本文關(guān)鍵詞：烏藥葉槲皮苷治療心血管疾病藥效學(xué)評價及作用機制研究

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【摘要】：烏藥(Lindera aggregate(Sims)Kosterm)是樟科(Lauraceae)山胡椒屬植物,浙江天臺地區(qū)的道地藥材,具有較好的防治心腦血管疾病的效果。課題組前期研究表明,烏藥葉中的黃酮類化合物是其主要的活性成分類型之一,而其中槲皮苷(Quercitrin,QI)含量最高(原藥材中含量可達9.705mg/g,總黃酮中含量可達50%以上)為代表性成分,具有較大的開發(fā)利用價值。因此,本課題以烏藥葉單體成分槲皮苷為研究對象,考察其體內(nèi)外抗心血管疾病的藥理活性,并初步探討其抗氧化作用機制。首先,本論文采用老齡大鼠和急性血瘀大鼠模型,考察尾靜脈注射槲皮苷4 mg/kg、8 mg/kg和16 mg/kg對大鼠血清和組織中抗氧化酶含量和氧化產(chǎn)物以及血液流變學(xué)指標的影響。研究結(jié)果表明,槲皮苷中劑量(8mg/kg)即可顯著提高老齡鼠體內(nèi)抗氧化酶(T-SOD,GSH)的水平,明顯降低丙二醛(MDA)的含量;槲皮苷中、高劑量(8mg/kg和16mg/kg)可顯著降低大鼠全血粘度,但對血漿粘度和紅細胞壓積作用不大。其次,論文采用過氧化氫誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelialcells,HUVECs)和大鼠心肌細胞(H9C2)氧化應(yīng)激損傷模型,研究槲皮苷對細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用。結(jié)果表明,在槲皮苷預(yù)處理給藥(APT)、同時給藥(ACT)和后處理給藥(APOT)三種給藥方式下,ACT較APT和APOT效果顯著,且槲皮苷濃度范圍在62.5 μM-500μM時可劑量依賴性的顯著提高HUVECs和H9C2的細胞活力。最后,針對HUVECs采用MTT法、流式細胞術(shù)、免疫熒光、western blotting、DNA Ladder和熒光定量PCR(qPCR)等技術(shù)手段在抗氧化機制方面展開研究。通過對細胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶(SOD)和還原型谷胱甘肽(GSH)等抗氧化物酶含量分析、細胞內(nèi)活性氧(ROS)的檢測以及目的蛋白的細胞定位和表達含量分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)APT和ACT均可提高細胞中T-SOD和GSH的含量,抑制活性氧的產(chǎn)生,抑制細胞凋亡和DNA損傷,顯著上調(diào)抗氧化基因NRF2和OH-1基因水平;信號通路研究表明APT和ACT可激活HUVECs中Keap-1/Nrf2系統(tǒng),促進Nrf2核轉(zhuǎn)位,抑制過氧化氫誘導(dǎo)的caspase家族活化。然而,經(jīng)ACT處理HUVECs后,槲皮苷抑制了過氧化氫造成的自噬阻斷,使LC3B蛋白表達增加,促進SQSTM1的降解;在ACT中給予自噬抑制劑3-MA,HUVECs細胞活力下降,Nrf2核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象消失,提示自噬過程的激活可能是兩種給藥方式抗氧化作用稍有差異的原因之一。本論文首次揭示了槲皮苷在ACT處理方式下HUVECs中Nrf2-Keap-1抗氧化系統(tǒng)和自噬過程緊密聯(lián)系的機制。綜上,烏藥葉槲皮苷具有良好的抗氧化和活血祛瘀作用,具有較高的開發(fā)利用價值,本論文的研究為其在治療心血管疾病的開發(fā)應(yīng)用上建立了科學(xué)研究基礎(chǔ),對改善心血管疾病有重要意義。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳偉偉;高潤霖;劉力生;朱曼璐;王文;王擁軍;吳兆蘇;李惠君;顧東風(fēng);楊躍進;鄭哲;蔣立新;胡盛壽;;《中國心血管病報告2015》概要[J];中國循環(huán)雜志;2016年06期

2 楊明珠;方芳;陳蘭;周意;;國內(nèi)外心血管疾病健康管理研究進展[J];上海護理;2016年02期

3 胡流芳;王迎;任汝靜;霍海如;孫建輝;李洪梅;朱亞英;譚余慶;;Keap1-Nrf2/ARE信號通路的抗氧化應(yīng)激作用及其調(diào)控機制[J];國際藥學(xué)研究雜志;2016年01期

4 李敏;林俊;;細胞凋亡途徑及其機制[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2014年02期

5 李玲;徐小潔;葉棋濃;;細胞自噬與腫瘤[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2013年11期

6 張家瑞;;槲皮苷和山奈酚對糖尿病小鼠血糖及血脂水平的影響[J];現(xiàn)代食品科技;2013年03期

7 朱學(xué)鑫;蔣福升;丁志山;;槲皮苷生物活性的研究進展[J];蛇志;2012年01期

8 安良;李彬;朱明軍;杜廷海;劉明亮;;活血化瘀法在心血管疾病中的應(yīng)用[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè));2010年29期

9 趙瑞杰;李引乾;王會;王廣彬;娜日蘇;金大鵬;關(guān)偉軍;馬月輝;;Caspase家族與細胞凋亡的關(guān)系[J];中國畜牧雜志;2010年17期

10 謝玉英;;談活性氧與人類疾病[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2009年15期

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本文編號：1269512