根毛顯著增加了根系的表面積,并促進了植物對水和養(yǎng)分的吸收,同時,作為單個細(xì)胞也為植物細(xì)胞發(fā)育、分化和伸長等研究提供了理想的模型。因此,研究根毛生長發(fā)育機制具有重要的科學(xué)和理論意義。微絲結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)錄因子是調(diào)控根毛生長發(fā)育的兩個關(guān)鍵因素,然而,根毛生長發(fā)育中兩者相關(guān)聯(lián)的分子機制研究未見任何報道。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)Atadf11突變體呈現(xiàn)出長且密集的根毛表型,因此本試驗對在根毛生長發(fā)育中調(diào)節(jié)微絲解聚因子AtADF11的機制展開了研究,揭示了根毛生長發(fā)育中,轉(zhuǎn)錄因子AtCPC調(diào)節(jié)AtADF11的作用。試驗研究結(jié)果如下:（1）鑒定了Atcpc純合突變體。利用qRT-PCR檢測Atcpc純合突變體根中AtADF11基因相對表達(dá)量,結(jié)果顯示AtCPC基因缺失后AtADF11基因相對表達(dá)量顯著上調(diào),表明AtCPC負(fù)向調(diào)節(jié)AtADF11的表達(dá)量。（2）構(gòu)建AtADF11基因表達(dá)載體,遺傳轉(zhuǎn)化并篩選過表達(dá)純合株系。鑒定Atadf11-1純合突變體和AtADF11-OE#21過表達(dá)植株。檢測了Atcpc突變體與AtADF11遺傳植株的雜交材料:Atcpc Atadf11-1和Atcpc AtADF11-O... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Atcpc突變體植株鑒定Fig.3-1IdentificationofAtcpcmutant

沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文35第三章結(jié)果與分析3.1AtCPC突變對AtADF11基因表達(dá)的影響3.1.1Atcpc純合突變體的鑒定圖3-1Atcpc突變體植株鑒定Fig.3-1IdentificationofAtcpcmutant圖3-2Atcpc突變體中AtCPC基因表達(dá)量檢測Fig.3-2TheexpressionlevelofAtCPCinAtcpcAtcpc突變體鑒定的瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果如圖3-1所示，以僅存在由BP和RP引物擴增出的DNA片段鑒定為純合突變體。AtCPC基因的相對表達(dá)量qRT-PCR檢測結(jié)果如圖3-2所示，計算得出Atcpc突變體的AtCPC基因相對表達(dá)量為0.12，與野生型植株相比顯著降低，說明突變體為基因表達(dá)明顯下調(diào)的純合突變體，可用于后續(xù)試驗。

第三章結(jié)果與分析363.1.2Atcpc突變體根中AtADF11基因表達(dá)量檢測圖3-3Atcpc突變體根中AtADF11基因表達(dá)量檢測Fig.3-3TheexpressionlevelofAtADF11inAtcpcroot提取WT和Atcpc純合突變體皿內(nèi)無菌培養(yǎng)7d的根部RNA逆轉(zhuǎn)錄后進行qRT-PCR(實時熒光定量PCR)檢測AtADF11基因表達(dá)量，SPSS軟件獨立樣本T檢驗分析三次重復(fù)獨立試驗數(shù)據(jù)差異的顯著性(*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)，得到結(jié)果如圖3-3所示。通過計算得出Atcpc突變體根中AtADF11基因相對表達(dá)量為2.81，與野生型植株相比基因表達(dá)量顯著升高，轉(zhuǎn)錄因子AtCPC的功能缺失極大程度上促進了AtADF11基因在擬南芥根中的表達(dá)，表明轉(zhuǎn)錄因子AtCPC作為負(fù)調(diào)節(jié)劑影響了AtADF11基因在根中的特異性表達(dá)。3.2根毛生長發(fā)育中AtCPC對AtADF11的調(diào)控作用3.2.1AtADF11過表達(dá)遺傳材料構(gòu)建與篩選圖3-4AtADF11基因CDS序列的克隆Fig.3-4CloningofAtADF11GeneCDSSequence

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The Villin/Gelsolin/Fragmin Superfamily Proteins in Plants[J]. Hui Su Ting Wang Huaijian Dong Haiyun Ren (Key Laboratory of Cell Proliferation and Regulation Biology of Ministry of Education,and College of Life Sciences,Beijing Normal University,Beijing 100875,China.  Journal of Integrative Plant Biology. 2007(08)



本文編號：3503060