作為類黃酮物質(zhì)的一個(gè)重要亞類,花色苷是一類廣泛分布于植物界的水溶性色素。合成的花色苷通常被儲(chǔ)存于細(xì)胞的液泡中使得植物的葉、花和果實(shí)等組織器官呈現(xiàn)從粉紅到藍(lán)紫的繽紛色彩�；ㄉ毡旧砭哂械纳食四軌驇椭参镂ハx完成受粉外,還能誘使動(dòng)物和鳥類取食果實(shí)并通過排泄幫助植物傳播種子�；ㄉ盏姆e累還能夠幫助植物抵御UV照射、凍害、干旱和微生物的侵害。此外植物經(jīng)常合成花色苷作為遮光劑以清除UV照射所產(chǎn)生的氧自由基。越來越多的研究表明有規(guī)律地食用富含花色苷的食物能夠降低人類罹患腫瘤、心血管疾病和其他退行性疾病的可能性。多數(shù)研究認(rèn)為花色苷對(duì)人體健康的益處來源于該類化合物本身的抗氧化性和清除過氧化物的能力,而最近的研究則認(rèn)為花色苷還能夠參與哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)部信號(hào)傳遞途徑的調(diào)節(jié)。花色苷的積累不僅能夠提高植物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力,還能夠?yàn)槿祟愄峁┙】档纳攀吵煞�。植物中花色苷的生物合成主要由轉(zhuǎn)錄因子對(duì)花色苷合成結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控而實(shí)現(xiàn)。這些轉(zhuǎn)錄因子主要包括MYB、b HLH、WD40、b ZIP及MADS box等家族的蛋白。此外花色苷的生物合成還受外界環(huán)境因子主要包括光照、干旱和溫度等的調(diào)控。白菜和茄子作為重要... 

【文章來源】：重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：213 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
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英文摘要
縮略詞表
1 緒論
    1.1 花色苷的研究背景
        1.1.1 花色苷的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
        1.1.2 花色苷在植物中的生理功能
        1.1.3 花色苷的毒理性研究
        1.1.4 花色苷的健康價(jià)值
        1.1.5 花色苷的生物合成途徑
        1.1.6 花色苷生物合成的分子調(diào)控機(jī)理
        1.1.7 花色苷生物合成的環(huán)境調(diào)控
    1.2 課題的提出及研究意義
    1.3 課題的研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
        1.3.1 課題的研究?jī)?nèi)容
        1.3.2 課題的技術(shù)路線
    1.4 課題的創(chuàng)新點(diǎn)
2 紫白菜花色苷合成的分子機(jī)理研究
    2.1 引言
    2.2 材料、試劑與儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 試劑與培養(yǎng)基
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 基因組DNA提取
        2.3.2 總RNA提取
        2.3.3 c DNA合成
        2.3.4 Br MYB1、Br MYB2、Br MYB3和Br TT8基因的克隆
        2.3.5 Br MYB1、Br MYB2、Br MYB3和Br TT8基因的序列分析
        2.3.6 花色苷合成結(jié)構(gòu)和調(diào)控基因的表達(dá)模式研究
        2.3.7 Br TT8基因的過表達(dá)載體構(gòu)建
        2.3.8 p BI121- Br TT8質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌
        2.3.9 Br TT8基因過表達(dá)番茄的培育
        2.3.10 Br TT8基因過表達(dá)陽性株系的篩選
        2.3.11 Br TT8在轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)水平分析
        2.3.12 植物總花色苷的提取及含量測(cè)定
        2.3.13 花色苷特定成分含量和結(jié)構(gòu)的測(cè)定
        2.3.14 在番茄中過表達(dá)Br TT8基因?qū)Ψ鸦ㄉ蘸铣傻挠绊?br>    2.4 結(jié)結(jié)果與分析
        2.4.1 小白菜花色苷成分鑒定及含量的測(cè)定
        2.4.2 花色苷合成結(jié)構(gòu)基因與調(diào)控基因在紫白菜與綠白菜中成熟葉中的表達(dá)分析
