發(fā)布時(shí)間：2022-01-01 02:10

　　硫酸軟骨素/硫酸皮膚素（Chondroitin Sulfate/Dermatan Sulfate,CS/DS）是一類直鏈線性聚陰離子多糖,由重復(fù)二糖單位組成。CS二糖單位的結(jié)構(gòu)為由β-1,3糖苷鍵連接的葡萄糖醛酸（GlcUA）和N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）,二糖單位之間由β-1,4糖苷鍵連接而成CS的基本糖鏈骨架;當(dāng)CS二糖單位中的GlcUA在C-5差向異構(gòu)酶的作用下變?yōu)榘盘侨┧幔↖doUA）時(shí),形成了 DS二糖單位。其中,GlcUA或IdoUA的C-2、C-3位和GalNAc的C-4、C-6位在硫酸基轉(zhuǎn)移酶的作用下會(huì)發(fā)生不同程度的硫酸化而形成不同硫酸化模式的二糖單位,從而產(chǎn)生結(jié)構(gòu)高度復(fù)雜的CS/DS糖鏈結(jié)構(gòu)。CS/DS是一類重要的糖胺聚糖（Glycosaminoglycan,GAG）,作為蛋白聚糖（Proteoglycans,PGs）的側(cè)鏈而存在。CS/DS鏈的結(jié)構(gòu)高度復(fù)雜性賦予了其不同的生物活性,如參與細(xì)胞生長,細(xì)胞粘附,病毒的侵染,神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育等等。序列的不均一性,二糖排列的多變,糖醛酸的異構(gòu)化尤其是硫酸化模式的不同使得CS/DS的結(jié)構(gòu)與功能的研究面臨巨大的挑戰(zhàn)。CD/D... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２部分ＧＡＧｓ裂解酶的降解模式［２３］??１．３．１?ＣＳａｓｅＡＢＣ??

山東大碩被第一次鑒定［３６］，是一種外切型裂解酶，可以將ＣＳ糖鏈中的ＧａｌＮＡｃ和ＧＩｃＡ??之間的（３－１，４糖苷鍵斷裂，產(chǎn)生一系列的寡糖，主要為不飽和二糖結(jié)構(gòu)，如圖１－??３所示。ＣＳａｓｅ?ＡＣＩＩ也對(duì)透明質(zhì)酸有降解活性，可以降解ＨＡ中的ＧｌｃＮＡｃ和??ＧｌｃＡ之間的ｐ－ｌ，４糖苷鍵，但是它卻不可以降解ＤＳ。ＣＳａｓｅＡＣｌＩ表現(xiàn)出一種外??切酶的作用模式，它可以從多糖鏈的非還原端一次切下一個(gè)二糖單位。ＣＳａｓｅＡＣ??Ｉ發(fā)現(xiàn)于肝素黃桿菌？／ｒ／〇ｆｖｏＡｏｃｔｏ＂／ＭＷ?Ａｅｐａｒ／ｗｗｗ，是一種內(nèi)切酶，可以隨機(jī)切割ＨＡ??和ＣＳ糖鏈中己糖胺ＧｌｃＮＡｃ和ＧａｌＮＡｃ與己糖醛酸ＧｌｃＡ之間的ｐ－１，４糖苷鍵，??但同樣不能降解ＤＳ糖鏈中ＧａｌＮＡｃ和ＩｄｏＵＡ之間的Ｐ－１，４糖苷鍵１３７，３８】。??

山東大學(xué)碩士學(xué)位論文??■＂…＝：“．｜??—５Ｓ??圖２－３?ＤＬａｓｅ?１?（左）和ＤＬａｓｅ?２?（右）的表達(dá)和純化后的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??泳道１：標(biāo)準(zhǔn)蛋白Ｍａｒｋｅｒ，?ＳＭ０４３１?（Ｔｈｅｒｍｏ），其每條條帶代表的分子量己在旁邊標(biāo)出；泳??道２：未經(jīng)誘導(dǎo)的ＤＬａｓｅ?１細(xì)胞裂解液；泳道３：誘導(dǎo)過的ＤＬａｓｅ?１細(xì)胞裂解液；泳道４：誘??導(dǎo)過的ＤＬａｓｅ?１細(xì)胞裂解液上清；泳道５：純化后的ＤＬａｓｅ?１蛋白；泳道６：標(biāo)準(zhǔn)蛋白Ｍａｒｋｅｒ，??ＳＭ０４３１?（Ｔｈｅｒｍｏ）；泳道７：未經(jīng)誘導(dǎo)的ＤＬａｓｅ２細(xì)胞裂解液；泳道８：誘導(dǎo)過的ＤＬａｓｅ２細(xì)??胞裂解液；泳道９：誘導(dǎo)過的ＤＬａｓｅ?２細(xì)胞裂解液上清；泳道１０：純化后的ＤＬａｓｅ?２蛋白。??２．４本章小結(jié)??本章利用生物信息學(xué)分析，從基因數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)疑似ＤＳ專一性裂解??酶基因說似ｅｉ?（ＧｅｎＢａｎｋ？編號(hào)：ＷＰ?０１３６３４８１６．１?）和也觀?２?（ＧｅｎＢａｎｋ？編??號(hào)：ＳＣＨ丨３５３０．１），這兩個(gè)候選基因與已鑒定的５的相似度分別為５７％和??４３％。對(duì)兩個(gè)疑似基因及其編碼蛋白序列的分析表明：說似ｅ?７基因全長為１４７３??ｂｐ，?ＧＣ含量為４９．０８％，編碼的蛋白包含４９１個(gè)氨基酸，理論分子量為５５．３５?ｋＤａ，??ｐｉ為８．６０，其Ｎ端信號(hào)肽包含２１個(gè)氨基酸；基因全長為１４０１ｂｐ，ＧＣ含??量為４８．６１％，編碼的蛋白含有４６７個(gè)氨基酸，理論分子量為５２．００?ｋＤａ，?ｐｉ為??６．１８，其Ｎ端信號(hào)肽包含１９個(gè)氨基酸。進(jìn)一步，通過全基因合成，基因重組和??蛋白質(zhì)親和純化等技術(shù)，對(duì)這兩個(gè)潛在的新型ＤＳ專一性降解酶ＤＬａｓ

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]一種硫酸軟骨素E降解抗性的糖胺聚糖裂解酶的鑒定與應(yīng)用[D]. 彭春娥.山東大學(xué) 2018

碩士論文
[1]美洲大赤魷來源新型硫酸軟骨素的制備及抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性研究[D]. 王慶彬.山東大學(xué) 2016
[2]鵝魚皮膠原蛋白與硫酸皮膚素的同時(shí)提取及其結(jié)構(gòu)、活性研究[D]. 楊陽.浙江工商大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3561444