本文選題：刺糖多糖 + 巨噬細胞RAW264.7　； 參考：《新疆醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:1.研究刺糖中分離純化而來的刺糖多糖對小鼠巨噬細胞RAW264.7增殖作用,吞噬功能,NO釋放量的影響。2.考察刺糖多糖干預巨噬細胞RAW264.7后細胞因子的調節(jié)對免疫活性的影響。3.探討刺糖多糖對巨噬細胞RAW264.7參與信號通路基因的mRNA調控的影響。4.考察刺糖多糖對巨噬細胞RAW264.7參與信號通路基因的蛋白水平的調控。方法:1.經刺糖多糖干預的巨噬細胞RAW264.7,采用MTT法和CCK-8法考察其增殖活性、采用中性紅實驗考察吞噬功能,利用Griess試劑盒檢測NO的生成水平。2.用ELISA試劑盒測定經刺糖多糖干預后,巨噬細胞RAW264.7的細胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6和IL-12的調節(jié)水平。3.采用實時熒光定量PCR法檢測刺糖多糖對巨噬細胞RAW264.7中的p38、NF-κBp65、ERK1/2、JNK1/2/3基因mRNA表達調控的影響。4.通過蛋白印跡法Western blot考察刺糖多糖在信號轉導通路中基因p38、NF-κBp65、ERK1/2、JNK1/2/3蛋白質表達量的影響,及其參與免疫應答機制的原理探究。結果:1.根據(jù)MTT和CCK-8法測定刺糖多糖對巨噬細胞RAW264.7的增殖活性,作用24h和48h后,與空白對照組相比,高濃度的刺糖多糖可明顯促進巨噬細胞RAW264.7的增殖(P0.05)。2.利用CCK-8法檢測,高濃度組刺糖多糖能夠促進巨噬細胞RAW264.7分泌細胞因子TNF-α、IL-1β和IL-12,還可以增強巨噬細胞RAW264.7的吞噬功能和NO的生成水平。3.實時熒光定量PCR法測定結果表明,不同濃度刺糖多糖干預巨噬細胞RAW264.7 24h后,誘導p38、NF-κBp65、ERK1基因mRNA表達水平呈明顯上調(P0.05)。4.蛋白印跡法Western blot實驗結果顯示不同濃度刺糖多糖干預巨噬細胞RAW264.7 24h后,基因p38、NF-κBp65、ERK1/2的蛋白磷酸化水平明顯上調(P0.05)。結論:1.刺糖多糖能夠促進巨噬細胞RAW264.7的增殖以及對其免疫活性有良好的影響。2.刺糖多糖對巨噬細胞RAW264d.7的細胞因子TNF-α、IL-1β和IL-12的分泌有促進作用。3.通過對基因表達調控的考察,其免疫機制與NF-κBp65,p38和ERK1的mRNA表達水平上調有關。4.Western blot結果顯示,刺糖多糖上調p38、NF-κBp65、ERK1/2蛋白的磷酸化水平,從而激活MAPK信號通路和NF-κB信號通路。
[Abstract]:AIM : To investigate the effect of the polysaccharide on the expression of RAW264.7 in macrophages and to investigate the effect of the polysaccharide on the expression of RAW264.7 . The results showed that : 1 . The effect of the polysaccharide on the expression of RAW264.7 in macrophages was investigated by MTT and CCK - 8 .
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285

【參考文獻】

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本文編號：2026987