本文關(guān)鍵詞： 胃癌 CUL4B蛋白 P16蛋白 組織 表達(dá)　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:探討Cullin4B和P16在人胃癌組織中的表達(dá)及其意義。方法:隨機(jī)選取于2016年1月~2016年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院進(jìn)行胃癌切除術(shù)的胃癌患者25例,取其胃癌組織作為實(shí)驗(yàn)組,取相應(yīng)的癌旁正常組織作為對(duì)照組。應(yīng)用HE染色確定胃癌類型及其分化程度;應(yīng)用免疫組織化學(xué)法及蛋白質(zhì)免疫印記(Western blot)檢測(cè)CUL4B蛋白及P16蛋白在胃癌組織及其對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織的表達(dá)情況及表達(dá)水平。分析兩者在胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)差異及其與胃癌的臨床分期及臨床病理因素之間的聯(lián)系。結(jié)果:1病例資料HE染色,觀察所取的胃癌組織及癌旁正常組織的鏡下情況,胃癌類型:腺癌19例,粘液腺癌2例,印戒細(xì)胞癌3例,神經(jīng)內(nèi)分泌癌1例;分化程度:高分化3例,中分化9例,低分化13例;余病例資料如性別,年齡,臨床分期及臨床病理因素(見Table1)。2胃組織免疫組化結(jié)果2.1.1 CUL4B蛋白胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá):根據(jù)免疫組化結(jié)果顯示CUL4B主要定位于細(xì)胞核,以細(xì)胞核中出現(xiàn)清晰的黃色、棕黃色至深棕色著色作為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)。在胃癌組織中CUL4B大多呈陽性或強(qiáng)陽性表達(dá),其光密度(OD)值為(0.180±0.019),癌旁正常組織大多呈陰性、弱陽性或陽性表達(dá),其OD值為(0.128±0.012),胃癌組織的OD值明顯高于癌旁正常組織,兩者差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);2.1.2 CUL4B蛋白與胃癌臨床分期:CUL4B蛋白在胃癌組織中大多呈陽性或強(qiáng)陽性表達(dá),其I期OD值為(0.160±0.011)、II期OD值為(0.176±0.015)、III期+Ⅳ期的OD值為(0.191±0.016),I期與II期的之間比較的P值為0.200,兩者差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.021,兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.260,兩者差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2.1.3 CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素:分化程度:高+中分化組胃癌組織中CUL4B蛋白表達(dá)水平的OD值為(0.162±0.009)低于低分化組的OD值(0.192±0.013),兩組間CUL4B蛋白表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);腫瘤浸潤(rùn)深度(T分期):(T1+T2)組CUL4B蛋白表達(dá)水平的OD值為(0.164±0.012)明顯低于(T3+T4)組OD值(0.191±0.016),組間CUL4B蛋白表達(dá)水平差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.2.1 P16蛋白胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá):P16蛋白染色主要位于細(xì)胞核。在胃癌組織中P16蛋白大多呈陰性、弱陽性表達(dá),少數(shù)呈陽性表達(dá),其光密度(OD)值為(0.112±0.017),癌旁正常組織大多中呈陽性或強(qiáng)陽性表達(dá),其OD值為(0.151±0.012),胃癌組織的OD值明顯低于癌旁正常組織,兩者間差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);2.2.2 P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期:P16蛋白在胃癌組織中大多呈陰性或弱陽性表達(dá),I期OD值為(0.129±0.009)、II期OD值為(0.120±0.006)、在III期+Ⅳ期胃癌組織中的表達(dá)較I期及II期的表達(dá)水平低,其OD值為(0.100±0.015),I期與II期間比較的P值為0.229,兩者間的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.018,兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);II期與III期+Ⅳ期比較間的P值為0.026,兩者間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2.2.3 P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素:分化程度:高+中分化組胃癌組織P16蛋白表達(dá)水平的OD值為(0.126±0.011)高于低分化組的OD值(0.102±0.016),兩組間P16蛋白表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);腫瘤浸潤(rùn)深度(T分期):(T1+T2)組P16蛋白表達(dá)水平的OD值為(0.126±0.009)高于(T3+T4)組OD值(0.100±0.015),組間P16蛋白表達(dá)水平差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;2.3 CUL4B和P16表達(dá)蛋白在胃癌組織中的相關(guān)性:應(yīng)用直線回歸的統(tǒng)計(jì)方法分析應(yīng)用免疫組化學(xué)法檢測(cè)的CUL4B蛋白及P16蛋白在胃癌組織中表達(dá)水平的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)其陽性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.552,P0.05)。3胃組織Western blot結(jié)果3.1.1應(yīng)用Western blot檢測(cè)CUL4B蛋白的表達(dá):檢測(cè)CUL4B蛋白在胃組織中的表達(dá),胃癌組織為(0.734±0.150),癌旁正常組織為(0.374±0.052),胃癌組織CUL4B蛋白的表達(dá)量明顯高于癌旁正常組織,差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);3.1.2 CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期:I期為(0.577±0.035)、II期為(0.642±0.025)、III期+Ⅳ期為(0.860±0.099),I期與II期之間比較的P值為0.061,兩者間表達(dá)量的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.000,兩者間表達(dá)量的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.002,兩者間表達(dá)量的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);3.1.3 CUL4B蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素:分化程度:高+中分化組中CUL4B蛋白為(0.614±0.070)低于低分化組的(0.820±0.131),兩組間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);腫瘤浸潤(rùn)深度(T分期):(T1+T2)組CUL4B蛋白為(0.609±0.045)低于(T3+T4)組(0.860±0.099),組間CUL4B蛋白表達(dá)量差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;3.2.1應(yīng)用Western