本文關(guān)鍵詞：溫度、光照對滸苔生長及其硝酸還原酶活力的影響

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【摘要】：本文以近幾年黃海海域綠潮中的優(yōu)勢藻種—滸苔(Ulva prolifera)為研究對象,采用一次性培養(yǎng)方法,研究了營養(yǎng)鹽充足的條件下,溫度或光照單個環(huán)境因子的變化對滸苔生長和細胞內(nèi)硝酸還原酶活力(NRA)的影響以及滸苔生長與細胞內(nèi)NRA之間的內(nèi)在聯(lián)系。同時結(jié)合各生長條件下所對應(yīng)的滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽、體內(nèi)碳氮比及培養(yǎng)液中硝酸鹽濃度的變化,初步分析了不同生長環(huán)境條件下滸苔對硝酸鹽的吸收及同化過程,以期探討溫度、光照對滸苔生長影響的內(nèi)在作用機制。本文主要得到以下結(jié)論：(1)本文從研磨提取時間、酶促反應(yīng)恒速時間、硝酸鹽濃度、還原型輔酶Ⅰ(NADH)濃度及吩嗪硫酸甲酯(PMS)用量等方面確定了離體法測定滸苔細胞內(nèi)NRA的實驗條件,并確定了采用水楊酸比色法測定滸苔體內(nèi)硝酸鹽的具體測定方法。條件實驗結(jié)果表明,滸苔NRA的具體測定條件為：研磨提取時間為6min,酶促反應(yīng)時間為30min,KN03濃度為10mmol/L,NADH濃度為0.36mmol/L,PMS體積為50μL。當采用水楊酸比色法測定滸苔體內(nèi)硝酸鹽濃度時,顯色劑水楊酸濃硫酸溶液的最佳用量為0.4mL。(2)在10℃～30℃的溫度范圍內(nèi),滸苔均能生長,且均能迅速進入快速生長期,說明滸苔能快速適應(yīng)環(huán)境中溫度的變化。以日均相對增長率及滸苔濕重表征的滸苔生長狀況表明,15℃是滸苔生長的最適溫度。在培養(yǎng)期間,低溫下(10～20℃)滸苔體內(nèi)的NRA表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢,并且NRA的變化較細胞內(nèi)硝酸鹽濃度的變化存在1天的滯后；而高溫條件下(25℃及30℃),滸苔體內(nèi)的NRA表現(xiàn)出在培養(yǎng)初期即快速下降至低值的變化趨勢。不同培養(yǎng)溫度下,滸苔NRA隨時間的變化也導致了滸苔體內(nèi)POC/PON隨培養(yǎng)時間的不同變化：低溫組呈現(xiàn)先降低后升高的變化趨勢,而高溫組則為先升高后快速降低再升高的變化情況。各溫度下,滸苔體內(nèi)亞硝酸鹽、硝酸鹽含量與NRA呈正相關(guān)。五個溫度下NRAmax大小順序為15℃10℃20℃25℃≥30℃,NRA平均值大小順序為10℃≈15℃20℃25℃≥30℃,這與不同溫度下滸苔的生長好壞狀況順序基本一致,且NRA平均值與日均相對增長率呈正相關(guān),說明溫度可以通過調(diào)控NRA進而調(diào)控滸苔的生長狀況。(3)當光強為75～150W·m-2時,滸苔能正常生長：而光強為0～22.5W·m-2時,滸苔幾乎無法生長。除光強為0W·m-2外,其余實驗組滸苔細胞內(nèi)NRA隨培養(yǎng)時間均呈先增加至最大值后逐漸降低的趨勢,光照較強的兩實驗組(150和112.5W·m-2)滸苔體內(nèi)NRA總體較低,加之滸苔的光合速率較高,導致POC/PON較高,而光照較弱實驗組(75、22.5和0W·m-2)滸苔體內(nèi)NRA雖然較高,但由于受光照的限制,導致POC/PON隨時間的延長變化不大。光強為22.5-150W·m-2時,滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽含量與NRA呈正相關(guān)。不同光強實驗組NRAmax大小順序為75W·m-222.5W·m-2150W·m-2112.5W·m-20W·m-2, NRA平均值大小順序為0W·m-2≈22.5W·m-275W·m-2150W·m-2112.5W·m-2,這與各光強下滸苔的生長狀態(tài)并不完全相符,說明光照的改變雖然對滸苔硝酸還原酶活力會產(chǎn)生一定的影響,但并不能完全反映其對滸苔生長產(chǎn)生影響的內(nèi)在機制。
