目的:探討p107與轉(zhuǎn)錄因子Survivin在食管癌ECA109細(xì)胞中是否存在結(jié)合現(xiàn)象及相互作用,并觀察p107與Survivin的結(jié)合現(xiàn)象對(duì)IKKβ的表達(dá)是否具有調(diào)控作用。方法:構(gòu)建CMV-MCS-3flag-Survivin-SV40-Neomycin和CMV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin載體,用Western-blot方法檢測(cè)其在食管癌ECA109細(xì)胞中表達(dá)情況。采用免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)p107蛋白與Survivin蛋白是否存在結(jié)合現(xiàn)象,采用細(xì)胞核定位實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p107蛋白與Survivin蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位,最后采用雙熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)這種結(jié)合現(xiàn)象對(duì)IKKβ啟動(dòng)子活性的調(diào)控。結(jié)果:Western-blot結(jié)果顯示在食管癌ECA109細(xì)胞中轉(zhuǎn)染CMV-MCS-3flag-Survivin-SV40-Neomycin和C MV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin質(zhì)粒后,在大小約19.0kD的位置檢測(cè)出含F(xiàn)lag標(biāo)簽的Survivin蛋白以及16.5kD的位置檢測(cè)出內(nèi)源性的Survivin蛋白,大約110.0k D的位置檢測(cè)出含F(xiàn)l... 

【文章來(lái)源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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摘要
ABSTRACT
前言
研究?jī)?nèi)容與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 研究對(duì)象
        1.2 主要試劑及配制方法
        1.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、抽提所需主要試劑
        1.4 免疫共沉淀所需主要試劑
        1.5 Western-Blotting相關(guān)主要試劑及耗材
        1.6 Western-Blotting主要試劑的配制
        1.7 細(xì)胞核定位所需主要試劑
        1.8 細(xì)胞核定位主要試劑的配制
        1.9 熒光素酶報(bào)告基因所需主要試劑
        1.10 本研究所使用的主要儀器
    2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法
        2.1 食管癌ECA109細(xì)胞初步檢測(cè)Survivin與p107結(jié)合現(xiàn)象
        2.2 食管癌ECA109細(xì)胞中檢測(cè)Survivin與p107在細(xì)胞內(nèi)的定位
        2.3 食管癌ECA109細(xì)胞中Survivin與p107互動(dòng)對(duì)IKKβ啟動(dòng)子調(diào)節(jié)
    3 質(zhì)量控制
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
技術(shù)路線圖
結(jié)果
討論
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述 p107的最新進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3501616