我國是世界上生姜種植面積最大且生產(chǎn)總量最多的國家,其中北方則主要以山東省種植面積最大。但是隨著種植的推廣許多問題也就逐漸凸顯,主要是防治過程中的過量施肥或者其他不當(dāng)防治所帶來的環(huán)境污染和土質(zhì)下降等問題日益顯著,所以需要找一種新的低污染的科學(xué)方法來取代傳統(tǒng)方法。微生物菌劑在提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量的同時(shí)防止環(huán)境污染,改善環(huán)境和土壤質(zhì)量,實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。開發(fā)生姜專用微生物菌劑有利于生姜的綠色高效生產(chǎn)。本研究主要圍繞對(duì)四株不同的生姜根際促生菌的菌株鑒定和功能篩選開展工作,研究了不同菌劑處理對(duì)生姜的促生效果,探討了菌劑對(duì)生姜根際微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。經(jīng)過形態(tài)觀察,生理生化特征分析以及16S rDNA序列分析,鑒定四株菌分別為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）LCDD6、蘇云金芽孢桿菌（B.thuringiensis）TA-201、蘇云金芽孢桿菌（B.thuringiensis）TA-202和蕈狀芽孢桿菌（B.mycoides）TA-203。對(duì)四株菌株的解蛋白、產(chǎn)鐵載體等功能進(jìn)行檢測(cè),其中LCDD6、TA-201、TA-202、TA-203有產(chǎn)IAA、解蛋白、產(chǎn)鐵載體和... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 莒縣生姜生產(chǎn)現(xiàn)狀
    1.2 植物根際促生細(xì)菌
        1.2.1 植物根際促生細(xì)菌概念
        1.2.2 植物根際促生細(xì)菌作用機(jī)制
        1.2.3 植物根際促生細(xì)菌的應(yīng)用
    1.3 微生物肥料
        1.3.1 概念
        1.3.2 微生物肥料分類
    1.4 微生物多樣性
        1.4.1 微生物多樣性的重要性
        1.4.2 評(píng)估微生物多樣性的技術(shù)
    1.5 全基因組測(cè)序技術(shù)
        1.5.1 概述
        1.5.2 基因組測(cè)序技術(shù)的發(fā)展
        1.5.3 基因組數(shù)據(jù)分析
    1.6 研究意義、研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線
        1.6.1 研究意義
        1.6.2 研究?jī)?nèi)容
        1.6.3 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)菌株
    2.2 主要儀器和設(shè)備
    2.3 主要藥品試劑
    2.4 培養(yǎng)基
    2.5 菌株鑒定
        2.5.1 菌株形態(tài)學(xué)觀察
        2.5.2 DNA提取
        2.5.3 16SrDNA序列PCR擴(kuò)增
        2.5.4 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
    2.6 菌株生理生化特征的測(cè)定
    2.7 菌株促生功能鑒定
        2.7.1 細(xì)菌分泌IAA定性測(cè)定
        2.7.2 細(xì)菌產(chǎn)蛋白酶的鑒定
        2.7.3 細(xì)菌產(chǎn)鐵載體的鑒定
        2.7.4 細(xì)菌解磷能力鑒定
    2.8 抗生素合成基因檢測(cè)
    2.9 盆栽實(shí)驗(yàn)
        2.9.1 菌株準(zhǔn)備
        2.9.2 菌株對(duì)姜苗的影響
        2.9.3 指標(biāo)測(cè)定及方法
    2.10 大田實(shí)驗(yàn)
        2.10.1 大田試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.10.2 指標(biāo)測(cè)定及方法
    2.11 全基因組測(cè)序分析
        2.11.1 實(shí)驗(yàn)流程
        2.11.2 信息分析流程
    2.12 培養(yǎng)基成分優(yōu)化
        2.12.1 生長(zhǎng)曲線測(cè)定
        2.12.2 碳源優(yōu)化
        2.12.3 氮源優(yōu)化
        2.12.4 無機(jī)鹽的優(yōu)化
        2.12.5 pH值的優(yōu)化
3 結(jié)果與分析
    3.1 菌株鑒定
