天然產物數(shù)量龐大,結構、活性及作用機制復雜多樣,是新藥開發(fā)的重要源泉。放線菌是天然產物的最主要來源,眾多放線菌來源的天然產物及其衍生物為癌癥、阿爾茲海默癥和瘧疾等疾病的治療做出了很大貢獻。但近年來天然產物的重復發(fā)現(xiàn)率越來越高,多重耐藥菌株不斷出現(xiàn),對抗生素的研發(fā)速度及質量提出了更高的要求。海洋為巨大的生物資源寶庫,很多海洋放線菌為了適應低溫低氧高鹽高壓的極端環(huán)境,衍生出多種抗逆機制,使其次級代謝途徑更加特殊,產物結構更加新穎,海洋放線菌天然產物是藥物先導化合物的重要來源。本研究聚焦于海洋放線菌中新型活性天然產物的挖掘。首先從海洋沉積物中分離到多株具有抗菌活性的放線菌,并對Streptomyces sp.S42進行活性為指導的天然產物挖掘,但僅鑒定出已知化合物司帕霉素。然后通過16S rDNA序列比對發(fā)現(xiàn)Streptomyces sp.S42的分類地位較新,通過基因組測序發(fā)現(xiàn)其基因組編碼25個天然產物生物合成基因簇,大多與已知基因簇相似度較低,因此有必要對其進行基因組挖掘。本研究選擇Streptomyces sp.S42中五個新穎的孤兒基因簇（最大77kb）利用Red/ET重組工程技術進... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?Ｉ丨型ＰＫＳ?Ｔｅｔｒａｃｅｎｏｍｙｃｉｎ?Ｃ的生物合成機制［３０］??Ｆｉｕｒｅ?１－２?Ｂｉｏｓｎｔｈｅｓｉｓ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ｔｅ?ＩＩ?ＰＫＳ?Ｔｅｔｒａｃｅｎｏｍｙｃｉｎ?Ｃ??

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?山東大學碩士學位論文???利用Ｒｅｄ／ＥＴ重組工程技術選擇新穎的孤兒基因族進行直接克隆，確定異源表達??宿主，通過組合生物學重構進行理性激活。然后通過分離純化技術鑒定相應代謝??產物，測定生物活性，從中篩選低毒性高活性的藥物先導化合物。同時研宄化合??物構效關系，闡明活性作用機制，并解析其生物合成途徑。最后利用組合生物合??成得到雜合基因簇，獲得更多結構衍生物。??ＯＰ?ＢＧＣｓ挖掘??基因組測序?ｒ??活性追蹤?－?＾ＡｉｊＡＧＣ?丨樸??活性測定ｆ分離純化??★?－?－??—－闡明生物合成途徑?ｇ．??｜遺傳修飾??＾?｜?（大腸桿菌）??＼?＿?ｐｒｏｍｏｌｔｒ??％Ｎ＾＿?Ｉ?議?ＬＣ－ＭＳ?接合轉移?＾?＇?＇ｉ＞??、一?＾￣?Ｌ？一?？?丁??圖１－７本研究技術路線（以“★”為出發(fā)點）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－７?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅｓｅａｒｃｈ?（Ｔａｋｅ?ａｓ?ｔｈｅ?ｓｔａｒｔｉｎｇ?ｐｏｉｎｔ）??１４??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3590967