地黃飲子加減方對腦缺血再灌注模型大鼠細胞凋亡機制的影響
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【摘要】:目的:本課題以中風病為本虛標實之證,其本在腎的相關(guān)中醫(yī)理論為依據(jù),采用大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型,主要通過補腎填精法代表方地黃飲子和補腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊,對腦缺血再灌注模型大鼠進行藥物干預(yù),觀察模型大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細胞凋亡相關(guān)因子Bcl-2,Bax,Cyt-c,Caspase-3蛋白含量變化,最后通過實驗結(jié)果和相關(guān)實驗數(shù)據(jù),從分子生物學角度對補腎填精法和補腎活血法治療缺血性中風的機制和原理進行闡述和分析。方法:首先選擇健康Sprague-Dawley(SD)的雄性大鼠,總共50只,體重在280±20g。隨機將此50只實驗大鼠分為10個亞組,分別記為24h假手術(shù)組、24h模型組、24h尼莫地平組、24h地黃飲子組和24h培元通腦組;7d假手術(shù)組、7d模型組、7d尼莫地平組、7d地黃飲子組和7d培元通腦組,每組5只。采用線栓法建立大鼠局灶性右側(cè)腦缺血再灌注模型,缺血90分鐘后拔出栓線,使血流再灌注。模型完成后,予以補腎填精法代表方地黃飲子和補腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊,對大鼠進行灌胃給藥。假手術(shù)組和模型組給予同等劑量的生理鹽水灌胃。觀察大鼠一般情況、體重及神經(jīng)功能缺損評分變化,選擇24h和7d兩個時間點分別取大鼠新鮮缺血側(cè)大腦皮質(zhì),應(yīng)用Western-Blot技術(shù)檢測Bcl-2,Bax,CytC,Caspase-3蛋白含量變化,掃描顯色后的底片,運用專業(yè)軟件Image J對圖像進行灰度分析,SPSS21.0處理所得數(shù)據(jù)。結(jié)果:補腎填精法代表方地黃飲子和補腎活血法代表中成藥培元通腦膠囊對大鼠腦缺血再灌注模型缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細胞凋亡相關(guān)因子Bcl-2,Bax,CytC,Caspase-3。24h組中,地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,cyt-c的蛋白相對表達量較少,但無明顯統(tǒng)計學意義(P0.05),藥物的保護作用是存在的;地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bcl-2的蛋白表達較少,未能體現(xiàn)藥物的保護作用(P0.05);地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bax,Caspase-3的蛋白表達較高,未能體現(xiàn)藥物的保護作用(P0.05)。7d組中,地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,Bcl-2的蛋白表達較少,未能體現(xiàn)藥物的保護作用(P0.05);地黃飲子組和培元通腦組與模型組比較,cyt-c、Bax,Caspase-3的蛋白表達較高,未能體現(xiàn)藥物的保護作用(P0.05)。結(jié)論:兩種中藥復(fù)方有抑制大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)區(qū)細胞凋亡相關(guān)因子Cyt-C蛋白表達的趨勢存在,可能有促進局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織修復(fù)的意義,可以進一步增加樣本量證實。而在降低Bax,Caspase-3水平,提高Bcl-2水平的這兩個角度未見明顯變化,需要再更深入的研究與反思。
【學位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R285.5;R-332
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