        3.1.1 菌株形態(tài)學(xué)觀察
        3.1.2 系統(tǒng)發(fā)育樹
    3.2 菌株生理生化特征
    3.3 菌株功能性代謝產(chǎn)物研究
        3.3.1 生長(zhǎng)素
        3.3.2 蛋白酶
        3.3.3 解磷能力
        3.3.4 鐵載體
    3.4 抗生素合成基因PCR檢測(cè)結(jié)果
        3.4.1 Surfactin合成基因
        3.4.2 Fengycin合成基因
        3.4.3 其他抗生素合成基因
    3.5 菌劑生姜盆栽應(yīng)用效果
        3.5.1 菌劑對(duì)生姜農(nóng)藝性狀的影響
        3.5.2 菌劑對(duì)生姜生物量的影響
        3.5.3 菌劑對(duì)生姜葉片酶活的影響
        3.5.4 菌劑對(duì)生姜葉綠素的影響
        3.5.5 菌劑對(duì)細(xì)菌菌群多樣性的影響
            3.5.5.1 OTU聚類
            3.5.5.2 土壤微生物豐富度與多樣性評(píng)估
            3.5.5.3 群落結(jié)構(gòu)分析
            3.5.5.4 不同處理間細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)比較
    3.6 大田試驗(yàn)
        3.6.1 大田生姜幼苗期生長(zhǎng)情況
        3.6.2 大田生姜生長(zhǎng)期生長(zhǎng)情況
        3.6.3 大田生姜成熟期生長(zhǎng)情況
        3.6.4 大田生姜農(nóng)藝性狀
        3.6.5 不同處理對(duì)生姜根際微生物多樣性與群落結(jié)構(gòu)的影響
            3.6.5.1 OTU聚類
            3.6.5.2 土壤微生物豐富度與多樣性評(píng)估
            3.6.5.3 群落結(jié)構(gòu)分析
            3.6.5.4 不同處理間微生物群落結(jié)構(gòu)比較
    3.7 地衣芽孢桿菌LCDD6 全基因組分析
        3.7.1 地衣芽孢桿菌LCDD6 基因組組分分析
        3.7.2 地衣芽孢桿菌LCDD6 基因功能注釋
            3.7.2.1 蛋白編碼基因的GO注釋
            3.7.2.2 蛋白編碼基因的KEGG注釋
            3.7.2.3 蛋白編碼基因的COG注釋
            3.7.2.4 基因組圈圖繪制
        3.7.3 地衣芽孢桿菌LCDD6 基因組功能預(yù)測(cè)分析
            3.7.3.1 基因島預(yù)測(cè)
            3.7.3.2 碳水化合物相關(guān)酶(CAZy)分析
            3.7.3.3 抗生素抗性(CARD)分析
            3.7.3.4 前噬菌體序列分析
            3.7.3.5 次生代謝產(chǎn)物預(yù)測(cè)
        3.7.4 地衣芽孢桿菌LCDD6 潛在促生基因分析
            3.7.4.1 與生長(zhǎng)素相關(guān)的促生基因預(yù)測(cè)
            3.7.4.2 與溶磷相關(guān)的促生基因預(yù)測(cè)
            3.7.4.3 與鐵載體相關(guān)的基因預(yù)測(cè)
    3.8 LCDD6 培養(yǎng)基成分優(yōu)化結(jié)果
        3.8.1 生長(zhǎng)曲線測(cè)定
        3.8.2 碳源對(duì)LCDD6 生長(zhǎng)的影響
        3.8.3 氮源對(duì)LCDD6 生長(zhǎng)的影響
        3.8.4 無機(jī)鹽對(duì)LCDD6 生長(zhǎng)的影響
        3.8.5 pH值對(duì)LCDD6 生長(zhǎng)的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]微生物肥料在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 朱詩君,金樹權(quán),王麗麗,汪峰,沈安余.  寧波農(nóng)業(yè)科技. 2019(01)
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碩士論文
[1]不同耕作深度對(duì)水稻生長(zhǎng)和土壤養(yǎng)分的影響[D]. 王馨卉.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]芽孢桿菌蛋白酶產(chǎn)生條件、部分酶學(xué)性質(zhì)及其基因的克隆研究[D]. 王海豐.四川大學(xué) 2002



本文編號(hào)：3438386