家蠅（Musca domestica）能在各類病原微生物滋生的惡劣環(huán)境中生存并不斷繁殖,離不開其高效的先天免疫系統(tǒng),研究其抗病機制對深入了解昆蟲先天性免疫具有重要意義。在哺乳動物中,腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor,TNF）家族成員是重要的炎性細胞因子,且進化非常保守。Eiger作為無脊椎動物TNF直系同源物最早在果蠅中被發(fā)現(xiàn),并被證實在免疫應(yīng)答中發(fā)揮一定作用。本實驗室之前報道了一種家蠅的Eiger樣基因MdEiger,此基因在家蠅幼蟲受到細菌刺激后顯著上調(diào),并能協(xié)同Toll和IMD信號通路共同調(diào)控抗菌肽基因的表達和酚氧化物酶原的激活。本文基于上述的研究工作,對MdEiger在多種脅迫條件下的表達變化和組織定位進行了研究,研究結(jié)果如下:1.利用原核表達系統(tǒng)對MdEiger的TNF同源結(jié)構(gòu)域部分進行了重組表達,并以重組產(chǎn)物rMdEiger為免疫原免疫小鼠,通過雜交瘤技術(shù)制備并獲得4株抗rMdEiger單克隆抗體:2D9、2G8、3F4和4F6,抗體純度、特異性和效價均符合Western Blot和免疫組化要求。2.Western Blot檢測結(jié)果顯示,細胞膜上檢測... 

【文章來源】：河北大學河北省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

果蠅體內(nèi)微生物制劑的免疫識別(Buchonetal.,2014)

第一章前言5體介導的受體多聚反應(yīng)中，因為兩個JAKs距離足夠近，足以進行反磷酸(Marreroetal.,2005)�；罨腏AK使受體磷酸化，活化并磷酸化其主要底物STAT。磷酸化的STAT與具有保守SH2結(jié)構(gòu)域的STAT家族的其他成員實現(xiàn)二聚化。然后二聚體轉(zhuǎn)移到細胞核中，并與DNA序列的特定調(diào)節(jié)區(qū)結(jié)合，以激活或抑制諸如SOCS家族之類靶基因的轉(zhuǎn)錄(Gaoetal.,2005)。此外，JAK激酶是PI3K/AKT信號通路的激活劑，磷酸化的JAK可以激活PI3K，進而激活其下游級聯(lián)(Gaoetal.,2018)。當機體受到局部壓力或損害時細胞因子Upd3被激活，進而激活JAK-STAT途徑(Buchonetal.,2009a;Jiangetal.,2009;Zhouetal.,2013)。果蠅JAK-STAT通路在中腸位置調(diào)節(jié)Drosomycin類3個抗菌肽的表達(Buchonetal.,2009b;Osmanetal.,2012)。在進食狀態(tài)下，脂肪體分泌瘦素家族激素Upd2，也作為JAK-STAT通路的配體。這會影響大腦胰島素的分泌，并直接在脂肪體和大腦之間傳遞代謝信息，從而影響生物體生長和能量代謝。JAK-STAT信號通路既參與代謝活動，又介導免疫防御(Buchonetal.,2014)。圖1.2JAK/STAT途徑(Xinetal.,2020)Fig1.2JAK/STATpathway1.2.4JNK途徑IMD途徑的免疫激發(fā)還激活了c-JunN末端激酶（c-JunN-terminalkinase,JNK）途徑，兩條通路的分支點出現(xiàn)在TAK1-TAB2復合物上，與Eiger/Wengen調(diào)控的TNF樣信號級聯(lián)相交(Silvermanetal.,2003;Boutrosetal.,2002;Parketal.,

第一章前言7圖1.3Eiger/JNK途徑(Igakietal.,2014)Fig1.3Eiger/JNKpathway1.3Eiger的生理作用1.3.1Eiger在痛覺敏化中的作用疼痛感覺神經(jīng)元通常在炎癥或組織損傷后敏感，這種對組織損傷的反應(yīng)即痛覺敏感性對防止自身受傷至關(guān)重要(Goldetal.,2010)。這些變化促進了康復過程中的保護性戒斷行為(Crooketal.,2014)。哺乳動物中細胞因子TNF及其受體TNFR與細胞凋亡和傷害性敏化有關(guān)(Bazzonietal.,1996;Cunhaetal.,1992;Vogeletal.,2006;Woolfetal.,1997)。實際上，暴露于紫外線下會導致人角質(zhì)細胞合成并釋放TNF(Dyetal.,1999;Kocketal.,1990)。TNF/TNFR的這種調(diào)節(jié)作用在系統(tǒng)發(fā)育上是保守的，它們介導了脊椎動物中各種類型的致敏作用(Vogeletal.,2006;Inglisetal.,2005;Cunhaetal.,2005;Zhangetal.,2011)。果蠅幼蟲暴露于有害的熱環(huán)境或機械刺激條件下時，會表現(xiàn)出與正常運動不同的反感反應(yīng)：螺旋式滾動反應(yīng)(Imetal.,2012)。這種傷害行為可以在一定溫度范圍內(nèi)精確量化(Chattopadhyayetal.,2012)。在果蠅紫外線誘導的傷害性敏化過程中，細胞凋亡的表皮細胞會產(chǎn)生保守炎癥細胞因子TNF/Eiger，Eiger不是通過其它細胞因子等介質(zhì)的作用而是通過其受體TNFR/Wengen在傷害性感覺神經(jīng)元中發(fā)揮作用，將熱異常性疼痛撤回至先前的無害溫度。在果蠅幼蟲中，紫外線引

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Cytokines,STATs and Liver Disease[J]. Bin Gao~(1,2) ~1Section on Liver Biology,Laboratory of Physiologic Studies,National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism,National Institutes of Health,Bethesda,MD 20892,USA;.  Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)

碩士論文
[1]家蠅Eiger/Wengen的免疫功能研究[D]. 李文倩.河北大學 2018



本文編號：3508809