發(fā)布時間：2017-12-20 14:29

  本文關(guān)鍵詞：石榴皮安石榴苷的制備及其亞急性毒性實驗和肝毒性機制的初步研究　出處：《新疆醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 石榴皮 安石榴苷 膽汁淤積 肝毒性

【摘要】：目的:1.考察石榴皮多酚提取物亞急性毒性,初步評價其安全性,為長期毒性實驗的劑量設(shè)計提供依據(jù)。2.通過HPLC指紋圖譜方法,對喀什和田兩地不同批次的石榴皮藥材進(jìn)行相似度分析。3.通過純化工藝制備石榴皮安石榴苷精制物。4.石榴皮安石榴苷精制物對LDLr-/-小鼠給藥三個月的毒性考察。5.初步探討石榴皮安石榴苷精制物致膽汁淤積型肝毒性的機制。方法:1.石榴皮多酚提取物給藥30 d,記錄各組小鼠的一般活動情況、監(jiān)測體重、食物消耗量及毒性反應(yīng),給藥末期禁食24 h剖殺2/3的小鼠,剩余小鼠恢復(fù)觀察2 W后剖殺。檢測給藥期和恢復(fù)期小鼠的血液學(xué)指標(biāo)及生化指標(biāo),HE染色觀察肝臟形態(tài)學(xué)變化。2.對HPLC指紋圖譜方法的精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性進(jìn)行考察,對喀什和田兩地不同批次的石榴皮藥材進(jìn)行相似度分析。3.篩選喀什和田兩地的石榴皮藥材,進(jìn)行安石榴苷的制備并通過HPLC檢測安石榴苷含量。4.石榴皮安石榴苷精制物對LDLr-/-小鼠3個月毒性實驗,監(jiān)測體重,解剖時對臟器外觀大體觀察,檢測生化指標(biāo),病理組織學(xué)檢查。5.QRT-PCR法探討膽汁轉(zhuǎn)運受體的MRP-3、BESP、MRP-2、CYP7A1、PPARα五項經(jīng)典的轉(zhuǎn)運通路mRNA表達(dá)量。結(jié)果:1.亞急性毒性試驗期間,各組小鼠生長活動正常。給藥期結(jié)束時,各劑量組小鼠體重增重、食物利用率與空白對照組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);血液學(xué)指標(biāo)及血生化指標(biāo)均無顯著特異性的差異。給藥末期各劑量組與空白對照組小鼠的肝臟系數(shù)比較有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),而恢復(fù)期觀察中只有中、高劑量組小鼠的肝臟系數(shù)與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在恢復(fù)期肝臟病理切片觀察中高劑量組小鼠肝臟有毒性表現(xiàn),即肝細(xì)胞點狀壞死伴炎癥細(xì)胞的反應(yīng),可見部分肝小葉中央靜脈輕度擴張并淤血,肝竇內(nèi)kuffer細(xì)胞明顯增生,匯管區(qū)可見炎癥細(xì)胞浸潤。2.石榴皮藥材指紋圖譜,方法學(xué)驗證結(jié)果表明石榴皮藥材HPLC指紋圖譜精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性均符合要求,12批石榴皮藥材相似度較高,不同石榴皮藥材在化學(xué)成分的組成上基本一樣。3.喀什石榴皮藥材所含安石榴苷成分略高于和田石榴皮,相同工藝用喀什石榴皮制備的安石榴苷含量均在80%以上。4.石榴皮安石榴苷精制物給藥3個月后,病理組織學(xué)檢查中HFD+PU=500mg/kg·d劑量組、HFD+PU=750mg/kg·d劑量組的小鼠肝臟顯示膽汁淤積型肝損傷。5.QRT-PCR實驗中BESP的mRNA表達(dá)量顯示下調(diào),MRP2的mRNA表達(dá)量顯示下調(diào),MRP3的mRNA表達(dá)量顯示上調(diào),CPY7A1的mRNA的表達(dá)量顯示下調(diào),PPARα的mRNA的表達(dá)量顯示上調(diào)。結(jié)論:石榴皮多酚提取物亞急性毒性實驗中高劑量下表現(xiàn)肝毒性�？κ埠吞飪傻馗髋蔚氖衿に幉南嗨啤？κ彩衿ぐ彩褴蘸烤�80%高于和田石榴皮藥材的安石榴苷含量。石榴皮安石榴苷干預(yù)LDLr-/-小鼠3個月,在肝臟病理切片中,高劑量組HFD+PU=500mg/kg·d組和HFD+PU=750mg/kg·d組表現(xiàn)出膽汁淤積型肝損傷。對石榴皮安石榴苷致膽汁淤積肝損傷機制探討中由于MRP3轉(zhuǎn)運底物與MRP2有著廣泛的同源性,所以認(rèn)為MRP3的高表達(dá)是對MRP2功能削弱的一種代償。提示需進(jìn)一步對基因芯片篩查所得的石榴皮多酚與肝毒性特異性相關(guān)基因的mRNA表達(dá)進(jìn)行觀察,也可采用Western blot檢測肝臟組織中相關(guān)蛋白的表達(dá),擬從基因水平和蛋白水平充分探討供試物致膽汁淤積型肝毒性的機制。
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284;R285.5

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張杰;崔艷娜;劉繡華;;安石榴苷的研究進(jìn)展[J];化學(xué)研究;2014年06期

2 張玉梅;王家曉;;石榴皮鞣花酸對4T1乳腺癌小鼠免疫功能的影響[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2014年15期

3 侯予紅;;新疆地區(qū)石榴研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年12期

4 紀(jì)白慧;楊笑笑;倪鑫炯;曹玉華;;毛細(xì)管電泳法測定石榴皮中鞣花酸與安石榴苷含量[J];分析測試學(xué)報;2013年03期

5 劉振平;陳祥貴;楊瀟;何宇新;楊文宇;彭海燕;李玉鋒;;RP-HPLC同時測定石榴皮提取物中的3種鞣質(zhì)成分[J];中國中藥雜志;2011年19期

6 陸雪瑩;李艷紅;阿吉艾克拜爾·艾薩;李曉波;;石榴皮化學(xué)組分體外活性篩選及抗腫瘤機理的初步研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2011年03期

7 鄧小莉;常景玲;吳羽晨;;石榴的營養(yǎng)與免疫功能[J];食品與藥品;2011年01期

8 胡和平;周華邦;周東勛;;膽汁形成與膽汁淤積性疾病發(fā)生的機制[J];中華肝臟病雜志;2008年08期

9 杜欣;葉盛英;;石榴葉和石榴皮藥理活性研究進(jìn)展[J];天津藥學(xué);2007年02期

10 尉小慧;孫秀梅;張兆旺;;麻杏石甘湯2種方法提取物的兔血清高效毛細(xì)管電泳圖譜比較研究[J];中國藥房;2006年20期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 丁楠;石榴皮多酚有效部位的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2012年

2 鄭玲玲;老鸛草中鞣質(zhì)類成分提取、純化及其胃內(nèi)漂浮片的制備[D];延邊大學(xué);2010年

，

本文編號：1312437