發(fā)布時間：2017-12-14 14:19

  本文關(guān)鍵詞：Gpr177在小鼠腸上皮以及腸癌中的功能研究

  更多相關(guān)文章： Gpr177 Wnt信號通路 腸上皮 腸干細胞 腸癌

【摘要】：Wnt是一類分泌蛋白,它們在腸道穩(wěn)態(tài)的維持中起著重要作用。Gpr177,又稱為Wntless,它的多次跨膜結(jié)構(gòu)類似于經(jīng)典的G蛋白耦聯(lián)受體,對Wnt蛋白的正確轉(zhuǎn)運至關(guān)重要。目前關(guān)于Gpr177在腸道中生物學(xué)功能的研究較為缺乏,因此本課題擬對Gpr177在小鼠腸上皮以及腸癌中的功能進行探究。為了更好地研究Gpr177在腸道中的功能并同時解決Gpr177純合敲除胚胎致死的問題,我們構(gòu)建了Gpr177腸上皮特異性敲除小鼠模型進行研究。研究發(fā)現(xiàn)腸上皮Gpr177敲除后,小鼠腸組織的形態(tài)和結(jié)構(gòu)完整,腸干細胞的增殖與分化沒有發(fā)生明顯的改變。為了排除周圍間質(zhì)細胞的代償作用,我們進一步通過3D類器官體外培養(yǎng)的方法開展了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)腸上皮Gpr177缺失會導(dǎo)致小腸類器官無法正常生長,干細胞的自我更新能力喪失并且分化異常,這證明Gpr177對于離體培養(yǎng)小腸干細胞的穩(wěn)態(tài)維持具有重要作用。機制研究表明Gpr177腸上皮敲除的小腸類器官中Notch信號通路受到顯著抑制,從而導(dǎo)致杯狀細胞分化異常。另外,我們發(fā)現(xiàn)在類器官培養(yǎng)體系中加入WNT3a能夠一定程度上改善Gpr177腸上皮敲除小鼠小腸類器官的生長缺陷,這表明Gpr177通過改變WNT3a分泌參與小腸穩(wěn)態(tài)的調(diào)控。但有趣的是,Gpr177腸上皮敲除對結(jié)腸類器官的增殖和分化沒有影響,這提示小腸和結(jié)腸對Gpr177具有不同的依賴性。為了探究Gpr177在腸癌發(fā)生發(fā)展中的功能,我們又構(gòu)建了Apcfloxp/+自發(fā)性腸癌模型和炎癥誘發(fā)性腸癌模型進行研究。結(jié)果顯示與對照小鼠相比,Gpr177腸上皮敲除小鼠中腫瘤的大小和數(shù)目均沒有顯著性差異,說明腸上皮Gpr177在腸癌的發(fā)生發(fā)展中不發(fā)揮關(guān)鍵作用。綜上所述,本課題證明了在沒有間質(zhì)細胞的離體情況下,腸上皮Gpr177通過提高WNT3a的分泌在小腸穩(wěn)態(tài)維持中行使重要功能。但是其在體內(nèi)腸道穩(wěn)態(tài)維持和腸癌發(fā)生發(fā)展中并不發(fā)揮關(guān)鍵作用。因此,本研究拓展了Gpr177的已有認知并為腸癌的診治提供了一定的理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R735.3

【相似文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 范玲玲;Gpr177在小鼠腸上皮以及腸癌中的功能研究[D];華東師范大學(xué);2017年

，

本文編號：1288209