本文關(guān)鍵詞：金匱腎氣丸加味干預(yù)腺嘌呤所致大鼠腎陽虛模型的藥效學(xué)及作用機(jī)理研究　出處：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：《黃帝內(nèi)經(jīng)》陰陽理論在眾多的陰陽相互關(guān)系的基礎(chǔ)上強(qiáng)調(diào)以陽氣為主導(dǎo),認(rèn)為陽氣虛是導(dǎo)致人體疾病發(fā)生的重要原因。臨床陽虛體質(zhì)與眾多疾病的發(fā)生密切相關(guān),而腎陽是人體陽氣之根,腎陽虛則全身陽氣皆虛,因此,溫補(bǔ)腎陽,可以起到很好的改善陽虛體質(zhì)、預(yù)防疾病發(fā)生的作用。由于陽虛體質(zhì)改善過程緩慢,我們需要探究一種有效、安全糾正陽虛體質(zhì)的方法。金匱腎氣丸是治療腎陽虛的經(jīng)典方劑,本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)金匱腎氣丸加味湯方和膏方兩種劑型對(duì)腎陽虛大鼠的藥效學(xué)進(jìn)行對(duì)比,并研究其作用機(jī)理,以期為陽虛體質(zhì)的改善提供一種有效方藥。1研究目的針對(duì)分布廣泛的陽虛質(zhì)(陽虛證),通過金匱腎氣丸加味膏方和湯方干預(yù)以灌服腺嘌呤所復(fù)制的腎陽虛證大鼠模型,觀察金匱腎氣丸加味方對(duì)腎陽虛大鼠的藥效作用,并研究其藥理機(jī)制。2研究方法選用清潔級(jí)SD雄性大鼠40只,以腺嘌呤按200mg/kg劑量灌胃四周復(fù)制腎陽虛大鼠模型,造模成功后分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、金匱腎氣丸加味膏方干預(yù)組(簡(jiǎn)稱膏方組)和金匱腎氣丸加味湯方干預(yù)組(簡(jiǎn)稱湯方組)。膏方組,給予膏方(開水沖溶,冷卻至適宜溫度)以18.36 g/(kg · d)灌胃;湯方組,給予湯藥以18.36g/(kg · d)灌胃;陽虛模型對(duì)照組,給予10mL/(kg ·d)蒸餾水灌胃;正常對(duì)照組,常規(guī)飼養(yǎng)。干預(yù)時(shí)間持續(xù)六周。觀察大鼠外觀行為、測(cè)量體重和尿量,于第六周末取材,檢測(cè)大鼠性激素如血清睪酮(T)、雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、絨毛膜促性腺激素(HCG),腎上腺激素如促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(CRE)、17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OH-CS),甲狀腺激素如三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)等激素指標(biāo),測(cè)定精子質(zhì)量,腎臟做HE、Masson染色及電鏡切片,觀察腎臟的病理變化,并評(píng)價(jià)金匱腎氣丸加味膏方與湯方的療效。3結(jié)果3.1 一般狀況模型組呈現(xiàn)出腎陽虛癥狀,如體重下降、反應(yīng)遲鈍、活動(dòng)能力下降、弓背蜷縮、畏寒、體毛稀疏失去光澤等表現(xiàn),經(jīng)膏方和湯方干預(yù)后均明顯改善,可見活動(dòng)增多、弓背蜷縮現(xiàn)象消失、體毛逐漸恢復(fù)光澤等表現(xiàn)。3.2腎臟形態(tài)學(xué)3.2.1光鏡觀察模型組大鼠出現(xiàn)如下改變:(1)腎小球病變:腎小球數(shù)目減少,腎小球萎縮,腎小囊腔擴(kuò)大,腎小球毛細(xì)血管呈分葉狀并萎縮,球外系膜細(xì)胞增多。