        2.4.3 光照和暗處理對(duì)小白菜生長(zhǎng)發(fā)育和花色苷合成的影響
        2.4.4 光照和暗處理對(duì)小白菜花色苷合成及調(diào)控基因表達(dá)的影響
        2.4.5 花色苷合成調(diào)控基因Br TT8、Br MYB1、Br MYB2和Br MYB3的序列分析
        2.4.6 Br TT8過表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.4.7 異源表達(dá)Br TT8的轉(zhuǎn)基因番茄的培育及篩選
        2.4.8 Br TT8在轉(zhuǎn)基因番茄中的異源表達(dá)水平分析
        2.4.9 Br TT8的異源表達(dá)能夠激活番茄花色苷的積累
        2.4.10 Br TT8的異源表達(dá)能夠激活番茄部分花色苷合成基因的轉(zhuǎn)錄
    2.5 本章結(jié)論
3 強(qiáng)光誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因番茄葉和果實(shí)花色苷著色的分子機(jī)理研究
    3.1 引言
    3.2 材料、試劑與儀器
        3.2.1 材料
        3.2.2 儀器與設(shè)備
        3.2.3 試劑與培養(yǎng)基
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 Br TT8轉(zhuǎn)基因與野生型番茄幼苗的弱光與強(qiáng)光處理方法
        3.3.2 Br TT8與其他花色苷合成調(diào)控蛋白的互作研究
        3.3.3 Sl AN2與Br TT8共表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.3.4 p BI121-Br TT8-Sl AN2共表達(dá)載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        3.3.5 Br TT8與Sl AN2共表達(dá)轉(zhuǎn)基因番茄的培育
        3.3.6 Br TT8與Sl AN2在轉(zhuǎn)基因株系中的表達(dá)檢測(cè)
        3.3.7 轉(zhuǎn)基因番茄總花色苷的提取
        3.3.8 q PCR分析Br TT8與Sl AN2共表達(dá)對(duì)花色苷合成結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)影響
        3.3.9 花色苷成分及含量的測(cè)定
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 異源表達(dá)Br TT8的轉(zhuǎn)基因番茄的表型分析
        3.4.2 強(qiáng)光和弱光對(duì)轉(zhuǎn)基因與野生型番茄幼苗的花色苷生物合成的調(diào)控
        3.4.3 強(qiáng)光和弱光處理下對(duì)轉(zhuǎn)基因與野生型番茄幼苗的花色苷生物合成基因的表達(dá)分析
        3.4.4 強(qiáng)光和弱光處理下對(duì)轉(zhuǎn)基因與野生型番茄幼苗的花色苷生物合成調(diào)控基因的表達(dá)分析
        3.4.5 強(qiáng)光處理不同時(shí)間下轉(zhuǎn)基因番茄幼苗的花色苷積累的分析
        3.4.6 強(qiáng)光處理不同時(shí)間下轉(zhuǎn)基因番茄幼苗的花色苷合成結(jié)構(gòu)基因表達(dá)水平的動(dòng)力學(xué)分析
        3.4.7 強(qiáng)光處理不同時(shí)間下轉(zhuǎn)基因番茄幼苗的花色苷合成調(diào)控基因表達(dá)水平的動(dòng)力學(xué)分析
        3.4.8 露地栽培的轉(zhuǎn)基因與野生型番茄果實(shí)的花色苷積累分析
        3.4.9 露地栽培的轉(zhuǎn)基因與野生型番茄果實(shí)不同部位花色苷合成結(jié)構(gòu)基因表達(dá)分析
        3.4.10 露地栽培的轉(zhuǎn)基因與野生型番茄果實(shí)不同部位花色苷合成調(diào)控基因表達(dá)分析
        3.4.11 露地栽培的轉(zhuǎn)基因番茄花色苷合成機(jī)理分析與模型建立
        3.4.12 露地栽培的轉(zhuǎn)基因番茄花色苷合成推測(cè)機(jī)理的驗(yàn)證
        3.4.13 番茄內(nèi)源花色苷調(diào)控基因與Br TT8之間的蛋白互作研究
        3.4.14 番茄內(nèi)源花色苷調(diào)控基因Sl AN2與Br TT8共表達(dá)的功能研究
        3.4.15 強(qiáng)光誘導(dǎo)Br TT8轉(zhuǎn)基因番茄葉與果實(shí)花色苷積累的分子模型
    3.5 本章結(jié)論
