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種子相關(guān)的若干過(guò)氧化物酶體和線粒體蛋白的功能和定位研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-15 22:56
  種子是植物生活周期中的重要階段。種子發(fā)育和發(fā)芽階段營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝與能量轉(zhuǎn)換極為頻繁。過(guò)氧化物酶體(種子階段稱(chēng)為乙醛酸循環(huán)體)和線粒體是兩個(gè)與能量代謝密切相關(guān)的多功能細(xì)胞器,且這兩個(gè)細(xì)胞器在功能上有密切的合作關(guān)系。過(guò)氧化物酶體中發(fā)生的脂肪酸降解、激素合成等功能對(duì)油質(zhì)種子發(fā)芽非常重要。過(guò)氧化物酶體相關(guān)突變體經(jīng)常有嚴(yán)重的發(fā)芽缺陷,但是發(fā)芽受阻的具體分子機(jī)制還不清楚,而且過(guò)氧化物酶體在淀粉種子中的研究非常缺乏。線粒體也與種子發(fā)芽關(guān)系密切。在發(fā)芽過(guò)程中,線粒體需要從相對(duì)靜止的前體狀態(tài)被激活并發(fā)育成代謝活躍的成熟狀態(tài)。線粒體是雙層膜包裹的膜性細(xì)胞器。然而,在種子發(fā)芽過(guò)程中,線粒體膜磷脂調(diào)控機(jī)制以及對(duì)線粒體生物發(fā)生和種子發(fā)芽過(guò)程的影響還不明確。本論文分為三個(gè)部分,從不同角度對(duì)過(guò)氧化物酶體和線粒體在種子相關(guān)生理過(guò)程中發(fā)揮的功能進(jìn)行探究。第一部分以過(guò)氧化物酶體乙醛酸循環(huán)中檸檬酸合酶(CSY)為切入點(diǎn),試圖探究乙醛酸循環(huán)在擬南芥(Arabidopsis thaliana)油質(zhì)種子發(fā)育過(guò)程中的作用,以及在水稻(Oryza sativa L.)淀粉種子中是否發(fā)揮類(lèi)似于油質(zhì)種子中的功能。發(fā)現(xiàn)擬南芥種子發(fā)育階段存在... 

【文章來(lái)源】:浙江大學(xué)浙江省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 過(guò)氧化物酶體在種子相關(guān)生理過(guò)程中的重要性
        1.1.1 過(guò)氧化物酶體的生物發(fā)生和主要功能
        1.1.2 乙醛酸循環(huán)的功能
        1.1.3 β-氧化作用
        1.1.4 檸檬酸合酶
    1.2 植物過(guò)氧化物酶體的蛋白組成研究
        1.2.1 過(guò)氧化物酶體蛋白定位信號(hào)
        1.2.2 過(guò)氧化物酶體蛋白組成的質(zhì)譜分析
        1.2.3 植物過(guò)氧化物酶體蛋白組成的組織特異性
    1.3 線粒體生物發(fā)生與種子發(fā)芽的關(guān)系
        1.3.1 線粒體的磷脂組成
        1.3.2 線粒體的生物發(fā)生
        1.3.3 種子發(fā)芽過(guò)程中的線粒體生物發(fā)生
第2章 乙醛酸循環(huán)在種子相關(guān)生理過(guò)程中的功能探究
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 擬南芥檸檬酸合酶AtCSY生物信息學(xué)分析
        2.2.2 擬南芥檸檬酸合酶AtCSY1亞細(xì)胞定位分析
        2.2.3 擬南芥Atcsy1突變體基因組鑒定
        2.2.4 Atcsy1-2突變體生長(zhǎng)表型及種子發(fā)芽情況分析
        2.2.5 擬南芥Atcsy1和Atcsy3 突變體雜交
        2.2.6 水稻檸檬酸合酶OsCSY生物信息學(xué)分析
        2.2.7 水稻檸檬酸合酶OsCSY的亞細(xì)胞定位分析
        2.2.8 水稻Oscsy基因突變體構(gòu)建
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 擬南芥檸檬酸合酶AtCSY生信分析
        2.3.2 擬南芥檸檬酸合酶AtCSY亞細(xì)胞定位
        2.3.3 擬南芥Atcsy1突變體鑒定
        2.3.4 擬南芥Atcsy1-2突變體生長(zhǎng)表型及種子發(fā)芽分析
        2.3.5 Atcsy3突變體鑒定
        2.3.6 水稻檸檬酸合酶OsCSY生信分析
        2.3.7 水稻檸檬酸合酶OsCSY亞細(xì)胞定位
        2.3.8 水稻OsCSY基因的突變體的構(gòu)建
    2.4 本章小結(jié)
第3章 水稻和擬南芥種子中高表達(dá)的過(guò)氧化物酶體新蛋白的鑒定
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 水稻和擬南芥候選蛋白的初步篩選
        3.2.2 熒光蛋白與候選蛋白的融合蛋白的設(shè)計(jì)
        3.2.3 水稻和擬南芥候選蛋白亞細(xì)胞定位分析
    3.3 結(jié)果與討論
    3.4 本章小結(jié)
第4章 線粒體生物發(fā)生過(guò)程中的磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)種子發(fā)芽過(guò)程的影響
    4.1 試驗(yàn)材料
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 PLTP1蛋白生物信息學(xué)分析
        4.2.2 PLTP1蛋白亞細(xì)胞定位分析
        4.2.3 PLTP1基因表達(dá)模式分析
        4.2.4 pltp1基因的突變體創(chuàng)建
        4.2.5 pltp1突變體生長(zhǎng)表型觀察
        4.2.6 pltp1突變體葉片加速老化試驗(yàn)
        4.2.7 pltp1突變體中抗病基因表達(dá)分析
        4.2.8 pltp1突變體中線粒體熒光顯微鏡觀察
        4.2.9 pltp1突變體中線粒體電子顯微鏡觀察
        4.2.10 pltp1突變體逆境發(fā)芽
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 PLTP1蛋白生信學(xué)分析
        4.3.2 PLTP1蛋白亞細(xì)胞定位
        4.3.3 PLTP1基因表達(dá)模式
        4.3.4 PLTP1基因的突變體創(chuàng)建
        4.3.5 Atpltp1 生長(zhǎng)表型分析
        4.3.6 pltp1突變體葉片加速老化試驗(yàn)
        4.3.7 pltp1突變體中線粒體熒光顯微鏡觀察
        4.3.8 pltp1突變體中線粒體透射電子顯微鏡觀察
        4.3.9 pltp1突變體中抗病基因表達(dá)分析
        4.3.10 pltp1突變體種子高溫發(fā)芽試驗(yàn)
    4.4 本章小結(jié)
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Peroxisomes in plant reproduction and seed-related development[J]. Ronghui Pan,Jun Liu,Jianping Hu.  Journal of Integrative Plant Biology. 2019(07)



本文編號(hào):3627425

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