本文關(guān)鍵詞：TRPA1表達(dá)在炎癥后內(nèi)臟高敏感產(chǎn)生和維持機(jī)制中的作用研究　出處：《山東大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： TRPA1 炎癥后內(nèi)臟痛覺高敏感性 脊髓背角 膠狀質(zhì)

【摘要】：背景內(nèi)臟高敏感性指的是內(nèi)臟器官對來自外周的各類傷害性刺激和正常生理性刺激的感覺閾值降低、感受性加強(qiáng)的現(xiàn)象,被認(rèn)為是腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者慢性內(nèi)臟痛反復(fù)發(fā)作的重要的病理生理學(xué)機(jī)制。其中,臨床上約10-31%的IBS患者屬于感染后腸易激綜合征(post infectious irritable bowel syndrome,PI-IBS),它的定義為患者既往有急性胃腸道感染史,在病原體已經(jīng)被清除并且黏膜炎癥已經(jīng)消退后出現(xiàn)腹痛、腹脹、排便習(xí)慣和(或)大便性狀改變等IBS樣臨床表現(xiàn)。因?yàn)椴⑽礄z測到顯著的病理組織學(xué)和生化指標(biāo)的異常,致使研究進(jìn)展緩慢,內(nèi)臟高敏感的產(chǎn)生和維持機(jī)制至今不明。瞬時(shí)感受器電位離子通道蛋白(Transient receptor potential ion channel protein,TRP)家族是一類非選擇性鈣離子通道蛋白,存在于細(xì)胞膜或胞內(nèi)細(xì)胞器膜上,包括多個(gè)家族成員,能感知并參與溫度、機(jī)械性和化學(xué)性刺激誘導(dǎo)的痛覺的產(chǎn)生。已有研究表明,TRP家族的瞬時(shí)感受器電位香草酸受體-1(TRP vanilloid-1,TRPV1)可廣泛參與結(jié)直腸刺激誘導(dǎo)的內(nèi)臟痛覺高敏感的發(fā)生。瞬時(shí)感受器電位錨蛋白-1(TRP ankyrin-1,TRPA1)是TRP受體超家族中的另一成員,由于被證實(shí)與TRPV1在感覺神經(jīng)元上共同表達(dá),近年來逐漸成為研究的熱點(diǎn)。TRPA1受體主要是分布于能夠感知傷害性刺激的小直徑感覺神經(jīng)元上,不僅可以被有害的低溫刺激(17℃)激活,同時(shí)也能被多種外源性或內(nèi)源性物質(zhì)產(chǎn)生的化學(xué)刺激如薄荷醇、四氫大麻酚、異硫氰酸丙烯酯(AITC)、肉桂醛等激活。盡管先前的研究發(fā)現(xiàn)TRPA1受體也參與內(nèi)臟痛覺高敏感性的調(diào)控,但僅涉及周圍神經(jīng)系統(tǒng)層面。本研究通過選用 2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-Trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)灌腸誘導(dǎo)的大鼠炎癥后內(nèi)臟高敏感模型,同時(shí)從周圍神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)兩個(gè)層面共同探討TRPA1受體在持續(xù)性炎癥后內(nèi)臟痛覺高敏感產(chǎn)生和維持中的作用,以便為IBS患者內(nèi)臟高敏感從對癥治療走向以機(jī)制為基礎(chǔ)的治療提供一定的指導(dǎo)依據(jù)。目的1、應(yīng)用Western Blot和免疫組織化學(xué)染色法檢測兩組大鼠的結(jié)腸組織中TRPA1的表達(dá)情況。2、應(yīng)用Western Blot和免疫組織化學(xué)染色法檢測兩組大鼠的脊髓,特別是脊髓背角(spinal dorsal hom,SDH)中TRPA1的表達(dá)情況。3、明確TRPA1表達(dá)在持續(xù)性炎癥后內(nèi)臟痛覺高敏感產(chǎn)生和維持機(jī)制中的作用。方法24只健康雌性Wistar大鼠(180-200g)被隨機(jī)分為2組,每組12只,分別給予同等量的TNBS(TNBS處理組)或生理鹽水(正常對照組)進(jìn)行灌腸處理。6周后,對兩組大鼠進(jìn)行結(jié)直腸球囊擴(kuò)張實(shí)驗(yàn),采用腹壁回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)評分對內(nèi)臟敏感性進(jìn)行評估。然后將大鼠處死,快速獲取兩組大鼠的結(jié)腸組織和脊髓組織,用蘇木精-伊紅(Hematoxylin and eosin,HE)對結(jié)腸組織進(jìn)行染色后,光學(xué)顯微鏡下評估大鼠結(jié)腸組織的炎癥情況;用Wester Blot技術(shù)檢測TRPA1蛋白的表達(dá)水平;用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測TRPA1免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的數(shù)目并分析平均積分光密度值(integrated optical density values,IOD)。結(jié)果1、在給予相同的結(jié)直腸球囊擴(kuò)張壓力(15mmHg,30mmHg,45mmHg)時(shí),TNBS處理組大鼠比正常對照組大鼠表現(xiàn)出更明顯的腹壁行為學(xué)反應(yīng)和更高的AWR評分。2、在光學(xué)顯微鏡下觀察經(jīng)過HE染色處理后的結(jié)腸組織切片得到的結(jié)果顯示:在灌腸處理6周后,TNBS處理組和正常對照組大鼠結(jié)腸均無明顯炎癥表現(xiàn)。3、Western Blot蛋白條帶密度分析結(jié)果顯示:TNBS處理組大鼠結(jié)腸和脊髓中TRPA1的蛋白含量均顯著高于正常對照組大鼠。4、免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:TNBS處理組大鼠的脊髓背角中TRPA1免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的數(shù)量和平均IOD均顯著高于正常對照組,而且這些增多的TRPA1免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元主要集中分布于脊髓背角的淺層,特別是在膠狀質(zhì)層(即脊髓背角Ⅱ?qū)?。結(jié)論1、TNBS處理組大鼠結(jié)腸的組織中TRPA1的蛋白含量明顯增高。2、TNBS處理組大鼠脊髓(特別是脊髓背角)中TRPA1的蛋白含量明顯增高。3、TNBS處理組大鼠結(jié)腸組織與脊髓(特別是脊髓背角)TRPA1痛覺受體表達(dá)上調(diào)在炎癥后內(nèi)臟痛覺高敏感產(chǎn)生和維持的機(jī)制中發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R574.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡萍萍;呂賓;范一宏;;內(nèi)臟高敏感大鼠腦部5-羥色胺表達(dá)差異的研究[J];中華消化雜志;2006年05期