4 紫茄果實(shí)花色苷合成的分子機(jī)理研究
    4.1 引言
    4.2 材料、試劑與儀器
        4.2.1 材料
        4.2.2 儀器與設(shè)備
        4.2.3 試劑與培養(yǎng)基
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.0 紫茄果實(shí)表皮花色苷成分及含量的測(cè)定
        4.3.1 紫茄與白茄花色苷合成與調(diào)控基因的表達(dá)分析
        4.3.2 Sm MYB1基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
        4.3.3 p BI121- Sm MYB1質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        4.3.4 Sm MYB1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因茄子的培育
        4.3.5 Sm MYB1及花色苷合成相關(guān)基因在轉(zhuǎn)基因茄子株系中的表達(dá)檢測(cè)
        4.3.6 轉(zhuǎn)基因茄子總花色苷的提取
        4.3.7 光照與黑暗處理對(duì)紫茄果實(shí)表皮花色苷合成的影響
        4.3.8 光照與黑暗處理的紫茄果實(shí)表皮花色苷合成相關(guān)基因的表達(dá)分析
        4.3.9 Sm COP1和Sm COP1L基因的克隆
        4.3.10 Sm MYB1與光信號(hào)傳遞抑制蛋白Sm COP1和Sm COP1L的互作研究
    4.4 結(jié)結(jié)果與分析
        4.4.1 紫茄果實(shí)表皮花色苷成分及定量分析
        4.4.2 花色苷合成結(jié)構(gòu)基因在紫茄與白茄果實(shí)中的檢測(cè)
        4.4.3 花色苷合成調(diào)控基因在紫茄與白茄果實(shí)中的表達(dá)分析
        4.4.4 花色苷合成調(diào)控基因在紫茄中的克隆與序列分析
        4.4.5 Sm MYB1在紫茄不同組織部位的表達(dá)分析
        4.4.6 Sm MYB1的過表達(dá)激活花色苷在野生茄子中的大量合成
        4.4.7 黑暗與光照條件下花色苷積累分析
        4.4.8 黑暗與光照條件處理的紫茄果實(shí)花色苷合成結(jié)構(gòu)基因表達(dá)分析
        4.4.9 黑暗與光照條件處理的紫茄果實(shí)花色苷合成結(jié)構(gòu)基因表達(dá)分析
        4.4.10 Sm MYB1與可能的光形態(tài)建成抑制蛋白的互作研究
    4.5 本章結(jié)論
5 轉(zhuǎn)基因非洲紅茄花色苷合成機(jī)理及抗凍性研究
    5.1 引言
    5.2 材料、試劑與儀器
        5.2.1 材料
        5.2.2 儀器與設(shè)備
        5.2.3 試劑與培養(yǎng)基
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 轉(zhuǎn)基因非洲紅茄花色苷成分及含量的測(cè)定
        5.3.2 花色苷合成及調(diào)控基因在轉(zhuǎn)基因與野生非洲紅茄株系中的表達(dá)檢測(cè)
        5.3.3 轉(zhuǎn)基因與野生非洲紅茄凍害抗性分析
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.0 轉(zhuǎn)基因茄子花色苷積累情況分析
        5.4.1 轉(zhuǎn)基因茄子紫色果肉中的花色苷成分分離及鑒定
        5.4.2 轉(zhuǎn)基因茄子果肉中的花色苷代謝途徑分析
        5.4.3 轉(zhuǎn)基因與野生茄子不同組織花色苷含量的分析檢測(cè)
        5.4.4 Sm MYB1在轉(zhuǎn)基因與野生茄子不同組織部位的表達(dá)分析
        5.4.5 花色苷合成結(jié)構(gòu)基因在野生與轉(zhuǎn)基因茄子中的表達(dá)分析
        5.4.6 花色苷合成調(diào)控基因在野生與轉(zhuǎn)基因茄子中的表達(dá)分析
        5.4.7 野生與轉(zhuǎn)基因茄子幼苗抗凍性分析
    5.5 本章結(jié)論
6 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
    A. 作者在攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄
    B. 作者在攻讀博士學(xué)位期間專利情況
    C. 作者在攻讀博士學(xué)位期間主持和參加的科研項(xiàng)目
    D. 作者在在攻讀博士學(xué)位期間獲得的獎(jiǎng)勵(lì)



本文編號(hào)：3291868