本文關(guān)鍵詞：金絲桃苷對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其BK通道機(jī)制

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【摘要】：目的:探討線栓法制備小鼠局灶性腦缺血再灌注模型成功的兩種評價(jià)方法間的相關(guān)性,為評價(jià)該模型提供一種新的方法和標(biāo)準(zhǔn)。觀察金絲桃苷(Hyp)對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,以及BK通道在Hyp抗腦缺血再灌注損傷中的作用,探討Hyp抗缺血性腦損傷作用的機(jī)制。方法:1.20只雄性KM小鼠,隨即分為模型組(n=10)、假手術(shù)組(n=10),采用線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈建立局灶性腦缺血再灌注模型,分別于術(shù)前、缺血即刻、缺血2 h、再灌注即刻、再灌注24 h利用激光散斑成像技術(shù)監(jiān)測各組小鼠腦血流量變化,再灌注24 h后進(jìn)行神經(jīng)功能評分,并行TTC染色法檢測腦梗死體積百分比,相關(guān)性分析判斷腦血流量變化與梗死體積百分比之間的相關(guān)性。2.使用線栓法制備大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞致局灶性腦缺血再灌注模型。雄性SD大鼠隨機(jī)分為:假手術(shù)組組、模型組、Hyp(12.5,25,50mg/Kg)組和陽性藥銀杏葉提取物組。術(shù)前灌胃給藥3天。激光散斑成像技術(shù)分別于術(shù)前、術(shù)后即刻、缺血2h、再灌注即刻、再灌注24h監(jiān)測腦血流變化;缺血2h再灌注24h后,觀察神經(jīng)功能損傷,TTC染色法檢測腦梗死體積;3.檢測血清中SOD、MDA含量;4.RT-PCR檢測神經(jīng)元中BK-α、BK-β4、PKC-α mRNA表達(dá)水平;5.Western blot檢測神經(jīng)元中BK-α、BK-β4、PKC-α和腦血管平滑肌中BK-b1亞基蛋白表達(dá)情況;結(jié)果:1.與假手術(shù)組相比,模型組小鼠出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能異常,TTC染色顯示出明顯的腦梗死,梗死側(cè)腦血流量明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。缺血即刻、缺血2 h小鼠腦血流量變化與再灌注24 h腦梗死體積的相關(guān)系數(shù)R2值分別為0.55、0.28(P0.05)。2.與假手術(shù)組相比,模型組大鼠神經(jīng)功能評分值明顯升高(P0.01);與模型組相比,Hyp低、中、高劑量組、GBE組均可降低其神經(jīng)功能評分(P0.05,P0.01)。與假手術(shù)組比較,模型組大鼠局部腦血流顯著下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),再灌注即刻、再灌注24h,Hyp各劑量組大鼠局部腦血流均有不同程度升高,其中,再灌注24h,Hyp中、高劑量組血流值恢復(fù)最高(P0.05,P0.01)。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠可見明顯的梗死(P0.01);與模型組相比,金絲桃苷低、中、高劑量組、GBE組均可降低腦梗死體積(P0.05,P0.01)。3.與假手術(shù)組相比,模型組大鼠血清MDA值明顯升高、SOD值明顯降低(P0.05,P0.01)。金絲桃苷低、中、高劑量組及GBE組均顯著降低血清中MDA含量,升高SOD含量,與模型組相比,差異有顯著性(P0.05,P0.01)。4.RT-PCR結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠腦組織中神經(jīng)元BK-α、PKC-α基因表達(dá)顯著下降(P0.05),BK-β4基因表達(dá)顯著升高(P0.01)。與模型組相比,Hyp低、中、高劑量組可顯著增加BK-α表達(dá)(P0.01),Hyp低、中、高劑量組、GBE組可明顯降低BK-β4基因表達(dá)(P0.01),Hyp低、中、高劑量組、GBE組可顯著增加PKC-α基因表達(dá)(P0.01)。5.Western blot結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠神經(jīng)元中BK-α、PKC-α表達(dá)顯著下降(P0.05),BK-β4表達(dá)顯著升高(P0.01)。與模型組相比,Hyp中、高劑量組可顯著增加BK-α表達(dá)(P0.01),Hyp低、中、高劑量組、GBE組可明顯降低BK-β4表達(dá)(P0.01),顯著增加PKC-α蛋白表達(dá)(P0.01)。與假手術(shù)組相比,模型組大鼠腦血管平滑肌中BK-β1表達(dá)顯著下降(P0.01)。與模型組相比,Hyp中、高劑量組可顯著增加BK-β1蛋白表達(dá)(P0.05,P0.01)。結(jié)論:1.缺血即刻的皮層血流變化與梗死體積具有較好的線性相關(guān)。小鼠腦血流量變化是除神經(jīng)功能評分和腦梗死體積以外另一種可判斷小鼠局灶性腦缺血模型制作成功的可靠且實(shí)用的方法。2.金絲桃苷可顯著降低腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能評分和腦梗死體積,增加腦缺血區(qū)局部血流量。其機(jī)制可能與神經(jīng)元和腦血管平滑肌細(xì)胞中BK通道激活相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1284663