本文關(guān)鍵詞：Nrf2-ARE通路激活在姜黃素拮抗甲基汞神經(jīng)毒性中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 姜黃素 星形膠質(zhì)細(xì)胞 甲基汞 Nrf2-ARE通路 蛋白激酶C

【摘要】：背景和目的:汞是一種全球性的污染物,而甲基汞在汞的各種存在形式中毒性最強(qiáng)。甲基汞對神經(jīng)系統(tǒng)的損害尤為嚴(yán)重,但具體的神經(jīng)毒性的機(jī)制尚不明確,并且目前無有效治療甲基汞中毒的藥物,尋求拮抗甲基汞毒性的藥物顯得尤為重要。姜黃素是從姜科植物中提取出的天然產(chǎn)物,大量研究發(fā)現(xiàn),姜黃素對氧化應(yīng)激、炎癥、腫瘤、動脈粥樣硬化的治療有良好效果。研究表明姜黃素可與金屬毒物形成毒性低的配合物,具有金屬抑制作用。本文旨在探究姜黃素對甲基汞損傷星形膠質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制,為甲基汞中毒的治療提供理論依據(jù)。方法:原代培養(yǎng)的大鼠新生胎鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞,傳代生長14天后分組。分別為空白對照組、甲基汞(5μmol/L)染毒組、姜黃素預(yù)處理(2、5、10和20μmol/L)甲基汞染毒組。以四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法評價細(xì)胞活力,乳酸脫氫酶(LDH)為指標(biāo)評價細(xì)胞毒性;檢測谷胱甘肽(GSH)、過氧化氫酶(CAT)含量;免疫熒光法檢測評價Nrf2核轉(zhuǎn)位情況;蛋白印跡法測定核因子E2相關(guān)因子(Nrf2)及其下游醌氧化還原酶蛋白(NQO1)和抗氧化酶血紅素加氧酶蛋白(HO-1)表達(dá)的變化;蛋白印跡法檢測細(xì)胞漿、核分離后的Nrf2的表達(dá)變化情況;采用siRNA干擾Nrf2后,MTT法檢測姜黃素細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)的變化;蛋白激酶C(PKC)廣泛抑制劑Ro 31-8220和PKCδ抑制劑Rottlerin抑制PKC后,蛋白印跡法檢測PKC和Nrf2蛋白表達(dá)變化,MTT法檢測姜黃素保護(hù)效應(yīng)的變化。結(jié)果:與空白對照組相比,甲基汞染毒組細(xì)胞活力顯著降低、LDH釋放量顯著增加(P0.05),并呈現(xiàn)時間和劑量效應(yīng)關(guān)系;與甲基汞染毒組相比較,姜黃素預(yù)處理組細(xì)胞活力顯著提高、LDH釋放量顯著降低(P0.05),與姜黃素的處理呈劑量和時間效應(yīng)依賴關(guān)系,5、10和20μmol/L的姜黃素預(yù)處理12 h可顯著增加細(xì)胞活力;與甲基汞染毒組相比,姜黃素預(yù)處理組GSH水平顯著升高、CAT水平明顯升高(P0.05);與空白對照組及甲基汞染毒組相比,姜黃素預(yù)處理組促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)位,Nrf2總蛋白及核蛋白表達(dá)顯著增加(P0.05),并激活下游NQO1、HO-1蛋白表達(dá),使其表達(dá)顯著升高(P0.05);siRNA干擾Nrf2后,姜黃素的保護(hù)作用明顯下降(P0.05);PKC抑制劑作用后PKC及Nrf2表達(dá)下降,但是Nrf2蛋白表達(dá)下降有限,與siRNA干擾相比效果較弱,抑制劑作用后,甲基汞(7.5μmol/L)處理后姜黃素保護(hù)組與未加抑制劑組相比細(xì)胞活力顯著下降(P0.05)。結(jié)論:姜黃素可通過激活Nrf2-ARE信號通路保護(hù)甲基汞所致大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷,姜黃素激活Nrf2的路徑與PKC有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R595.2

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏妍婷;馬三梅;;姜黃素抗腫瘤的機(jī)制[J];生命的化學(xué);2016年05期

2 王寧;馬慧萍;漆欣筑;蒙萍;賈正平;;Nrf2-ARE信號通路在機(jī)體氧化應(yīng)激損傷防護(hù)中的研究進(jìn)展[J];解放軍醫(yī)藥雜志;2015年12期

3 吳靜;楊睿;劉樹業(yè);;蛋白激酶C抑制劑的研究新進(jìn)展[J];天津醫(yī)藥;2016年01期

4 王奕智;張寧;;姜黃素抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J];寶雞文理學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年01期

5 馮新斌;陳玖斌;付學(xué)吾;胡海燕;李平;仇廣樂;閆海魚;尹潤生;張華;朱偉;;汞的環(huán)境地球化學(xué)研究進(jìn)展[J];礦物巖石地球化學(xué)通報;2013年05期

6 王春戰(zhàn);景華;;姜黃素抗炎抗氧化作用的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2012年06期

7 ;Curcumin attenuates Nrf2 signaling defect, oxidative stress in muscle and glucose intolerance in high fat diet-fed mice[J];World Journal of Diabetes;2012年05期

8 石峰;崔平;;姜黃素抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2011年06期

9 李薇;李海浪;;姜黃素對高氧致新生大鼠肺纖維化的保護(hù)作用及機(jī)制探討[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2009年06期

10 邵建林;周銀燕;陳華梅;王雁;趙國良;呂強(qiáng);衡新華;羅用宇;;七氟烷通過P~(70S6K)/Nrf2信號通路誘導(dǎo)神經(jīng)元HO-1mRNA表達(dá)[J];中國藥理學(xué)通報;2009年02期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 金賽;姜黃素對鎘致心臟損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];陜西科技大學(xué);2015年

，

本文編號：1286320