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艾灸對膠原誘導性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-17和TNF-α含量的影響

發(fā)布時間:2017-12-21 03:18

  本文關(guān)鍵詞:艾灸對膠原誘導性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-17和TNF-α含量的影響 出處:《北京中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:類風濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種病因不明的慢性自身免疫性疾病。該病呈進行性發(fā)展,以反復發(fā)作對稱性關(guān)節(jié)滑膜炎為特征。早期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫熱痛和不同程度的功能障礙,晚期可出現(xiàn)骨骼肌萎縮,關(guān)節(jié)僵硬變形,嚴重影響患者生活。RA的發(fā)病機制仍不清楚,目前認為遺傳易感性、免疫紊亂和環(huán)境因素與RA的發(fā)病十分密切。其中Th17細胞與Treg細胞的平衡成為近年來研究的熱點。Th17細胞和Treg細胞分別起著促炎和抑炎的作用,二者在分化和功能上相互拮抗,在生理狀態(tài)下保持著動態(tài)平衡,對機體的免疫反應發(fā)揮著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn),Th17/Treg細胞間的失衡,會導致RA滑膜炎癥、關(guān)節(jié)軟骨及骨的破壞。白細胞介素17(IL-17)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)是Th17/Treg平衡上兩個重要的細胞因子,二者具有協(xié)同促進的作用。目前,西藥治療RA周期較長,不良反應較大,艾灸作為中醫(yī)傳統(tǒng)外治法,具有溫經(jīng)散寒、疏經(jīng)通絡、防病保健,無毒副作用等特點,且已在臨床上取得了良好的療效。本實驗通過把膠原誘導性關(guān)節(jié)炎模型大鼠作為研究對象,在造模后對大鼠進行艾灸干預。觀察和測量艾灸后大鼠體質(zhì)量、左踝關(guān)節(jié)直徑、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、左足跗部影像學X光片,左踝關(guān)節(jié)組織形態(tài)學及其血清IL-17和TNF-α的含量,探討艾灸在類風濕性關(guān)節(jié)炎病中的作用。[目的]本實驗以Th17/Treg平衡為切入點,以艾灸為干預手段,以IL-17和TNF-α為主要觀察指標,從分子水平探討艾灸對RA的作用機制,為深入研究艾灸調(diào)整免疫功能提供實驗數(shù)據(jù)。[方法]將40只雄性Wistar大鼠隨機抽取8只作為空白組,剩余32只造模。初次免疫乳劑采用雞Ⅱ型膠原與費氏完全佐劑制備,以0.3 mL/只初次免疫乳劑(含0.3 mg膠原)等量皮下注射于大鼠左足底部、尾根上和背部。7 d后,由雞Ⅱ型膠原和費氏不完全佐劑乳化制備繼發(fā)免疫的乳劑,同法以0.3 mL/只繼發(fā)免疫乳劑(含0.3 mg膠原)等量皮下注射于大鼠左足底部、尾根上和背部。共造模21 d。造模后,對大鼠進行關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分,評分大于8分為造模成功。將造模成功的24只大鼠隨機分為模型組、藥物組和艾灸組,每組8只。艾灸組用小艾條距"足三里"和"昆侖"穴10mm處懸灸,每穴20min,共40min,1次/d,左右交替進行,連續(xù)干預10d。藥物組用0.1mg/100g甲氨蝶呤灌胃,1次/5d,共兩次。于造模前后及干預后,觀察和測量各組大鼠體質(zhì)量、左踝關(guān)節(jié)直徑、關(guān)節(jié)炎指數(shù);于干預后觀察大鼠左足跗部影像學X光片及左踝關(guān)節(jié)病理學切片。ELISA法檢測RA大鼠血清中IL-17和TNF-α含量。[結(jié)果](1)與空白組相比:造模后,大鼠出現(xiàn)足跗部紅腫,難以負重而跛行,行動困難,食量減少,毛色變黃無光澤;體質(zhì)量增長減緩(P0.05);踝關(guān)節(jié)直徑增大(P0.05)。干預后,模型組、藥物組和艾灸組大鼠體質(zhì)量增長減緩(P0.05);模型組大鼠踝關(guān)節(jié)直徑增大(P0.05),藥物組和艾灸組與空白組大鼠踝關(guān)節(jié)直徑相比無顯著性差異(P0.05);模型組大鼠X線下可見足跗部周圍軟組織腫脹,關(guān)節(jié)間隙變窄和局部骨質(zhì)破壞;左踝關(guān)節(jié)病理學切片可見關(guān)節(jié)間隙變窄,滑膜炎性細胞的浸潤增生;血清中IL-17 和 TNF-α含量升高(P0.05)。(2)與模型組相比:干預后,藥物組和艾灸組大鼠足爪紅腫減輕,活動增加,食量增大;體質(zhì)量升高(P0.05);踝直徑下降(P0.05);關(guān)節(jié)炎指數(shù)降低(P0.05);X線下足跗部軟組織腫脹減輕,骨骼畸形好轉(zhuǎn);左踝關(guān)節(jié)病理學切片中滑膜炎性細胞浸潤減少,軟骨表面較光滑平整;血清IL-17和TNF-α含量下降(P0.05)。(3)與藥物組相比:艾灸組與藥物組差異不明顯,各指標間差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。[結(jié)論](1)本實驗研究結(jié)果顯示,艾灸"足三里"和"昆侖"可提高RA大鼠體質(zhì)量,減輕RA大鼠軟組織腫脹,降低踝關(guān)節(jié)直徑,降低關(guān)節(jié)炎指數(shù),減輕炎性細胞浸潤,減輕骨骼畸形,緩解骨質(zhì)破壞,發(fā)揮了類似甲氨蝶呤的作用。(2)艾灸"足三里"和"昆侖"可使RA大鼠血清中IL-17和TNF-α含量降低,從而阻斷了炎癥反應的重要環(huán)節(jié),促進了 Th17/Treg細胞平衡。這可能是艾灸治療RA潛在作用機制之一。
【學位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R245

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本文編號:1314479

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