腈水合酶催化腈類化合物生成相應(yīng)的酰胺類化合物,在工業(yè)生產(chǎn)丙烯酰胺、煙酰胺等化合物方面具有重要的應(yīng)用。腈水合酶特異性高,利用其生產(chǎn)酰胺能耗低、副產(chǎn)物少。但是游離的腈水合酶穩(wěn)定性差、易失活、難以回收利用,將酶固定化可以很好地解決上述問題。氧化硅材料是最為常見的固定化酶載體之一,它形式多樣、無毒害、生物相容性好,被認(rèn)為是適用于酶固定化的較為理想的載體。本研究以鈷型腈水合酶ES-NHT-118為模型酶,以氧化硅材料為載體,分別采用包埋法和固載化交聯(lián)酶聚集體（cross-linked enzyme aggregates,CLEAs）的方法進(jìn)行酶的固定化。對固定化酶的制備過程、催化性能和穩(wěn)定性進(jìn)行研究,并將兩種氧化硅固定化腈水合酶用于煙酰胺的制備。主要內(nèi)容如下:（1）仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶（Encapsulated NHase）的制備以及性能研究。以正硅酸甲酯為前驅(qū)體,聚二甲基二烯丙基氯化銨為催化劑,溫和快速地實(shí)現(xiàn)腈水合酶的包埋。固定化酶的顆粒直徑約為100 nm,包埋率高于98.0%,酶活回收率為26.7%�？疾炝擞坞x酶與固定化酶的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、操作穩(wěn)定性以及儲藏穩(wěn)定性。與游離酶相... 

【文章來源】：河北工業(yè)大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 腈水合酶
    1.2 氧化硅材料固定化酶
        1.2.1 氧化硅材料包埋固定化酶
        1.2.2 氧化硅材料吸附固定化酶
    1.3 煙酰胺
    1.4 本論文的選題思路及主要工作
第二章 仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶的制備及性能研究
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 固定化酶的表征
        2.3.2 仿生氧化硅包埋固定化腈水合酶的酶學(xué)性能及穩(wěn)定性研究
    2.4 小結(jié)
第三章 介孔氧化硅固載化腈水合酶 CLEAs 的制備及性能研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 固定化酶載體的表征
        3.3.2 固定化酶的表征
        3.3.3 固定化條件的優(yōu)化
        3.3.4 介孔氧化硅固載化腈水合酶CLEAs的酶學(xué)性能及穩(wěn)定性研究
    3.4 小結(jié)
第四章 氧化硅固定化腈水合酶制備煙酰胺
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 溫度對煙酰胺產(chǎn)率的影響
        4.3.2 pH對煙酰胺產(chǎn)率的影響
        4.3.3 酶活對煙酰胺產(chǎn)率的影響
        4.3.4 不同底物濃度下的反應(yīng)進(jìn)程曲線
        4.3.5 重復(fù)使用性
        4.3.6 動力學(xué)參數(shù)的測定
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與主要創(chuàng)新點(diǎn)
    5.1 結(jié)論
    5.2 主要創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間所取得的相關(guān)科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脂質(zhì)體為模板仿生硅化固定葡萄糖氧化酶[J]. 朱亞男,姜艷軍,高靜,周麗亞,賀瑩,賈霏.  催化學(xué)報(bào). 2013(04)



本文編號：3581542