艾灸對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-17和TNF-α含量的影響
本文關(guān)鍵詞:艾灸對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-17和TNF-α含量的影響 出處:《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種病因不明的慢性自身免疫性疾病。該病呈進(jìn)行性發(fā)展,以反復(fù)發(fā)作對(duì)稱性關(guān)節(jié)滑膜炎為特征。早期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫熱痛和不同程度的功能障礙,晚期可出現(xiàn)骨骼肌萎縮,關(guān)節(jié)僵硬變形,嚴(yán)重影響患者生活。RA的發(fā)病機(jī)制仍不清楚,目前認(rèn)為遺傳易感性、免疫紊亂和環(huán)境因素與RA的發(fā)病十分密切。其中Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞的平衡成為近年來研究的熱點(diǎn)。Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞分別起著促炎和抑炎的作用,二者在分化和功能上相互拮抗,在生理狀態(tài)下保持著動(dòng)態(tài)平衡,對(duì)機(jī)體的免疫反應(yīng)發(fā)揮著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn),Th17/Treg細(xì)胞間的失衡,會(huì)導(dǎo)致RA滑膜炎癥、關(guān)節(jié)軟骨及骨的破壞。白細(xì)胞介素17(IL-17)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)是Th17/Treg平衡上兩個(gè)重要的細(xì)胞因子,二者具有協(xié)同促進(jìn)的作用。目前,西藥治療RA周期較長(zhǎng),不良反應(yīng)較大,艾灸作為中醫(yī)傳統(tǒng)外治法,具有溫經(jīng)散寒、疏經(jīng)通絡(luò)、防病保健,無(wú)毒副作用等特點(diǎn),且已在臨床上取得了良好的療效。本實(shí)驗(yàn)通過把膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠作為研究對(duì)象,在造模后對(duì)大鼠進(jìn)行艾灸干預(yù)。觀察和測(cè)量艾灸后大鼠體質(zhì)量、左踝關(guān)節(jié)直徑、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、左足跗部影像學(xué)X光片,左踝關(guān)節(jié)組織形態(tài)學(xué)及其血清IL-17和TNF-α的含量,探討艾灸在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病中的作用。[目的]本實(shí)驗(yàn)以Th17/Treg平衡為切入點(diǎn),以艾灸為干預(yù)手段,以IL-17和TNF-α為主要觀察指標(biāo),從分子水平探討艾灸對(duì)RA的作用機(jī)制,為深入研究艾灸調(diào)整免疫功能提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。[方法]將40只雄性Wistar大鼠隨機(jī)抽取8只作為空白組,剩余32只造模。初次免疫乳劑采用雞Ⅱ型膠原與費(fèi)氏完全佐劑制備,以0.3 mL/只初次免疫乳劑(含0.3 mg膠原)等量皮下注射于大鼠左足底部、尾根上和背部。7 d后,由雞Ⅱ型膠原和費(fèi)氏不完全佐劑乳化制備繼發(fā)免疫的乳劑,同法以0.3 mL/只繼發(fā)免疫乳劑(含0.3 mg膠原)等量皮下注射于大鼠左足底部、尾根上和背部。共造模21 d。造模后,對(duì)大鼠進(jìn)行關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分,評(píng)分大于8分為造模成功。將造模成功的24只大鼠隨機(jī)分為模型組、藥物組和艾灸組,每組8只。艾灸組用小艾條距"足三里"和"昆侖"穴10mm處懸灸,每穴20min,共40min,1次/d,左右交替進(jìn)行,連續(xù)干預(yù)10d。藥物組用0.1mg/100g甲氨蝶呤灌胃,1次/5d,共兩次。于造模前后及干預(yù)后,觀察和測(cè)量各組大鼠體質(zhì)量、左踝關(guān)節(jié)直徑、關(guān)節(jié)炎指數(shù);于干預(yù)后觀察大鼠左足跗部影像學(xué)X光片及左踝關(guān)節(jié)病理學(xué)切片。ELISA法檢測(cè)RA大鼠血清中IL-17和TNF-α含量。[結(jié)果](1)與空白組相比:造模后,大鼠出現(xiàn)足跗部紅腫,難以負(fù)重而跛行,行動(dòng)困難,食量減少,毛色變黃無(wú)光澤;體質(zhì)量增長(zhǎng)減緩(P0.05);踝關(guān)節(jié)直徑增大(P0.05)。干預(yù)后,模型組、藥物組和艾灸組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)減緩(P0.05);模型組大鼠踝關(guān)節(jié)直徑增大(P0.05),藥物組和艾灸組與空白組大鼠踝關(guān)節(jié)直徑相比無(wú)顯著性差異(P0.05);模型組大鼠X線下可見足跗部周圍軟組織腫脹,關(guān)節(jié)間隙變窄和局部骨質(zhì)破壞;左踝關(guān)節(jié)病理學(xué)切片可見關(guān)節(jié)間隙變窄,滑膜炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)增生;血清中IL-17 和 TNF-α含量升高(P0.05)。(2)與模型組相比:干預(yù)后,藥物組和艾灸組大鼠足爪紅腫減輕,活動(dòng)增加,食量增大;體質(zhì)量升高(P0.05);踝直徑下降(P0.05);關(guān)節(jié)炎指數(shù)降低(P0.05);X線下足跗部軟組織腫脹減輕,骨骼畸形好轉(zhuǎn);左踝關(guān)節(jié)病理學(xué)切片中滑膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少,軟骨表面較光滑平整;血清IL-17和TNF-α含量下降(P0.05)。(3)與藥物組相比:艾灸組與藥物組差異不明顯,各指標(biāo)間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論](1)本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,艾灸"足三里"和"昆侖"可提高RA大鼠體質(zhì)量,減輕RA大鼠軟組織腫脹,降低踝關(guān)節(jié)直徑,降低關(guān)節(jié)炎指數(shù),減輕炎性細(xì)胞浸潤(rùn),減輕骨骼畸形,緩解骨質(zhì)破壞,發(fā)揮了類似甲氨蝶呤的作用。(2)艾灸"足三里"和"昆侖"可使RA大鼠血清中IL-17和TNF-α含量降低,從而阻斷了炎癥反應(yīng)的重要環(huán)節(jié),促進(jìn)了 Th17/Treg細(xì)胞平衡。這可能是艾灸治療RA潛在作用機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R245
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1 程嵐;北京地區(qū)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病與氣象要素的相關(guān)性研究[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2010年
,本文編號(hào):1314479
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