本文關(guān)鍵詞：地黃飲子加減方對腦缺血再灌注模型大鼠細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響

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【摘要】：目的:本課題以中風(fēng)病為本虛標(biāo)實(shí)之證,其本在腎的相關(guān)中醫(yī)理論為依據(jù),采用大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型,主要通過補(bǔ)腎填精法代表方地黃飲子和補(bǔ)腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊,對腦缺血再灌注模型大鼠進(jìn)行藥物干預(yù),觀察模型大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡相關(guān)因子Bcl-2,Bax,Cyt-c,Caspase-3蛋白含量變化,最后通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果和相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),從分子生物學(xué)角度對補(bǔ)腎填精法和補(bǔ)腎活血法治療缺血性中風(fēng)的機(jī)制和原理進(jìn)行闡述和分析。方法:首先選擇健康Sprague-Dawley(SD)的雄性大鼠,總共50只,體重在280±20g。隨機(jī)將此50只實(shí)驗(yàn)大鼠分為10個(gè)亞組,分別記為24h假手術(shù)組、24h模型組、24h尼莫地平組、24h地黃飲子組和24h培元通腦組;7d假手術(shù)組、7d模型組、7d尼莫地平組、7d地黃飲子組和7d培元通腦組,每組5只。采用線栓法建立大鼠局灶性右側(cè)腦缺血再灌注模型,缺血90分鐘后拔出栓線,使血流再灌注。模型完成后,予以補(bǔ)腎填精法代表方地黃飲子和補(bǔ)腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊,對大鼠進(jìn)行灌胃給藥。假手術(shù)組和模型組給予同等劑量的生理鹽水灌胃。觀察大鼠一般情況、體重及神經(jīng)功能缺損評分變化,選擇24h和7d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取大鼠新鮮缺血側(cè)大腦皮質(zhì),應(yīng)用Western-Blot技術(shù)檢測Bcl-2,Bax,CytC,Caspase-3蛋白含量變化,掃描顯色后的底片,運(yùn)用專業(yè)軟件Image J對圖像進(jìn)行灰度分析,SPSS21.0處理所得數(shù)據(jù)。結(jié)果:補(bǔ)腎填精法代表方地黃飲子和補(bǔ)腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊對大鼠腦缺血再灌注模型缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡相關(guān)因子Bcl-2,Bax,CytC,Caspase-3。24h組中,地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,cyt-c的蛋白相對表達(dá)量較少,但無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),藥物的保護(hù)作用是存在的;地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bcl-2的蛋白表達(dá)較少,未能體現(xiàn)藥物的保護(hù)作用(P0.05);地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bax,Caspase-3的蛋白表達(dá)較高,未能體現(xiàn)藥物的保護(hù)作用(P0.05)。7d組中,地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bcl-2的蛋白表達(dá)較少,未能體現(xiàn)藥物的保護(hù)作用(P0.05);地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,cyt-c、Bax,Caspase-3的蛋白表達(dá)較高,未能體現(xiàn)藥物的保護(hù)作用(P0.05)。結(jié)論:兩種中藥復(fù)方有抑制大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡相關(guān)因子Cyt-C蛋白表達(dá)的趨勢存在,可能有促進(jìn)局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織修復(fù)的意義,可以進(jìn)一步增加樣本量證實(shí)。而在降低Bax,Caspase-3水平,提高Bcl-2水平的這兩個(gè)角度未見明顯變化,需要再更深入的研究與反思。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：1275789