為研究不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中CaMKKβ依賴性腺苷酸活化蛋白激酶AMPK活化通路、能量代謝及肌肉內(nèi)環(huán)境的變化情況。本試驗對不同海拔高度牛肉施以CaCl₂處理,通過測定三種海拔高度牛低氧適應(yīng)性,三種海拔高度牛肉對照組和CaCl₂組成熟過程中CaMKKβ依賴性AMPK活化通路、肌肉能量代謝關(guān)鍵產(chǎn)物及其限速酶活、肌原纖維蛋白(Myofibrillar protein,MP)特性、線粒體、PGC-1α以及肌細胞微觀結(jié)構(gòu)等的變化情況,探析了CaCl₂處理對不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中AMPK活化通路、能量代謝、MP特性及肌肉微觀結(jié)構(gòu)的影響。為深入研究AMPK與宰后肌肉能量代謝、肌內(nèi)環(huán)境及品質(zhì)的關(guān)系,進而實現(xiàn)調(diào)控宰后肌肉品質(zhì)提供一定的理論參考。研究結(jié)果如下:1.牛的低氧適應(yīng)性與海拔高度有關(guān)。隨海拔高度的上升,宰后肌肉HIF-1、PRKAA2、GLUT4 mRNA表達量和肌紅蛋白含量依次升高(P<0.05),甘南牦牛和玉樹牦牛HIF-1基因mRNA水平無顯著差異,玉樹牦牛PRKAA1的mRNA表達量低于甘南牦牛(P&l...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮略詞表
文獻綜述
    1 高海拔低氧適應(yīng)性
        1.1 低氧適應(yīng)
        1.2 低氧適應(yīng)相關(guān)基因
            1.2.1 低氧誘導(dǎo)因子
            1.2.2 葡萄糖運載體蛋白
        1.3 低氧適應(yīng)對肌紅蛋白的影響
        1.4 低氧適應(yīng)對糖代謝酶的影響
    2 腺苷酸活化蛋白激酶調(diào)控通路
        2.1 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的概念
        2.2 影響AMPK活性的因素
        2.3 上游激酶對AMPK活力的調(diào)節(jié)
        2.4 AMPK對糖代謝的調(diào)控
    3.肉品宰后生理變化
    4.蛋白質(zhì)特性研究
        4.1 肌肉中的蛋白質(zhì)
        4.2 宰后肌肉蛋白質(zhì)降解
    5.研究背景與意義
1 前言
2 材料與方法
    2.1 試驗材料與儀器設(shè)備
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗設(shè)備
        2.1.3 試驗試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 技術(shù)路線
        2.2.2 試驗設(shè)計
        2.2.3 測定項目與方法
            2.2.3.1 肌紅蛋白含量
            2.2.3.2 pH值
            2.2.3.3 色度
            2.2.3.4 肌原纖維小片化指數(shù)(MFI)
            2.2.3.5 掃描電子顯微鏡觀察
            2.2.3.6 激光共聚焦顯微鏡觀察
            2.2.3.7 RT-PCR
            2.2.2.8 p-AMPK及AMPK蛋白表達量
            2.2.2.9 CaMKKβ及AMPK活性
            2.2.3.10 糖酵解水平的測定
            2.2.3.11 糖酵解關(guān)鍵限速酶活性的測定
            2.2.3.12 蛋白質(zhì)特性
    2.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 不同海拔高度牛低氧適應(yīng)性
        3.1.1 不同海拔高度牛低氧適應(yīng)相關(guān)基因mRNA表達量
        3.1.2 不同海拔高度牛低氧適應(yīng)相關(guān)基因的蛋白表達免疫印跡
        3.1.3 不同海拔高度牛肉肌紅蛋白(Mb)含量
    3.2 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中AMPK活化途徑
        3.2.1 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中AMPK表達量
        3.2.2 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中AMPK活性
        3.2.3 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中CaMKKβ活性
    3.3 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中能量代謝通路
        3.3.1 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中糖原含量
        3.3.2 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中pH變化
        3.3.3 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中乳酸含量變化
        3.3.4 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中乳酸脫氫酶活性變化
        3.3.5 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中己糖激酶活性變化
        3.3.6 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中Ca²⁺-ATPase活性變化
        3.3.7 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中Na/K⁺-ATPase活性
    3.4 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中品質(zhì)特性變化
        3.4.1 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中亮度(L*)變化
        3.4.2 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中紅度(a*)變化
        3.4.3 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌原纖維小片化指數(shù)
    3.5 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌原纖維蛋白特性
        3.5.1 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌原纖維蛋白熱穩(wěn)定性
        3.5.2 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌原纖維蛋白降解
        3.5.3 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌原纖維蛋白二級結(jié)構(gòu)
    3.6 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中線粒體狀態(tài)
    3.7 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中PGC-1α活性
    3.8 不同海拔高度牛肉宰后成熟過程中肌細胞微觀結(jié)構(gòu)的變化
4 討論
    4.1 不同海拔高度牛低氧誘導(dǎo)因子
    4.2 AMPK及其上下游因子
    4.3 不同海拔高度牛背最長肌宰后糖酵解代謝情況
    4.4 不同海拔高度牛背最長肌宰后酶活情況
    4.5 不同海拔高度牛背最長肌宰后成熟過程中MP降解及二級結(jié)構(gòu)變化情況
    4.6 不同海拔高度牛背最長肌成熟過程中線粒體、PGC-1α及肌纖維微觀結(jié)構(gòu)的變化情況
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介



本文編號：3763537