本文從對(duì)苝酰亞胺的修飾入手,合成了新型的熒光探針并將它們應(yīng)用于生物細(xì)胞成像。1.詳細(xì)論述了熒光探針的發(fā)光原理,以及熒光探針的響應(yīng)方式,并對(duì)最近幾年的研究進(jìn)行了綜述,闡明了課題的選擇原因。2.合成了灣位氯原子取代的含有嗎啉基團(tuán)的熒光探針M-PBI,并將其用于溶酶體成像。該探針合成簡(jiǎn)單,對(duì)pH有著靈敏的響應(yīng),在pH 3-5.86之間有著良好的線性關(guān)系。經(jīng)計(jì)算pKa為4.73,符合溶酶體中pH微環(huán)境,可用于細(xì)胞溶酶體成像。此外該探針具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性,3h內(nèi)沒(méi)有任何熒光的淬滅,以及高選擇性、可逆性和抗干擾能力,這能極大程度降低細(xì)胞內(nèi)的干擾。同時(shí)由于MPBI只在酸性條件下?lián)碛兴苄缘奶攸c(diǎn),該探針可以作為免洗染料用于體內(nèi)成像。M-PBI在4T1細(xì)胞中的應(yīng)用成功的表明M-PBI可用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)溶酶體的pH。3.氣體信號(hào)分子NO在細(xì)胞中占據(jù)重要地位,NO的紊亂表達(dá)會(huì)對(duì)生理機(jī)能產(chǎn)生影響,為了能夠監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)的NO,合成了具有肼修飾的苝酰亞胺(PBI)衍生物探針N-PBI。由于肼官能團(tuán)的引入,N-PBI形成D-π-A結(jié)構(gòu),使得與傳統(tǒng)PBI衍生物相比有較大的光譜紅移。該探針?biāo)雇锌怂刮灰拼?pH穩(wěn)定性強(qiáng),能夠最...

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 光致發(fā)光:理論與原理
    1.2 熒光的基本概念
        1.2.1 熒光染料的基本參數(shù)
        1.2.2 淬滅和光漂白
        1.2.3 熒光的溶劑化效應(yīng)
        1.2.4 共振能量轉(zhuǎn)移(RET)
    1.3 熒光探針
    1.4 有機(jī)小分子熒光染料
        1.4.1 苝四羧酸二酐的合成,性質(zhì)和應(yīng)用多樣性
    1.5 基于熒光探針的最新應(yīng)用
    1.6 選題目的及意義
第二章 嗎啉修飾的四氯代PBI探針的合成及其在p H傳感中的應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.2.2 探針的合成與表征
        2.2.3 紫外和熒光光譜的測(cè)定方法
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        2.2.5 細(xì)胞毒性的測(cè)試方法
        2.2.6 溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 pH對(duì) M-PBI的 uv-vis光譜的影響
        2.3.2 pH對(duì) M-PBI熒光光譜的影響
        2.3.3 探針的線性范圍
        2.3.4 M-PBI的光穩(wěn)定性與可逆性
        2.3.5 M-PBI的選擇性
        2.3.6 細(xì)胞毒性
        2.3.7 M-PBI的4T1 活細(xì)胞成像
        2.3.8 溶酶體共定位實(shí)驗(yàn)
    2.4 本章小結(jié)
第三章 肼修飾的PBI探針的合成及其在NO傳感中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        3.2.2 探針的合成與表征
        3.2.3 紫外和熒光光譜的測(cè)定方法
        3.2.4 NO體外響應(yīng)測(cè)試
        3.2.5 細(xì)胞毒性的測(cè)試方法
        3.2.6 活細(xì)胞熒光成像測(cè)試方法
        3.2.7 活細(xì)胞外源性NO成像方法
        3.2.8 活細(xì)胞內(nèi)源性NO成像方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 N-PBI在溶劑中的不同光譜
        3.3.2 探針N-PBI的測(cè)試溶劑和SNP當(dāng)量的選擇
        3.3.3 探針N-PBI對(duì) NO的響應(yīng)
        3.3.4 探針N-PBI對(duì) NO的選擇性
        3.3.5 pH對(duì)探針N-PBI的光譜影響
        3.3.6 探針與NO響應(yīng)的機(jī)理探討
        3.3.7 探針N-PBI的細(xì)胞毒性
        3.3.8 N-PBI對(duì)細(xì)胞內(nèi)NO的成像
    3.4 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄 本文中主要化合物的1H、13C以及MS圖譜
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的科學(xué)研究成果
致謝



本文編號(hào)：4042417