背景海洋生境中蘊含著豐富的具有特殊功能的微生物資源和酶資源。瓊膠酶就是一類主要由海洋微生物產(chǎn)生的糖苷水解酶。由于瓊膠酶可水解瓊脂糖產(chǎn)生具有特殊生物活性的瓊膠寡糖,使其在食品、醫(yī)藥、化妝品、日用化工和科學(xué)研究等領(lǐng)域極具應(yīng)用潛力。而現(xiàn)有瓊膠酶水解效率低、穩(wěn)定性差,極大限制了其應(yīng)用。目的為增加瓊膠酶種類,豐富現(xiàn)有瓊膠酶資源,本論文從海洋環(huán)境中分離純化可培養(yǎng)細(xì)菌,篩選產(chǎn)瓊膠酶菌株,采用基因組學(xué)和分泌組學(xué)相結(jié)合的方法最大化挖掘瓊膠酶陽性菌株所產(chǎn)瓊膠酶資源。方法1.選用4種海洋微生物培養(yǎng)基,分離、純化黃海近岸海水、海藻樣品的可培養(yǎng)細(xì)菌。通過16S rRNA基因序列分析確定候選新物種,多相分類學(xué)方法確定部分候選新物種的分類地位。使用盧戈氏碘液染色法及觀察瓊脂平板降解現(xiàn)象,篩選產(chǎn)瓊膠酶菌株。2.采用基因組學(xué)和分泌組學(xué)相結(jié)合的方法挖掘產(chǎn)瓊膠酶菌株D1326所產(chǎn)瓊膠酶,并利用DNAMAN、DNAstar、SignalP-5.0 Server等生物信息學(xué)軟件和服務(wù)器對瓊膠酶編碼基因序列進(jìn)行分析,選取代表性的新型瓊膠酶作進(jìn)一步研究。3.運用分子生物學(xué)的技術(shù)手段實現(xiàn)新型瓊膠酶Aga1459、Aga2820和Ag... 

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 瓊膠酶的簡介
    1.2 瓊膠酶的來源
    1.3 高效瓊膠酶的獲取
    1.4 瓊膠酶的應(yīng)用
    1.5 本論文研究內(nèi)容及意義
第二章 Leucothrix sargassi C3212 的分類鑒定
    2.1 材料與方法
    2.2 結(jié)果與分析
    2.3 討論與小結(jié)
第三章 Agarivorans sp.D1326 的基因組學(xué)分析
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果與分析
    3.3 討論與小結(jié)
第四章 Agarivorans sp.D1326 所產(chǎn)瓊膠酶的異源表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)
    4.1 材料與方法
    4.2 結(jié)果與分析
    4.3 討論與小結(jié)
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述:瓊膠酶的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]龍須菜酶解制備瓊膠寡糖的工藝優(yōu)化[J]. 鄧宇峰,林娟,葉秀云,楊捷.  食品工業(yè). 2019(05)
[2]來源于Wenyingzhuangia屬海洋細(xì)菌的一種β-瓊膠酶的克隆表達(dá)及性質(zhì)研究[J]. 田雪健,申晶晶,常耀光.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2019(08)
[3]重金屬離子對海洋微生物脲酶活性影響的研究[J]. 金結(jié)平,張風(fēng)麗.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(08)
[4]大腸桿菌基因工程菌誘導(dǎo)表達(dá)重組瓊膠酶rAga0917的條件優(yōu)化[J]. 陳夢仟,郭帥,孫朋洋,張鵬,王燕.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(08)
[5]江蘺瓊膠寡糖抗氧化性及對羅非魚肉的保鮮作用[J]. 宋香凝,鄭毅,姜澤東,倪輝,蔡慧農(nóng),肖安風(fēng).  食品科技. 2017(02)
[6]海洋來源瓊膠酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究[J]. 謝喜珍,林娟,謝勇,葉秀云.  中國生物工程雜志. 2017(01)
[7]瓊脂寡糖的制備及其對免疫細(xì)胞的作用[J]. 曹佳淋,辛妍嬌,湯順清.  材料科學(xué)與工程學(xué)報. 2016(06)
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[9]海洋Pseudomonas aeruginosa sp. DES-3的鑒定以及基因ap02對其產(chǎn)蛋白酶的影響研究[J]. 劉瑤,陳俊海,肖桂龍,孟燦,曾蓉,武波,蔣承建.  海洋科學(xué)進(jìn)展. 2016(04)
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碩士論文
[1]β-瓊膠酶的純化及新瓊二糖水解酶AgWH117A結(jié)構(gòu)的研究[D]. 楊孟.中國海洋大學(xué) 2015
[2]重組瓊膠酶AgaD的高效表達(dá)及初步研究[D]. 劉歡.中國海洋大學(xué) 2015
[3]龍須菜瓊膠多糖的制備技術(shù)及流變學(xué)特性的研究[D]. 張莉.中國海洋大學(xué) 2009



本文編號：3655689