發(fā)布時(shí)間：2017-12-19 00:25

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)直腸癌細(xì)胞中核苷轉(zhuǎn)運(yùn)體CNT2轉(zhuǎn)錄抑制機(jī)理研究

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【摘要】：結(jié)直腸癌(colorectal cancer, CRC)是嚴(yán)重危害人類健康的常見(jiàn)消化道惡性腫瘤之一,在結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制中,表觀遺傳學(xué)的改變發(fā)揮了重要的作用。核苷轉(zhuǎn)運(yùn)體CNT2 (concentrative nucleoside transporter 2, CNT2/SLC28A2)是表達(dá)在腸上皮細(xì)胞頂膜側(cè)的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體,主要負(fù)責(zé)核苷類物質(zhì)及其類似物的轉(zhuǎn)運(yùn)。本研究通過(guò)對(duì)Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)以及結(jié)直腸癌患者的結(jié)直腸腫瘤組織及配對(duì)的正常組織進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)CNT2基因在CRC腫瘤組織中的表達(dá)顯著被抑制。轉(zhuǎn)錄水平的抑制是CNT2轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白表達(dá)丟失的重要原因之一。表觀遺傳修飾在基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮重要作用。DNA甲基化和組蛋白修飾是目前研究最為深入的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制。通過(guò)對(duì)CRC腫瘤組織和配對(duì)正常組織中CNT2基因啟動(dòng)子區(qū)進(jìn)行DNA甲基化分析和組蛋白修飾表征后發(fā)現(xiàn),腫瘤組織和配對(duì)正常組織中CNT2基因啟動(dòng)子區(qū)的DNA甲基化水平無(wú)顯著性差異,且腫瘤組織中與轉(zhuǎn)錄激活相關(guān)的組蛋白修飾H3K9Ac、H3K18Ac和H4Ac水平降低,與轉(zhuǎn)錄抑制相關(guān)的組蛋白修飾H3K9me3水平升高。我們以結(jié)直腸癌細(xì)胞為模型,進(jìn)一步揭示組蛋白修飾對(duì)CNT2基因轉(zhuǎn)錄的影響。研究發(fā)現(xiàn),組蛋白去乙�；敢种苿┣乓志谹(Trichostatin A, TSA)可以降低CNT2基因啟動(dòng)子區(qū)去乙�；�,并且能夠誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞中CNT2基因的轉(zhuǎn)錄,增強(qiáng)CRC細(xì)胞對(duì)CNT2轉(zhuǎn)運(yùn)體底物的攝取。為探究組蛋白修飾在CNT2基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的作用,我們考察了組蛋白去乙�；敢种苿⿲�(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞中CNT2基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白修飾的影響。染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,HCT15和HT29細(xì)胞經(jīng)TSA處理后,隨著CNT2基因啟動(dòng)子區(qū)去乙酰化水平的降低,該基因H3K18Ac和H4Ac水平升高,H3K9me3水平降低。之后我們?cè)诮M織和細(xì)胞水平考察了與組蛋白修飾相關(guān)的酶以及轉(zhuǎn)錄因子的變化,采用Knock-down實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了我們的推測(cè)。綜合以上結(jié)果,我們推測(cè),啟動(dòng)子區(qū)組蛋白的修飾改變可能是結(jié)直腸癌中CNT2基因轉(zhuǎn)錄抑制的因素之一。鑒于CNT2轉(zhuǎn)運(yùn)體在核苷類抗腫瘤藥物的攝取中發(fā)揮重要作用,我們推測(cè)降低CRC細(xì)胞中組蛋白去乙�；秸T導(dǎo)CNT2的表達(dá),可能會(huì)增強(qiáng)CRC細(xì)胞對(duì)克拉屈濱的攝取,從而增強(qiáng)對(duì)CRC細(xì)胞的毒性。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,TSA或FK228與克拉屈濱合用可以協(xié)同增強(qiáng)化學(xué)藥物對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT15和HT29的抗腫瘤效應(yīng)。因此,本研究對(duì)于臨床上結(jié)直腸癌的聯(lián)合用藥治療具有積極的借鑒意義。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.34

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1 董超;劉迪;馮業(yè)童;劉朋飛;吳璇;吳昊昱;周余來(lái);;結(jié)直腸癌細(xì)胞外泌體的制備及其促單核細(xì)胞增殖作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年03期

2 張義平;鄭美蓉;殷嫦嫦;吳萍;周許峰;吳建芳;周小鷗;;熱休克誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞外泌體的免疫效應(yīng)[J];腫瘤防治研究;2011年07期

3 崔濱濱,劉明,趙鵬,趙家宏,董新舒;重組腺病毒介導(dǎo)的野生型p53基因?qū)Y(jié)直腸癌細(xì)胞的放射治療增敏作用[J];中華外科雜志;2005年15期

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5 楊曉東;邢春根;吳永友;趙奎;龔巍;陳博;何騰飛;;結(jié)直腸癌細(xì)胞輻射敏感性的定量比較蛋白組學(xué)研究[J];原子能科學(xué)技術(shù);2010年09期

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本文編號(hào)：1306215