哺乳動物UHRF家族蛋白包括UHRF1與UHRF2兩個主要成員,UHRF家族蛋白在表觀遺傳學(xué)和細胞周期調(diào)控中起到重要作用,并且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有很強的相關(guān)性。UHRF1與UHRF2在結(jié)構(gòu)上具有很高的相似性,功能上既有相似性也有差異性,兩者并不冗余。本課題利用Cre-Loxp體系構(gòu)建了肝臟特異性過表達人源UHRF1/2小鼠模型（C57BL/6遺傳背景）,對UHRF蛋白家族開展功能探索。肝臟特異性過表達UHRF1/2小鼠(UHRF1/2^{hep OE})能夠正常生長與繁殖,基本形態(tài)正常。HE染色顯示UHRF1/2^{hep OE}小鼠肝臟大小、形態(tài)正常。質(zhì)譜結(jié)果表明UHRF2^{hep OE}小鼠肝臟的DNA甲基化與羥甲基化修飾水平與野生型小鼠無差異。采用經(jīng)典的70%肝臟切除術(shù)構(gòu)建肝臟再生模型,記錄肝臟質(zhì)量,檢測肝臟再生指示蛋白PCNA等,Western Blot與IHC的結(jié)果表明過表達UHRF2不會對肝臟再生過程造成影響。UHRF2^{hep OE}小鼠也沒有糖脂代謝的異常。研究發(fā)現(xiàn)UHRF1^{hep OE}

【文章來源】： 華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【文章目錄】：
內(nèi)容摘要
abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 表觀遺傳學(xué)簡介
    1.2 UHRF1 蛋白研究進展
        1.2.1 UHRF1 蛋白結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 UHRF1 與表觀遺傳調(diào)控
        1.2.3 UHRF1 與癌癥
    1.3 UHRF2 蛋白研究進展
        1.3.1 UHRF2 蛋白結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.2 UHRF2 參與的生物學(xué)調(diào)控
    1.4 基因編輯小鼠
    1.5 肝臟相關(guān)研究概況
        1.5.1 肝臟再生的基本特征
        1.5.2 肝臟代謝
第二章 實驗材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 引物
        2.1.3 抗體
    2.2 試劑與儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要溶液與藥品
        2.2.3 主要實驗儀器
    2.3 常用溶液及其配制
    2.4 實驗方法
        2.4.1 小鼠繁殖與飼養(yǎng)
        2.4.2 稱重
        2.4.3 小鼠肝原代細胞的分離與培養(yǎng)
        2.4.4 血糖測定
        2.4.5小鼠肝臟部分切除實驗
        2.4.6 小鼠基因型鑒定
        2.4.7腺病毒感染實驗
        2.4.8 免疫熒光染色
        2.4.9 ALT-AST檢測
        2.4.10 蛋白質(zhì)印記實驗
        2.4.11 小鼠肝臟組織基因組DNA抽提
        2.4.12 組織或細胞的RNA抽提
        2.4.13 逆轉(zhuǎn)錄實驗
        2.4.14 免疫組織化學(xué)實驗
        2.4.15 蘇木精-伊紅（HE）染色
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 基于UHRF2^{hep OE}小鼠模型進行功能探索
        3.1.1 UHRF1^f/f小鼠遺傳背景純化與鑒定
        3.1.2 獲得UHRF2 基因肝臟特異性過表達小鼠
        3.1.3 UHRF^{2hep OE}小鼠的生長情況
        3.1.4 UHRF2 基因肝臟特異性過表達對肝臟再生無影響
        3.1.5 UHRF2 肝臟特異性過表達對肝臟基因組DNA甲基化與羥甲基無影響
    3.2 基于UHRF1hep OE小鼠模型進行功能探索
        3.2.1 UHRF1 基因肝臟特異性過表達（UHRF1hep OE）小鼠的鑒定與生長情況
        3.2.2 UHRF1 肝臟特異性過表達對肝臟代謝的影響
        3.2.3 UHRF1 肝臟特異性過表達影響肝臟糖脂代謝相關(guān)基因
第四章 討論與展望
參考文獻
附錄 （縮略語）
在學(xué)期間所得的科研成果
致謝



本文編號：3537402