blot檢測(cè)P16蛋白在胃組織中的表達(dá):胃癌組織為(0.553±0.096),癌旁正常組織為(0.894±0.187),胃癌組織P16蛋白的表達(dá)量明顯低于癌旁正常組織,兩組間P16蛋白的表達(dá)量的差別具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);3.2.2 P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床分期:I期為(0.643±0.042)、II期為(0.601±0.069)、III期+Ⅳ期為(0.484±0.075),I期與II期之間比較的P值為0.411,兩者間表達(dá)量的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);I期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.012,兩者間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);II期與III期+Ⅳ期之間比較的P值為0.059,兩者間表達(dá)量的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3.2.3 P16蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理因素:分化程度:高+中分化組中P16蛋白為(0.629±0.054)高于低分化組的(0.498±0.082),兩組間表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);腫瘤浸潤(rùn)深度(T分期):(T1+T2)組P16蛋白表達(dá)為(0.621±0.056)高于(T3+T4)組的(0.484±0.075),兩組間P16蛋白表達(dá)量差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而患者的性別、年齡、組織病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移間的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;3.3胃癌組織中CUL4B蛋白和p16蛋白表達(dá)量的相關(guān)性:應(yīng)用直線回歸的統(tǒng)計(jì)方法分析應(yīng)用Western blot檢測(cè)的CUL4B蛋白及P16蛋白在胃癌組織中表達(dá)量間的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平間也呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.667,P0.05)。結(jié)論:1 CUL4B蛋白在胃癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織,與胃癌的臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度呈正相關(guān),提示其參與了胃癌的惡性轉(zhuǎn)化過程,CUL4B在胃癌細(xì)胞中高表達(dá),說明其可作為腫瘤標(biāo)記物,為用于胃癌的診斷及病情評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。2 P16蛋白在胃癌中呈低表達(dá),與胃癌的臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度呈負(fù)相關(guān),提示P16作為抑癌基因在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起抑制作用。3 CUL4B和P16兩者在胃癌表達(dá)中呈負(fù)相關(guān)。
[Abstract]:Objective: To investigate the expression and significance of Cullin4B and P16 in gastric carcinoma. Methods: randomly selected in January 2016 December ~2016 of 25 gastric cancer patients with gastric cancer resection patients in the second hospital of Hebei Medical University, the gastric cancer as the experimental group, the corresponding adjacent normal tissues as control group. HE staining was used to determine gastric cancer the type and degree of differentiation; chemical method and Western blot immunohistochemistry (Western blot) and the level of expression in normal tissues to detect CUL4B protein and P16 protein in gastric cancer tissue and paracancerous. Differences between expression analysis both in gastric cancer tissues and adjacent normal tissues and its clinical and clinical staging of gastric cancer pathological factors linked. Results: 1 cases of HE staining, gastric carcinoma tissues and adjacent normal tissues were observed under microscope, the type of gastric cancer: 19 cases of adenocarcinoma, sticky 2 cases of liquid adenocarcinoma, 3 cases of signet ring cell carcinoma, 1 cases of neuroendocrine carcinoma; differentiation: 3 cases of high differentiation, 9 cases of moderately differentiated, poorly differentiated 13 cases; more than clinical data such as gender, age, clinical stage and clinical pathological factors (see Table1) expression of.2 in gastric tissues by immunohistochemistry results 2.1.1 CUL4B protein in gastric cancer and normal tissues: according to the results of immunohistochemistry showed that CUL4B mainly localized in the nucleus, the nucleus appeared clear yellow, yellow brown to dark brown color as a positive standard. CUL4B in gastric tissue was mostly positive or strong positive, the optical density (OD) value for (0.180 + 0.019), adjacent normal tissues are mostly negative, weak positive or positive expression, the OD value of (0.128 + 0.012), the OD value of gastric cancer was significantly higher than that in normal tissues, there was a statistically significant difference (P0.01); 2.1.2 CUL4B protein in gastric carcinoma and clinical staging: CUL 4B铔嬬櫧鍦ㄨ儍鐧岀粍緇囦腑澶у鍛堥槼鎬ф垨寮洪槼鎬ц〃杈，

本文編號(hào)：1548223