2 董明;郭欣欣;吳煥淦;趙天平;劉慧榮;;內(nèi)臟高敏感發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2012年01期

3 郭杰芳,屠振興,鄒曉平;非糜爛性胃食管反流病內(nèi)臟高敏感機(jī)制研究[J];臨床消化病雜志;2004年06期

4 焦黛妍;孫建華;;腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在腸道高敏感中的研究進(jìn)展[J];胃腸病學(xué);2014年02期

5 趙宏宇;陳飛雪;曹靜;戚慶慶;李月月;左秀麗;李延青;;腦組織海馬區(qū)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在焦慮調(diào)節(jié)內(nèi)臟高敏感中的作用[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年03期

6 鄒多武;許國銘;;內(nèi)臟高敏感在功能性胃腸病中的作用[J];胃腸病學(xué);2006年08期

7 袁莉莉;余躍;蔣楠;陳鳳琴;王巧民;王烈成;;內(nèi)臟高敏感模型大鼠結(jié)腸特異背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)和興奮性研究[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年11期

8 石偉,李茂軍,葉長寧,陳昌輝;高敏感C反應(yīng)蛋白、前白蛋白測定在新生兒感染性疾病中的應(yīng)用[J];四川醫(yī)學(xué);2005年09期

9 周小平;李學(xué)良;;腸易激綜合征內(nèi)臟高敏感的研究進(jìn)展[J];胃腸病學(xué);2014年02期

10 魏磊;高峻;許國銘;;內(nèi)臟高敏感治療藥物研發(fā)進(jìn)展[J];中國新藥雜志;2010年19期

相關(guān)會議論文 前10條

1 印媛君;呂賓;楊午鳴;丁瑞峰;柯慶;;內(nèi)臟高敏感大鼠結(jié)腸電及運(yùn)動(dòng)的研究[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第十八次全國消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議暨2006年全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

2 李蒙;呂賓;扥莉;;樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)肥大細(xì)胞活化促進(jìn)大鼠內(nèi)臟高敏感形成[A];第二十五屆全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

3 楊小軍;錢偉;沈蕾;侯曉華;官陽;;突觸可塑性在急性束縛應(yīng)激所致內(nèi)臟高敏感中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（上冊）[C];2007年

4 郭峗;呂賓;丁鶯;張璐;顧偉忠;;CRF-R在內(nèi)臟高敏感大鼠腦腸軸的表達(dá)[A];第二屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

5 郭峗;呂賓;丁鶯;張璐;顧偉忠;;CRF受體在內(nèi)臟高敏感大鼠腦腸軸的表達(dá)[A];第二屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

6 李蒙;扥莉;;內(nèi)臟高敏感大鼠腸道樹突狀細(xì)胞高表達(dá)蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3[A];第二十五屆全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

7 李蒙;，

本文編號：1327381