(2)腎小管病變:腎小管數(shù)目減少,可見2,8—二羥基腺嘌呤結(jié)晶沉積,有結(jié)晶沉積的腎小管管腔擴(kuò)大,上皮變薄,腔內(nèi)可見少許脫落的上皮。(3)腎間質(zhì)病變:腎間質(zhì)中纖維組織增生明顯,可見異物肉芽腫及纖維化病灶形成,腎組織出現(xiàn)嚴(yán)重纖維化。膏方組及湯方組光鏡觀明顯改善,可見:(1)腎小球:腎小球稍微減少,腎小球輕度萎縮,腎小囊腔基本正常,腎小球毛細(xì)血管未見萎縮。(2)腎小管:腎小管數(shù)目基本正常,腎小管內(nèi)未見有明顯的結(jié)晶物。(3)腎間質(zhì):腎間質(zhì)中輕微的纖維組織增生。3.2.2電鏡觀察與正常組相比,模型組出現(xiàn)如下改變:(1)腎小球:內(nèi)皮細(xì)胞壞死,管腔塌陷,足突融合和微絨毛化,基膜增厚,毛細(xì)血管攀塌陷。(2)腎小管:近曲小管微絨毛稀疏、紊亂,可見部分上皮細(xì)胞微小空泡變性,并見線粒體空泡變性壞死,上皮細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)、近曲小管管腔中可見白色結(jié)晶物。膏方組及湯方組電鏡觀得到明顯改善。膏方組可見:腎小球中的足突部分融合,部分足突相互穿插鑲嵌成柵欄狀,緊貼于毛細(xì)血管基膜外,基膜輕度增厚,腎小管中的微絨毛密度基本正常,近曲小管中可見少量白色結(jié)晶物。湯方組:腎小球的少部分足突恢復(fù)柵欄狀結(jié)構(gòu),大多數(shù)足突融合,基膜增厚,近曲小管的微絨毛仍比較稀疏,近曲小管管腔中可見白色結(jié)晶物。3.3下丘腦—垂體—靶向軸3.3.1下丘腦—垂體—性腺軸與正常組相比,模型組LH含量顯著下降(p0.05),經(jīng)干預(yù)后,膏方組與湯方組LH顯著升高(p0.05),與湯方組相比,膏方組LH均值更高。與正常組相比,模型組E2含量顯著下降(p0.05)。經(jīng)干預(yù)后,湯方組E2較模型組顯著升高(p0.05),膏方組含量亦有升高的趨勢(shì),但無顯著性差異。與模型組相比,膏方組和湯方組T含量顯著升高(p0.05)。與正常組相比,模型組17-OH-CS含量顯著升高(p0.05)。經(jīng)藥物干預(yù)后,湯方組較模型組含量顯著下降(p0.05),膏方組有下降的趨勢(shì),但無顯著性差異。3.3.1下丘腦—垂體—甲狀腺軸與正常組相比,模型組T4含量顯著下降(P0.05)。與模型組相比,膏方組含量顯著升高(P0.05),湯方組亦有升高的趨勢(shì),但無顯著性差異。3.4精子質(zhì)量模型組精子活動(dòng)率較正常組顯著下降(p0.05),膏方組較模型組顯著升高(p0.05)。與正常組相比,模型組向前運(yùn)動(dòng)的A級(jí)精子百分率顯著下降(p0.05),經(jīng)膏方干預(yù)后顯著升高(p0.05),湯方組亦有升高的趨勢(shì),但無顯著性差異。4結(jié)論1金匱腎氣丸加味湯方、膏方均能明顯改善腎陽虛大鼠的整體生命體征,包括其弓背蜷縮、體毛稀疏、活動(dòng)減少等典型腎陽虛表現(xiàn),改善腺嘌呤所導(dǎo)致的大鼠腎臟的形態(tài)學(xué)病理損傷,提高下丘腦—垂體—性腺軸和下丘腦—垂體—甲狀腺軸的功能狀態(tài),因此金匱腎氣丸加味能夠?qū)ο汆堰仕鶑?fù)制出的腎陽虛證有顯著改善作用。2比較而言,金匱腎氣丸加味膏方對(duì)大鼠腎陽虛模型的LH、T4提升作用、對(duì)精子活力的改善等,均較湯方效果更好;而湯方提高E2含量的作用,優(yōu)于膏方。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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