本文關(guān)鍵詞：Numb和Numbl在小鼠乳腺發(fā)育和泌乳過(guò)程中的功能與作用機(jī)制　出處：《中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 乳腺發(fā)育 泌乳過(guò)程 EMT Notch信號(hào)通路 p53

【摘要】：乳腺是小鼠全身組織中唯一一個(gè)主要在出生后生長(zhǎng)發(fā)育的器官,呈現(xiàn)一個(gè)樹(shù)狀的導(dǎo)管結(jié)構(gòu)。小鼠的乳腺上皮由內(nèi)側(cè)的腔上皮層和外側(cè)伸縮性的肌上皮層組成。闡明調(diào)控肌上皮和腔上皮層細(xì)胞狀態(tài)平衡的機(jī)理有利于深入了解乳腺發(fā)育的過(guò)程。Numb在進(jìn)化上保守,哺乳動(dòng)物中包括兩個(gè)同源蛋白:Numb和Numblike (Numbl)。Numb和Numbl有時(shí)功能冗余,有時(shí)功能不盡相同。Numb是Notch信號(hào)通路的抑制因子,而Notch信號(hào)通路對(duì)乳腺干細(xì)胞(MaSC)的自我更新和腔上皮細(xì)胞的分化有著很重要的作用。然而,Numb和Numbl在乳腺發(fā)育和泌乳中的功能仍未揭示清楚。本研究利用Numb和Numbl敲除小鼠結(jié)合體外細(xì)胞系培養(yǎng),系統(tǒng)探究Numb和Numbl在乳腺發(fā)育和泌乳過(guò)程中的功能。本研究采用流式細(xì)胞分選和定量PCR技術(shù)檢測(cè)到Numb和Numbl富集于乳腺的肌上皮層,并且在懷孕后期表達(dá)水平達(dá)到最高。敲除Numb和Numbl顯著抑制乳腺導(dǎo)管分支,同時(shí)導(dǎo)致肌上皮細(xì)胞減少,腔上皮細(xì)胞增多,表明Numb和Numbl在維持乳腺腔上皮和肌上皮平衡中發(fā)揮重要作用。在分子機(jī)制上,這種表型與Notch信號(hào)通路的過(guò)度激活有關(guān)。同時(shí),敲除Numb和Numbl導(dǎo)致p53和p21的表達(dá)水平受到抑制,細(xì)胞周期蛋白Cyclin D1表達(dá)水平升高,從而引起腔上皮細(xì)胞增殖加快。抑制Numb和Numbl還會(huì)促進(jìn)上皮——間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)作用的發(fā)生,體外過(guò)表達(dá)Numbl會(huì)抑制細(xì)胞移動(dòng),表明Numb和Numbl在維持上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞平衡中發(fā)揮重要作用。本研究還發(fā)現(xiàn)Numbl敲除母鼠不能正常泌乳,導(dǎo)致剛出生的小鼠因饑餓而死亡。進(jìn)而檢測(cè)到懷孕后期Numbl敲除母鼠的腺泡結(jié)構(gòu)異常增大,肌上皮細(xì)胞失去彈性,管腔內(nèi)還會(huì)出現(xiàn)圓形的凋亡細(xì)胞。本研究利用免疫組化、免疫熒光染色和定量PCR的方法檢測(cè)到Numb和Numbli敲除后,在懷孕后期STAT5和PRLR通路都并未被激活,而STAT3信號(hào)通路被異常激活。在懷孕后期Numb和Numbl敲除母鼠的乳腺腺泡中,p63的表達(dá)水平升高,Notch信號(hào)通路激活。此外,本研究還利用MMTV-PyVT乳腺癌小鼠模型,發(fā)現(xiàn)敲除Numbl會(huì)抑制乳腺癌的肺轉(zhuǎn)移。綜上所述,本研究證實(shí)在青春期,Numb和Numbl通過(guò)Notch信號(hào)通路和p53-p21來(lái)調(diào)控乳腺肌上皮層細(xì)胞和腔上皮層細(xì)胞狀態(tài)的平衡。在懷孕后期,Numb和Numbl:抑制Notch信號(hào)通路激活,維持p63在肌上皮細(xì)胞中的穩(wěn)定性,激活泌乳作用所必需的STAT5信號(hào)通路和抑制STAT3信號(hào)通路。本研究揭示出Numb和Numbl在調(diào)控肌上皮細(xì)胞命運(yùn)、維持上皮細(xì)胞特性和促進(jìn)泌乳作用中的重要性,豐富了乳腺發(fā)育和泌乳作用的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),可以為乳腺疾病和乳腺癌的治療和藥物設(shè)計(jì)提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：Q41

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 張?jiān)?Numb和Numbl在小鼠乳腺發(fā)育和泌乳過(guò)程中的功能與作用機(jī)制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：1323869