【關(guān)鍵詞】：滸苔 硝酸還原酶活力 溫度 光照
【學位授予單位】：中國海洋大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：Q945
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 0 前言11-12
• 1 文獻綜述12-20
• 1.1 綠潮及典型綠潮生物介紹12
• 1.2 滸苔生長的影響因素12-13
• 1.2.1 營養(yǎng)鹽對滸苔生長的影響12-13
• 1.2.2 溫度對滸苔生長的影響13
• 1.2.3 光照對滸苔生長的影響13
• 1.3 硝酸還原酶的概述及其研究意義13-15
• 1.4 硝酸還原酶活力的測定方法15-16
• 1.5 硝酸還原酶活力的影響因素16-18
• 1.5.1 溫度對硝酸還原酶活力的影響16-17
• 1.5.2 光照對硝酸還原酶活力的影響17-18
• 1.5.3 營養(yǎng)鹽對硝酸還原酶活力的影響18
• 1.5.4 其它因子對硝酸還原酶活力的影響18
• 1.6 本文的研究目的及意義18-20
• 2 實驗部分20-27
• 2.1 儀器和材料20-22
• 2.1.1 主要儀器設(shè)備20-21
• 2.1.2 實驗試劑21
• 2.1.3 材料來源與處理21-22
• 2.2 實驗方法22-27
• 2.2.1 離體法測定滸苔硝酸還原酶活力條件的確定22-23
• 2.2.2 滸苔體內(nèi)硝酸鹽含量的測定23-24
• 2.2.3 溫度梯度實驗設(shè)定24-25
• 2.2.4 光照梯度實驗設(shè)定25-26
• 2.2.5 數(shù)據(jù)分析與處理26-27
• 3 離體法測定滸苔NRA條件及滸苔體內(nèi)硝酸鹽含量測定方法的確定27-33
• 3.1 離體法提取時間的確定27
• 3.2 酶促反應(yīng)時間的確定27-28
• 3.3 PMS體積的影響28-29
• 3.4 NADH濃度的影響29
• 3.5 KNO_3濃度的影響29-31
• 3.6 滸苔體內(nèi)硝酸鹽含量測定方法的確定31-32
• 3.7 小結(jié)32-33
• 4 溫度對滸苔生長及其硝酸還原酶活力(NRA)的影響33-47
• 4.1 溫度對滸苔生長的影響33-35
• 4.2 溫度對滸苔細胞內(nèi)NRA的影響35-36
• 4.3 溫度對滸苔體內(nèi)硝酸鹽的影響36-37
• 4.4 溫度對滸苔體內(nèi)亞硝酸鹽的影響37-38
• 4.5 不同溫度下培養(yǎng)介質(zhì)中硝酸鹽濃度的變化情況38-39
• 4.6 不同溫度下滸苔體內(nèi)碳氮比的變化39-40
• 4.7 不同溫度下滸苔生長與NRA的關(guān)系40-42
• 4.8 不同溫度下滸苔體內(nèi)硝酸鹽與NRA的關(guān)系42-44
• 4.9 不同溫度下滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽與NRA的關(guān)系44-46
• 4.10 小結(jié)46-47
• 5 光照對滸苔生長及其硝酸還原酶活力(NRA)的影響47-62
• 5.1 光照對滸苔生長的影響47-49
• 5.2 光照對滸苔細胞內(nèi)NRA的影響49-50
• 5.3 光照對滸苔體內(nèi)硝酸鹽的影響50-51
• 5.4 光照對滸苔體內(nèi)亞硝酸鹽的影響51-52
• 5.5 不同光強下培養(yǎng)介質(zhì)中硝酸鹽濃度的變化情況52-53
• 5.6 不同光強下滸苔體內(nèi)碳氮比的變化53-54
• 5.7 不同光照強度下滸苔生長與NRA的關(guān)系54-56
• 5.8 不同光強下滸苔體內(nèi)硝酸鹽與NRA的關(guān)系56-58
• 5.9 不同光強下滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽與NRA的關(guān)系58-60
• 5.10 小結(jié)60-62
• 6 結(jié)論62-64
• 參考文獻64-73
• 致謝73-74
• 個人簡歷74
• 發(fā)表的學術(shù)論文74

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