細(xì)菌生物被膜是附著在生物或者非生物表面并由胞外基質(zhì)所包裹的系統(tǒng)化、組織化的細(xì)菌多細(xì)胞群落。生物被膜的形成能幫助細(xì)菌抵抗不利環(huán)境并產(chǎn)生抗逆性狀,與病原微生物的致病性及耐藥性密切相關(guān),從而成為抗生素類藥物篩選和評(píng)估的重要模式材料。已有的研究表明,細(xì)菌生物被膜的耐藥性是多種機(jī)制共同作用的結(jié)果,其中胞外基質(zhì)的屏障作用是抵御抗生素入侵的“第一道防線”。瓊脂盤(pán)擴(kuò)散測(cè)定法被廣泛用于細(xì)菌生物被膜對(duì)抗生素屏障能力的快速測(cè)試,但是存在著使用的生物被膜與臨床上病原細(xì)菌形成的生物被膜有較大差異,以及測(cè)試耗時(shí)耗力,通量較低,不適合用于大規(guī)模活性化合物篩選等問(wèn)題。針對(duì)這些不足,本文建立了一種抗生素滲透浸沒(méi)培養(yǎng)細(xì)菌生物被膜快速分析法,并對(duì)該方法進(jìn)行了評(píng)估與應(yīng)用。我們選取了活性篩選的常用標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌K12以及臨床上兩類導(dǎo)致生物被膜相關(guān)感染的重要病原細(xì)菌革蘭氏陰性的鮑氏不動(dòng)桿菌ATCC19606和革蘭氏陽(yáng)性的變異鏈球菌UA159作為基本實(shí)驗(yàn)菌株。針對(duì)性優(yōu)化了生物被膜浸沒(méi)培養(yǎng)條件,利用Transwell小室系統(tǒng),在其濾膜上培養(yǎng)了三種細(xì)菌的浸沒(méi)生物被膜。與瓊脂盤(pán)擴(kuò)散測(cè)定法中使用的生物被膜進(jìn)行了對(duì)比分析,結(jié)果表明,相較于... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１細(xì)菌生物膜的形成過(guò)程??

ｓ?息??Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ，?Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ?Ｏｒｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＯＨｓｔｅ．?Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｉ?ａｎｄ?＾ＮＳ＞＜ａｃｔｉｒ？ｏｍｙｃｅｔｅ?（ｃ）??４－?Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，?ＥｕｂａｃｔｅｒＨｉｍ?Ａｃｔｍｏｍｙｃｒｔｅ＾＾＾?ＰＭｕｄｏｍｏｎａｓ?（ｆ）－２?ｗｒ??ｓｒｔｅ６ａｃｊｊ＾ｐｒ＾?妒??Ｏｂ？ｉｔ＞?（ｄ）?Ｃｏｌｏｎ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｈ）???陳時(shí)）??Ｐａｎｃｒｔａｔｉｃ?Ｃａｎｃｅｒ?（ｇ）???圖１－４?口腔微生物群與口腔和全身疾病有關(guān)引自文獻(xiàn)（Ｌｕｅ／此２０１９）??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｏｒａｌ?ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ?ｉｓ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｔｏ?ｏｒａｌ?ａｎｄ?ｓｙｓｔｅｍｉｃ?ｄｉｓｅａｓｅｓ?（Ｌｕ?ｅｔ?ａ／．，?２０１９）??１．６牙菌斑生物被膜與齲病的發(fā)生??１．６．１牙菌斑與齲病??牙菌斑（ｄｅｎｔａｌ?ｐｌａｑｕｅ）是口腔菌群在牙齒上聚集形成的高度結(jié)構(gòu)化的典型??的生物被膜。這種生存方式可以幫助口腔細(xì)菌抵御苛刻的口腔環(huán)境變化，起到屏??障作用，同時(shí)便于攝取和�。貌厥澄铮岣呔植康臓I(yíng)養(yǎng)物濃度（Ｚｈａｎｇｅ／ｏ／．，２０１１）。??齒禹病（ｄｅｎｔａｌ?ｃａｒｉｅｓ）是多種因素共同作用下由口腔菌群引起的內(nèi)源性慢性感??染性疾病，并且在口腔疾病中發(fā)病率最高。齲病在形成初期通常形成在牙齒表面??難以看見(jiàn)的裂縫（溝槽）中或牙齒之間；或在牙齒上形成可見(jiàn)的灰白色的斑點(diǎn)；??在牙頸上出現(xiàn)有凹凸感的環(huán)狀痕跡；或在牙齒咬合表面上形成的陰影或污漬。患??者若得不到及時(shí)的治療，其它病原微生物易通過(guò)受損傷的牙齒引起口腔甚至顱面??８??

????多樣性下降。牙菌斑生物被膜生態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。生物被膜中以Ｓ．ｍｗ／ａｍ為??代表的菌群開(kāi)始增加并產(chǎn)生大量有機(jī)酸，改變了口腔生物被膜的代謝，從而導(dǎo)致??環(huán)境ｐＨ值降低。牙釉質(zhì)的羥基磷灰石結(jié)構(gòu)周圍不斷出現(xiàn)的低ｐＨ環(huán)境會(huì)導(dǎo)致脫??礦質(zhì)并引發(fā)齲病過(guò)程。生物被膜胞外基質(zhì)的包裹使得致齲細(xì)菌在空間上的分布更??加緊密，從而可以提高牙齒局部表面的酸濃度；同時(shí)生物被膜也為致齲細(xì)菌提供??了多樣的保護(hù)性，賦予了細(xì)菌對(duì)于各種環(huán)境因子、化學(xué)物質(zhì)甚至宿主免疫系統(tǒng)更??強(qiáng)的抗性（Ｂｏｗｅｎ?〇／．，２０１８）。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Antimicrobial resistance in clinically important biofilms[J]. Fatemeh Rafii,Mark E Hart.  World Journal of Pharmacology. 2015(01)
[2]細(xì)菌生物膜與齲齒相關(guān)性的研究進(jìn)展[J]. 張欣然,劉新.  中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志. 2011(05)
[3]細(xì)菌生物被膜鑒定方法的研究進(jìn)展[J]. 胡錦松,陳豪泰,張杰,劉永生,徐志文,朱玲,徐凱,年陽(yáng)陽(yáng),古峰.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2010(11)
[4]Extracellular Polysaccharides Matrix—An Often Forgotten Virulence Factor in Oral Biofilm Research[J]. Hyun Koo,Marlise I.Klein.  International Journal of Oral Science. 2009(04)
[5]變形鏈球菌生物膜形成相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 劉筱娣,郭麗宏.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2006(09)



本文編號(hào)：3333894