gè)苯的衍生物(9-11、22-24)、2個(gè)杉酮類化合物(16-17)和4個(gè)其他類化合物。 通過SRB法初步評(píng)價(jià)了新化合物1-3的細(xì)胞毒活性,化合物1-3沒有表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞毒活性。同時(shí)以MDCK細(xì)胞株為模型,采用CPE方法,對(duì)新化合物1-3和已知化合物16-17的抗H1N1流感病毒活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià),化合物2在50 ug/mL時(shí),抑制率達(dá)到42.9%,具有弱效抗病毒活性;化合物16在50 ug/mL時(shí),抑制率達(dá)到50%,具有中效抗病毒活性。通過文獻(xiàn)查閱得知,化合物viridicatin(4),viridicatol (5),cyclopenine (6),cyclopenol (7);secalonic acid D(16),meleagrin (18),citreorosein(19)和emodin(21)都具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性,分別為兩株菌發(fā)酵浸膏的主要活性成分,與浸膏活性篩選結(jié)果相符。 綜上,本文從采自南極海洋的共11個(gè)樣品中分離篩選出5株具有細(xì)胞毒活性的真菌;從其中2株真菌中發(fā)現(xiàn)了24個(gè)次級(jí)代謝產(chǎn)物,闡明了全部24個(gè)單體化合物的結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)了3個(gè)新γ-丁內(nèi)酯類化合物,其中1為新骨架化合物。上述研究為天然產(chǎn)物化學(xué)提供了新的結(jié)構(gòu)類型,對(duì)拓展南極海洋微生物資源的開發(fā)利用,研究南極海洋來源真菌中活性次級(jí)代謝產(chǎn)物奠定了基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R915
【目錄】：

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【引證文獻(xiàn)】

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5 林誠(chéng);紅樹植物內(nèi)表生放線菌的分離、活性篩選和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];廈門大學(xué);2009年

6 劉加慶;粘細(xì)菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];山東大學(xué);2006年

7 安然;蜚蠊共附生放線菌的分離、活性篩選和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];廈門大學(xué);2009年

8 尤懷成;兩株植物內(nèi)生炭角菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];廈門大學(xué);2008年

9 計(jì)長(zhǎng)柱;灰綠曲霉Aspergillus glaucus HB1-19的次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2011年

10 吳云丹;兩株疣孢菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：三株海洋來源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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